一、大鼠非开颅术脑干缺血模型的创建（论文文献综述）
王成[1]（2021）在《颅内静脉循环障碍加重TBI后脑损伤的实验研究》文中进行了进一步梳理目的:基于激光散斑（LSCI）及磁共振技术,应用动物模型,观察创伤性急性硬膜下血肿（ASDH）压迫状态下以及开颅术中血肿清除前后脑皮层血流的时空变化。探讨TBI继发颅内静脉循环改变及开颅减压对脑血流的影响。构建ASDH与颅内静脉循环受阻复合动物模型,从影像及分子生物学角度研究颅内静脉循环障碍加重外伤后脑组织损害的病理机制,揭示外伤后脑静脉血液循环受阻与炎症反应及组织肿胀间的关系,以期为临床治疗提供指导。方法:本研究首先通过LSCI、MR静脉及血管重建技术表征大鼠大脑静脉循环的解剖结构,明确大鼠颅内静脉流出颅腔的途径。根据大鼠颅内静脉特点,结扎大鼠左侧眼眶后静脉丛和左侧岩骨裂孔处的静脉丛,形成颅内静脉回流受阻,通过LSCI动态观察受阻后局部脑皮层血流变化,为下一步实验研究奠定理论基础。其次通过改良Miller法创建ASDH大鼠模型,应用LSCI获取高分辨率的二维大脑皮层血流图,动态观察ASDH大鼠皮层脑血流的全场变化特征,通过磁共振SWI序列观察ASDH大鼠脑深部静脉回流情况,并结合颅内压、血压变化进一步分析ASDH对血管中血流参数特征影响。第三部分通过模拟ASDH大鼠开颅清除手术,应用LSCI监测ASDH大鼠血肿清除术中局部脑血流的动态变化,通过对比假手术组,探讨血肿压迫前后皮层动静脉及微循环顺应性改变,揭示脑静脉循环与术中脑肿胀之间的内在联系,更好地理解缺血再灌注损伤的发生机制。最后在ASDH动物基础上给予颅内静脉循环阻塞干预,形成复合模型。分别构建假手术组（Sham）,CVO组,ASDH组,ASDH+CVO组。进行神经行为学评估和脑含水量的测定,Evans blue染色并测定含量,免疫荧光、Elisa实验及蛋白质印迹检测炎性因子表达及金属蛋白酶ADAM17、MMP9的表达水平。并对ASDH+CVO组大鼠进行XPro1595药物干预,对比抑制sol TNF前后NF-κB/MMP9通路变化,从影像及分子生物学角度研究颅内静脉循环障碍加重外伤后的脑组织损害的病理机制。结果:通过应用LSCI、MRI血管重建技术对大鼠脑部成像可以看出大鼠颅内静脉主要通过颈外静脉回流,上矢状窦前端没有闭塞,通过端脑与嗅脑连接处的鼻喙窦向两侧与眼眶静脉丛相连,后端与双侧横窦相连形成汇点,经双侧横窦与岩骨裂隙静脉丛相连引流入颈外静脉系统。结扎大鼠一侧眼眶后静脉丛和岩骨裂孔处的静脉丛,可以使局部脑组织颅内静脉回流受阻。ASDH造成的颅高压引起压迫侧和对侧脑皮层静脉血液循环障碍。脑静脉血流与颅内压不是简单的线性相关关系。在行ASDH开颅术时,相比于动脉及毛细血管区血流速度,皮层静脉血流延迟恢复。CVO加重ASDH大鼠神经功能缺损及血脑屏障破坏,血管内皮细胞间紧密连接蛋白ZO-1、Occludin含量减少,MMP9表达升高,促进ADAM17表达水平明显升高,且ADAM17在颅内细胞定位主要于小胶质细胞或巨噬细胞（Iba-1阳性）,并伴随sol TNF的分泌增加。sol TNF/NF-κB/MMP9通路激活加重随后的炎症反应及组织损伤。结论:TBI继发的颅高压可以引起脑皮层静脉循环障碍;颅内静脉循环障碍通过促进免疫细胞ADAM17表达水平升高,导致sol TNF分泌增加及下游NF-κB/MMP9通路的激活,加重TBI后炎症反应及脑组织肿胀。脑血管功能状态改变可能是引起继发性脑损伤的基础。治疗策略上应从单纯强调改善脑灌注的目标向促使脉管系统动态平衡的转变。
鲜亮[2]（2021）在《大鼠急性硬膜下血肿对脑表面血流影响的激光散斑技术研究》文中认为第一部分:大鼠急性硬膜下血肿改良模型的构建目的建立一种新的改良大鼠急性硬膜下血肿模型,为脑创伤研究提供合适模型。方法选取成年雄性SD大鼠30只,随机分为两组。传统组基于Miller的模型构建方法,改良组基于改良的针头、注射部位和操作方法。通过比较两组大鼠的生理指标、行为评分、死亡率、磁共振表现和HE染色结果对改良后的模型进行评价。结果两组大鼠的生理指标基本一致。两组大鼠的行为学得分差异无统计学意义。改良组生存率高于传统组。MRI显示改良模型的血肿较厚且集中在注射侧。HE染色提示改良方法对注射部位周围皮层的侵犯少,比传统模型干扰因素更少。改良模型相比于传统模型能更好模拟人类血肿,且模型成功率高,操作简便,可重复性好。结论改良模型是在传统模型的基础上建立的。虽然死亡率与人类存在差异,但改良进后的模型操作简便,模拟人类血肿效果更好,并且改良模型可应用于如血流研究等更多方面研究。第二部分:大鼠急性硬膜下血肿对脑表面血流的影响目的探讨急性硬膜下血肿大鼠的脑表面血流改变。方法选取成年雄性SD大鼠30只,随机分为三组。在顶部打磨7mm×5mm透明骨窗。sham组不注射血肿;0.2m L组注射血肿量0.2m L;0.4m L组注射血肿量0.4m L。使用激光散斑成像系统透过透明骨窗观测血肿对侧半球脑表面上矢状窦、静脉、动脉的血流变化,分别于术前、术后及术后的30min、60min、90min、120min分别计算血流灌注率,并监测颅内压。对比急性硬膜下血肿前后和不同血肿量下的血流变化情况。结果两个实验组术后及术后的30min、60min上矢状窦、静脉、动脉的血液灌注率对比术前及sham组显着下降。两个实验组术后的90min、120min上矢状窦的血液灌注率与术前及sham组相比有显着差异,而静脉、动脉差异无统计学意义。两个实验组术前颅内压与sham组差异无统计学意义,术后的各个时间点的颅内压对比术前及sham组显着升高。两个实验组相互对比,各时间点上矢状窦、静脉、动脉差异无统计学意义。两个实验组相互对比,术前差异无统计学意义,术后的各个时间点的颅内压对比术前及sham组有显着差异。综上,发生急性硬膜下血肿后,大鼠颅内压升高,上矢状窦及血肿对侧脑表面静脉、动脉血流将显着下降一定时间,在血肿形成后的90min时静脉、动脉可代偿恢复,而上矢状窦则无法恢复;对于大鼠,血肿量在0.4m L以下时,血流下降的程度与血肿量的多少并无关系。结论急性硬膜下血肿一方面会造成高颅压,还会造成大脑血液循环障碍,这可能是造成继发性损害的因素。因此,在临床中治疗急性硬膜下血肿时,在术前就应通过影像学等手段关注患者的脑循环情况,以避免术后可能出现的脑循环缺血、脑梗死等并发症。第三部分:大鼠急性脑膨出时脑表面血流的改变及机制目的探讨术中急性脑膨出大鼠的脑表面血流改变的机制及其影响,对脑外伤术中脑膨出的治疗策略提供新的思路。方法选取成年雄性SD大鼠18只,随机分为三组。三组大鼠制作急性硬膜下血肿模型后,在冠状缝后2mm,矢状缝左侧4mm处钻一个2mm的骨孔,将一枚可注水球囊置入硬膜外腔。之后在血肿注入侧半球开一骨窗,骨窗大小10mm×5mm,将颅骨去除,缓慢逐步切开硬脑膜并行血肿清除术。sham组在血肿清除后不做操作;0.05m L组在血肿清除后,将球囊缓慢充水0.05m L,诱导脑组织膨出10分钟后撤去球囊;0.1m L组在血肿清除后,将球囊缓慢充水0.1m L,诱导脑组织膨出,10分钟后撤去球囊。使用激光散斑成像系统透过骨窗观测血肿清除侧半球脑表面静脉、动脉的血流变化,分别于血肿清除后、球囊充水后、球囊充水后10min、球囊撤去后、球囊撤去后10min分别计算血流灌注率。对比脑膨出前后、去除脑膨出因素前后和不同膨出程度下的脑表面血流变化情况。结果两个实验组大鼠在球囊充水后及球囊充水后10min时,静脉、动脉血流显着下降。球囊撤去后及球囊撤去后10min,静脉、动脉的血流与术前相比显着下降,而相比于球囊充水后及球囊充水后10min,静脉、动脉显着上升。球囊充水后颅内压显着升高,高于正常颅内压;球囊撤去后颅内压显着降低,且低于正常颅内压。两实验组相比,血肿清除后静脉、动脉的血流差异无统计学意义。球囊充水后及球囊撤去后各时间点,静脉血流有显着差异,动脉血流差异无统计学意义。清除血肿后,两实验组大鼠颅内压差异均无统计学意义;球囊充水后各时间点,颅内压有显着差异,球囊撤去后各时间点,颅内压无显着差异。综上,当脑组织膨出时,静脉及动脉血流都会显着下降;若脑组织持续膨出,这种循环障碍会持续存在;当及时的清除脑膨出诱因,降低颅内压,这种循环障碍可得到缓解,但短时间内无法恢复到没有膨出的状态。不同程度的脑膨出对于动脉血流的下降并没有太大的差异,但是对于静脉的血流下降有明显的不同。结论脑膨出越严重就会伴随越严重的脑血液循环障碍,且静脉的循环障碍相比于动脉更显着。因此,研究者们需要关注脑血液循环与术中急性脑膨出之间的关系,尤其是静脉循环。脑循环障碍可能与术中急性脑膨出互为因果,这也提示了临床医生,对颅脑损伤的患者在术前就要关注患者的脑循环问题,在术中及后续治疗过程中,更要时刻预防或及时处理脑循环障碍。若术中急性脑膨出仍然发生,应尽快明确原因,去除诱因可尽量地缓解循环障碍,可避免产生更严重的恶性循环。
张婷婷[3]（2021）在《电针“水沟”对局灶性脑缺血大鼠CGRP、AVP、Ang-Ⅱ影响的实验研究》文中研究表明目的:观察电针“水沟”穴对局灶性脑缺血大鼠脑血管组织降钙素基因相关肽（CGRP）、精氨酸加压素（AVP）、血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）的影响,探讨电针“水沟”穴治疗缺血性脑血管疾病的作用机制。方法:按照随机数字表法将符合纳入标准的30只健康、雄性Wistar大鼠,随机分为电针组、模型组、假手术组每组各10只,同时电针组、模型组与假手术组根据治疗时长分为3d、7d共2个时相,每组每个时相各5只大鼠。采用线栓法为电针组和模型组制备大脑中动脉闭塞脑缺血模型（MCAO）大鼠。假手术组及模型组大鼠不做其他干预处理仅束缚时间与电针组保持一致。电针3d组针刺大鼠唇裂正中、鼻尖下1 mm位置的“水沟”穴。选用0.35 mm×13 mm毫针自水沟穴向鼻中隔方向向上斜刺0.2～0.3 cm,接电针治疗仪,负极连接“水沟”穴,正极连接“水沟”穴下2 mm处。选用连续波,频率15 Hz,强度1 m A,电针治疗20 min,每天1次,连续治疗3d。电针7d组:操作同电针3d组,连续治疗7d。纳入及排除标准参照Zea Longa法,分别在术后即刻、3d及7d这三个时间段对各组大鼠神经功能症状进行评分,参照（modified Neurological Severity Score,NSS）,来评测大鼠神经功能缺损情况。各组大鼠在术后第3d及第7d分离取出大鼠梗塞半球侧与非梗塞半球侧大脑前动脉、大脑中动脉及大脑后动脉脑血管组织,运用Elisa法检测各组MCAO大鼠梗塞与非梗塞半球两侧脑血管组织内降钙素基因相关肽（CGRP）、精氨酸加压素（AVP）、血管紧张素Ⅱ（Ang-Ⅱ）的含量。所有实验数据用SPSS21.0软件创建数据库,并进行统计学分析。结果:1.各组大鼠NSS评分结果显示:术后即刻:电针组大鼠的神经功能缺损与模型组相比差异无统计学差异,表明电针干预开始前,电针组和模型组大鼠的神经功能缺损状况相比无明显差异;造模后与假手术组比较,模型组大鼠NSS评分明显升高（P<0.01）,差异具有统计学意义;与模型组比较,电针组NSS评分明显降低（P<0.01）,差异具有统计学意义;电针组之间比较,电针3d后,MCAO大鼠NSS评分明显降低,电针7d组NSS评分显着降低（P<0.01）,差异具有统计学意义。2.各组大鼠梗塞半球侧与非梗塞半球两侧脑血管组织CGRP、AVP、Ang-Ⅱ含量结果显示:与假手术组相比,模型组大鼠梗塞半球侧脑血管组织AVP、Ang-Ⅱ含量均显着增加,CGRP含量增加（P<0.05）,差异具有统计学意义;与模型组相比,电针7d组梗塞半球侧脑血管组织内CGRP含量明显增加（P<0.01）,差异具有统计学意义;电针7d组梗塞半球侧与非梗塞半球侧脑血管组织内CGRP含量均有增加,梗塞半球侧增加尤为明显（P<0.05）;与模型组相比,电针7d组梗塞半球侧脑血管组织内AVP、Ang-Ⅱ含量明显降低（P<0.05）,差异具有统计学意义;梗塞半球脑血管组织内AVP和Ang-Ⅱ含量在电针干预3d、7d时均有降低,电针7d时AVP和Ang-Ⅱ含量降低明显（P<0.05）,差异具有统计学意义。结论:1.脑缺血发生后,大鼠运动功能明显受损,NSS评分明显升高,电针后能使NSS分值明显降低,大鼠运动功能明显改善;2.梗塞半球脑血管组织AVP、Ang-Ⅱ含量显着升高,CGRP含量明显降低,表明CGRP、AVP、Ang-Ⅱ可能参与了缺血性脑损伤的病理过程。3.电针组大鼠梗塞半球脑血管组织CGRP含量较模型组显着升高,AVP、Ang-Ⅱ含量较模型组显着下降,且随着干预时间延长,AVP、Ang-Ⅱ含量呈现逐渐下降的趋势。提示电针对缺血性脑血管组织内CGRP、AVP、Ang-Ⅱ的良性调节作用可能是电针治疗脑梗死的机制之一。
吴展兴[4]（2020）在《总胆固醇对急性缺血性脑卒中溶栓后出血转化的预测价值》文中研究表明目的:1.探索急性缺血性脑卒中（Acute Ischemic Stroke,AIS）患者阿替普酶（rt-PA）静脉溶栓后发生出血转化的独立危险因素;2.探讨总胆固醇对AIS静脉溶栓后发生出血转化的预测价值。方法:采用回顾性队列研究方法,连续收集2015年9月1日—2020年8月31日期间因急性缺血脑卒中在深圳市第二人民医院进行静脉溶栓患者553例,根据复查影像结果（头颅CT或MRI）将患者分为出血转化（Hemorrhagic Transformation,HT）组（81例）和非出血转化（Non Hemorrhagic Transformation,NHT）组（472例）。采用卡方检验或t检验/Mann-Whitney U检验比较两组基线临床及实验室相关数据,单因素分析筛选出可能与HT有关的影响因素,并进一步通过Logistic回归来分析影响HT的独立危险因素。使用受试者工作特征（ROC）曲线计算出最佳截断值,评估总胆固醇及其他指标的预测性能。结果:1.单因素分析结果显示,年龄、入院m RS评分=5分、入院NIHSS评分、WBC计数、中性粒/淋巴细胞比、总胆固醇水平、低密度脂蛋白胆固醇水平在两组有显着统计学差异（P<0.05）;2.logistics回归分析显示,年龄、入院NIHSS评分、入院m RS评分=5分、中性粒/淋巴细胞比、白细胞水平、血糖水平、低水平总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇是急性缺血性脑卒中静脉溶栓患者发生出血转化的独立危险因素（P<0.05）;3.ROC曲线分析显示,总胆固醇、中性粒/淋巴细胞比、年龄对急性缺血性脑卒中静脉溶栓患者发生出血转化的预测都有统计学意义（P<0.05）;4.总胆固醇水平对急性缺血性脑卒中静脉溶栓患者发生出血转化的预测性能最好,曲线下面积（AUC）为0.785,95%置信区间（CI）0.733-0.837,预测的最佳截断值为3.615mmol/L,敏感性为76.47%,特异性为81.05%;5.描述性统计学研究方法显示,出血转化率、高血压史、血糖计数、糖化血红蛋白计数在低水平总胆固醇组和高水平总胆固醇组两组之间的差异具有统计学意义（P<0.05）。结论:1.年龄、入院NIHSS评分、入院m RS评分=5分、中性粒/淋巴细胞比、白细胞、血糖、低水平总胆固醇和低密度脂蛋白胆固醇是急性缺血性脑卒中静脉溶栓患者发生出血转化的独立危险因素;2.总胆固醇是AIS静脉溶栓患者发生HT的保护因素,其对AIS静脉溶栓患者发生HT具有一定预测价值（TC≤3.615mmol/L）。
魏鑫甜[5]（2020）在《电项针对脑干缺血大鼠模型脑干听觉诱发电位的影响》文中进行了进一步梳理目的:探讨电项针对脑干缺血模型大鼠平衡能力及BAEP的影响,为临床应用电项针治疗脑干缺血提供实验依据。方法:选取清洁级SD雄性大鼠,经常规适应性喂养7天及转棒实验适应性训练2天后开始正式实验。将成年大鼠随机分为四组,分别为针刺组、电项针组、假手术组、模型组各20只。除假手术组外其余三组均采用电凝椎动脉血流的方法制备大鼠脑干缺血模型,假手术组仅解剖至双侧翼小孔,不进行相关椎动脉处理。造模成功24小时后开始治疗,针刺组取大鼠双侧的风池穴、供血穴,共针刺治疗7日;电项针组同针刺组进针后,连接电针仪亦治疗7日;模型组和假手术组仅抓捕、捆绑,不给予治疗。以上四组大鼠在治疗前、即刻治疗后及治疗7日后三个时间点按组别进行转棒实验及Bederson评分,检测大鼠的行为学变化,而后进行B AEP的波幅、波峰潜伏期的检测。结果:1.Bederson 评分造模后3小时,与假手术组比较,模型组、针刺组、电项针组大鼠评分明显增加（P<0.01）;即刻治疗后,与模型组比较,针刺组评分降低不明显（P>0.05）,电项针组评分明显降低（P<0.01）;7 日治疗后,与模型组比较,针刺组和电项针组评分均显着降低（P<0.05）;电项针组中,与即刻治疗比较,7日治疗后评分明显降低（P<0.01）。2.转棒实验造模后3小时,与假手术组比较,模型组、针刺组、电项针组停留时间明显缩短（P<0.01）;即刻治疗后,与模型组比较,针刺组及电项针组大鼠停留时间明显增加（P<0.05）;电项针组较针刺组停留时间显着增加（P<0.05）;7日治疗后,与模型组比较,针刺组及电项针组停留时间持续增加（P<0.01）,且电项针组较针刺组增加显着（P<0.01）。3.脑干听觉诱发电位波峰潜伏期（PL）Ⅰ波:与假手术组比较,造模后大鼠的Ⅰ波的PL无明显的差异（P>0.05）。Ⅲ波:与假手术组比较,模型组PL明显延长（P<0.01）;即刻治疗后,与模型组比较,针刺组PL缩短不明显（P>0.05）,电项针组PL明显缩短（P<0.01）;治疗7日后,与模型组比较,针刺组与电项针组PL持续缩短（P<0.01）,且电项针组较针刺组缩短显着（P<0.05）。V波:与假手术组比较,其余三组的PL明显延长（P<0.01）;即刻治疗后,与模型组比较,针刺组与电项针组PL明显缩短（P<0.01）;治疗7日后,与模型组比较,针刺组与电项针组的PL明显缩短（P<0.01）,且电项针组较针刺组缩短显着（P<0.05）。4.脑干听觉诱发电位波幅（AMP）的影响Ⅰ波:与假手术组相比,造模后大鼠的Ⅰ波AMP无明显的差异（P>0.05）。Ⅲ、Ⅴ波:与假手术组相比,其余三组AMP明显减低（P<0.01）;即刻治疗后,与模型组比较,针刺组与电项针组的AMP明显升高（P<0.01）;治疗7日后,与模型组比较,针刺组与电项针组的AMP明显升高（P<0.01）,且电项针组较针刺组升高显着（P<0.05）。结论:1.电项针和传统针刺均可改善脑干缺血模型大鼠的BAEP检测指标,对脑干缺血大鼠的神经功能恢复有积极意义,且电项针效果优于传统针刺。2.电项针即刻治疗和7 日治疗均可减轻脑干缺血大鼠的神经功能缺损及运动功能障碍,且连续治疗7日效果优于即刻治疗。
王宇[6]（2020）在《基于“络脑调神”探讨眼针治疗急性脑梗死的临床观察及作用机制》文中提出论文一基于“络脑调神”探讨眼针治疗ACI的临床疗效及时效性观察目的:本研究基于眼针“络脑调神”探讨眼针针对中风的理论基础,通过自身前后对照研究进一步明确眼针治疗ACI的即刻效应、持续效应,初步建立眼针时-效关系;通过观察眼针对ACI后患者神经功能、运动功能,日常生活能力等方面的改善与疗效,进一步明确眼针在ACI应用的独立疗效,为临床应用眼针治疗ACI提供循证医学证据。资料与方法:本研究共纳入于2018年9月至2019年12月于北方战区总医院医院神经内科住院的脑梗死急性期患者120例,按照随机数字表法随机分为试验组60例,对照组60例。对照组予常规西医治疗,包括抗血小板聚集、他汀类药物以调脂、营养神经类药物、控制原发病及相关对症治疗等。试验组在对照组的基础上加入眼针治疗。眼针取双侧肝区、肾区、上焦区、下焦区,每日1次,每周5天休息2天。总疗程均2周。试验组患者在治疗第1天、治疗第7天、治疗第14天采用MMT评定法观察即刻针刺效应及针刺持续作用,并对影响即刻效应的相关因素进行分析;采用FMA量表、NHISS量表、MBI量表及HAMD量表对试验组及对照组患者治疗前后肢体运动、神经功能情况、日常生活能力及神志情绪情况进行评定。结果:1经眼针治疗后,ACI患者即刻上肢近端、上肢远端、下肢近端、下肢远端肌力均照治疗前有明显提高（P<0.01）;经眼针治疗后,ACI患者即刻近端肌力与即刻远端肌力相比具有显效性差异（P<0.01）。2.不同病位对眼针的即刻效应影响具有统计学差异（P<0.05）,其中病位在基底节的有效率为76%,病位在脑干的有效率为55%,病位在脑皮质及多发性梗死的有效率为100%;不同病程对眼针的即刻效应影响具有统计学差异（P<0.05）,其中早期接受眼针治疗（1d≤病程<3d）有效率为82%,中期接受治疗（3d≤病程<5d）有效率为83%,晚期接受治疗（5d≤病程≤7d）有效率为33%;病情轻重程度对对眼针的即刻效应影响不具备统计学差异（P>0.05）3.上肢近端、上肢远端、下肢近端及下肢远端在眼针治疗前、即刻、针刺后30min、针刺后1h、针刺后2h及针刺后4h肌力不同时间点比较存在具有统计学差异（P<0.05）。4.ACI患者第7天的治疗前、即刻、针刺后30min、针刺后1h、针刺后2h及针刺后4h肌力与第1天的治疗前、即刻、针刺后30min、针刺后1h、针刺后2h及针刺后4h肌力的比较存在具有统计学差异（P<0.05）。ACI患者第14天的治疗前、即刻、针刺后30min、针刺后1h、针刺后2h及针刺后4h肌力与第7天的治疗前、即刻、针刺后30min、针刺后1h、针刺后2h及针刺后4h肌力的比较存在具有统计学差异（P<0.05）。5.两组患者治疗后NIHSS评分均比治疗前有显着性提高（P<0.01）;治疗后两组NIHSS评分具有统计学差异（P<0.05）。6.两组患者治疗后FMA评分均比治疗前有显着性提高（P<0.01）;治疗后两组FMA评分具有显着统计学差异（P<0.01）。7.两组患者治疗后MBI评分均比治疗前有显着性提高（P<0.01）;治疗后两组MBI评分具有统计学差异（P<0.05）8.两组患者治疗后HAMD评分均比治疗前有显着性提高（P<0.01）;治疗后两组HAMD评分具有显着统计学差异（P<0.01）结论:1基于眼针“络脑通脏腑”这一理论基础,进一步对古代文献加以整理,通过探讨“眼-脑”、“脑-神”的关系及“眼-脑-神”整体与中风病因病机之间的联系,证实了眼与脑之间的通过“目系”以传递气血精气,形成相互滋养,协同一体的网络结构,明确了眼针“络脑调神”理论治疗中风病中的理论基础。2眼针对上肢近端、上肢远端、下肢近端、下肢远端即刻肌力均有显着疗效,且肢体近端肌力提高程度优于远端肌力提高程度。3患者梗死部位及针刺介入时机影响眼针的即刻效应,其中病灶位于基底节及脑干的即刻效应反应不佳,眼针介入ACI越早即刻效应越好。4眼针持续效应存在起效、发展、达峰、衰退的时效性规律,并随着针刺次数的累积,眼针进入衰退期的时间逐渐延后。5眼针疗法和西医基础治疗均可改善ACI患者的神经功能,运动功能,提高患者日常生活能力,调节患者的神志情绪,从而改善ACI患者整体预后。并在提高患者运动功能,调节患者神志情绪方面眼针疗效尤为突出。论文二基于内质网应激探讨眼针干预CIRI大鼠的作用机制目的:基于内质网应激探讨眼针调控脑缺血再灌注损伤的机制,进一步深入研究眼针对CIRI后神经功能保护的作用与机制,为临床上应用眼针治ACI提供实验理论依据。材料与方法:本研究取体重220 g左右雄性SPF级SD大鼠30只,将大鼠按照随机数字表法随机均分为:正常组、假手术组、模型组、眼针组及穴区外组。模型组、眼针组及穴区外组均采用改良的线栓法进行MCAO大鼠模型复制,假手术组大鼠采用相同术式,但不插入线栓。术后应用Longa评分和TTC染色对CIRI大鼠进行模型成功评价,并对眼针组大鼠进行眼针干预,眼针取双侧肝区、肾区、上焦区及下焦区,干预时机从再灌注即刻开始,每8小时1次,共计4次。穴区外组大鼠针刺部位为眼针同区外3 mm处,余操作与眼针组一致。再灌注24h后处死大鼠,应用Longa评分评价大鼠神经功能,采用HE染色观察大鼠脑组织病理学改变,TTC染色观察脑梗死体积,采用免疫荧光法检测脑皮质中GRP78、CHOP的平均荧光强度,Western blot法检测脑组织中GRP78、CHOP、Caspase-12、Caspase-3的表达水平。结果:1.正常组和假手术组均无神经功能缺损表现。同正常组及假手术组相比,模型组和眼针组大鼠均出现明显的神经功能缺损。与模型组相比,眼针组神经功能缺损表现有统计学差异（P<0.05）,与模型组相比,穴区外组神经功能缺损表现无统计学差异（P>0.05）。2.各组大鼠脑组织病理学:通过HE染色可见,正常组及假手术组大鼠脑组织灰质、皮质界限清晰,神经细胞结构完整,排列整齐,无水肿坏死,神经细胞层次清晰,分布均匀,神经元胞质丰富,细胞核及胞膜清楚完整。模型组及穴区外组大鼠脑组织出现典型脑梗死筛网状坏死灶改变,坏死灶边缘不清,梗死核心区残存神经元层次紊乱,出现核固缩、核碎裂、胞浆浓染萎缩,胞质疏松、水肿、染色变浅,间质水肿,可以见到扩张的毛细血管炎及性细胞浸润。眼针组脑组织筛网状坏死灶较少,坏死组织边缘较清楚,胶质细胞大量增生,仍可见毛细血管扩张及炎性细胞浸润。3.各组大鼠脑组织梗死灶比较:大鼠经TTC染色后,正常组、假手术组脑组织均呈红色,模型组与眼针组大鼠非梗死灶区脑组织均呈红色,模型组与眼针组大鼠梗死灶区脑组织呈苍白色。与假手术组及正常组相比,模型组脑梗死体积增加具有统计学差异（P<0.05）。与模型组比较,眼针组大鼠脑梗死灶体积均明显减小,具有统计学差异（P<0.05）。与模型组比较,穴区外组大鼠脑梗死体积无统计学差异（P>0.05）4免疫荧光结果显示,与正常组（579.80±120.73）及假手术组（621.85±111.21）相比,模型组皮层CHOP的平均荧光强度明显升高（9133.71±849.25）,具有统计学差异（P<0.01）;与模型组组比较,眼针组荧光强度差异强度降低（2080.29±125.99）,具有统计学差异（P<0.01）。与模型组比较,穴区外组荧光强度差异强度为（9441.74±1590.11）,不具备统计学差异（P>0.05）。5免疫荧光结果显示,与正常组（762.22±129.06）及假手术组（726.76±117.45）相比,模型组皮层GRP78的平均荧光强度明显升高（5470.48±479.12）,具有统计学差异（P<0.01）;与模型组组比较,眼针组荧光强度差异强度显着降低（1181.72±219.60）,具有显着统计学差异（P<0.01）。与模型组比较,穴区外组荧光强度差异强度为（5154.48±328.89）,不具备统计学差异（P>0.05）。6与正常组及假手术组相比,模型组脑组织GRP78、CHOP、Caspase-12、Caspase-3均显着上调,具有统计学差异（P<0.05）。与模型组相比,眼针组大鼠脑组织GRP78、CHOP、Caspase-12、Caspase-3显着下调,均有显着统计学差异（P<0.05）。与模型组比较,穴区外组大鼠脑组织GRP78、CHOP、Caspase-12、Caspase-3表达无统计学差异（P>0.05）。结论:1.眼针可以改善MCAO模型大鼠神经功能缺损症状,减小大鼠脑梗死灶体积,减轻CIRI,起到神经保护的作用。2.CIRI发生后可诱导内质网应激上调GRP78、CHOP、Caspase-12、Caspase-3蛋白水平,眼针作用于CIRI的机制可能是通过下调GRP78,抑制CHOP及CHOP蛋白下游相关因子如:Caspase-12、Caspase-3表达水平来干预内质网应激从而改善CIRI的。
高凯[7]（2020）在《食蟹猴大脑中动脉M1段选择性夹闭脑缺血模型的制作与评价》文中研究说明背景:在世界范围内中老年人群中,缺血性脑卒中以其高发病率、高致残率以及高死亡率成为目前威胁人类生命健康的头号病因,因此,缺血性脑卒中的动物模型的制作技术在未来的脑血管疾病基础研究中的地位不言而喻。通过建立各类模型来模拟人缺血性脑卒中的病理生理机制以及探究潜在的治疗手段,已经成为了神经医学领域脑卒中研究的实验常规流程。虽然很多研究已经通过各种方法建立了相应的疾病动物模型来测试潜在的治疗方法,并且其中有部分治疗方法显示在啮齿类动物模型测试当中有较好的效果,但是,这些治疗方法绝大多数都在人类的临床实验中最终以失败告终。从这些临床转化失败的教训中,我们可以得出,目前的研究对具备与人类更为匹配的临床相关性的动物模型有迫切的需要。各类大型人类疾病动物模型,如非人灵长类动物、猪、羊、狗等,它们大脑结构与机体生理病理基础都与人类更为接近,这其中,尤以非人灵长类动物模型与临床的联系最为紧密,这使得对其进行脑缺血模型制备以及相关病理生理机制的研究成为了缺血性脑卒中干预措施临床转化步骤中的关键一步。目的:本研究通过一系列实验流程优化以及外科手术干预措施来制备一种缺血区在大脑皮质部位集中、实验可复制程度高的非人灵长类动物缺血性脑卒中模型,并且可以通过对其进行行为学测试及影像学表现评价来量化模型的实际达标程度,从而为后续的各类神经保护干预治疗研究提供一种可靠的动物检测模型。方法:本研究选用了生长发育状态良好的实验动物食蟹猴（猕猴属）6只,由广州生物资源应用研究所灵长类动物研究中心提供,体重在5～7公斤,雄性,并随机分为A、B两组,每组3只,分别为编号#1～6,两组动物分别进行经翼点入路开颅临时大脑中动脉M1段选择性夹闭术,手术在插管全麻下进行,其中A组动物行45分钟大脑中动脉临时阻断,B组动物行90分钟大脑中动脉临时阻断。术后24h内给予止痛药物并采取各项常规护理,确保动物生命体征平稳。在术后的第1、2、4、7天应用非人灵长类动物脑卒中模型评分量表（non-human primate stroke,NHPSS）来跟踪记录实验动物神经行为学表现,并在术后第6小时、48小时、7天、20天对实验动物行核磁共振扫描检查,记录扫描结果;使用统计软件SPSS对数据进行分析处理。结果:A组（45tMACO）:编号为#1、#2、#3的食蟹猴进行45分钟大脑中动脉M1段选择性夹闭手术;B组（45tMACO）:编号为#4、#5、#6的食蟹猴进行90分钟大脑中动脉M1段选择性夹闭手术;6只实验动物术前均行磁共振扫描,MRA提示无明显血管相关病变;术后在第6h、48h、7d、20d的时间节点,对6只实验动物进行的MR扫描,DWI序列显示在缺血超急性期（6h、48h）,梗死灶的分布随时间延长逐渐扩大。A组实验动物梗死灶体积平均值分别为2.18ml、9.75ml、9.31ml、1.93ml;B组实验动物梗死灶体积平均值分别为8.40ml、18.21ml、14.75ml、7.11ml。A组在单侧大脑中动脉血管闭塞45分钟后6h内,大脑梗死灶包围了额叶、顶叶和岛叶运动皮质的一部分,而B组在缺血90分钟后6h梗塞灶的范围会扩大到包括中线结构,如扣带回皮质;在第48h,实验动物大脑梗死体积在A、B两组的DWI像中都达到了最大;两组的第7天扫描图中梗死灶较早期开始减小,直至第20天达到最小体积。A组和B组所有的食蟹猴进行DWI像检测发现其同向的整个大脑半球都有较为明显的皮质损害。同时进行的非人灵长类动物神经行为学评分表平均得分在四天的采样统计结果分别为 A 组:17.3、15.6、14.7、12.3;B 组:22.3、25.7、20.0、18.7;实验结束后动物均长期生存。这项结果表明了实验动物的大脑半球皮质梗死灶具有局限性,变异度小,且大脑梗死灶体积与其神经行为学预后产生了良好的相关性。结论:本研究通过显微外科开颅手术技术,利用动脉瘤夹来临时阻断食蟹猴大脑中动脉M1段,制作了可复制的、临床相关性高的食蟹猴皮质梗死模型,通过MRI扫描,证实了这种模型的变异性较小,且动物均获得了良好的存活率。此外,实验动物的神经行为学评分结果表明,实验动物脑组织损伤程度与其预后程度有较好的相关性,且皮质下（基底节）的非预期损伤被降至最低,尽可能的减少了变异。MR图像表明,本研究的实验动物大脑深部脑白质在很大程度上是完好的,利用神经保护剂对缺血半暗带及皮层区域进行保护在未来的临床研究中有较好的预期,并且由于模型的皮质梗死体积大小适中,两组动物在48h的DWI图像所计算的体积分别约为25%和33%,所以该模型在调节梗死灶大小以及后续的检验候选神经保护药物负面或正面效应提供了较为充足的调整空间。这种非人灵长类动物缺血性卒中模型在评估假定的治疗方法时相较啮齿类动物模型,具有更加精准、与人类有更高相似性的优点,从而会减少人类临床试验失败的概率,并为临床前筛选旨在减少人类大血管卒中皮质梗死的神经保护剂提供了更多的可能性。
刘勇,魏鑫甜[8]（2020）在《通过脑干听觉诱发电位观察电项针治疗脑干缺血大鼠即时效应》文中研究指明目的采用电凝椎动脉的方法建立脑干缺血大鼠模型,通过转棒实验、Bederson评分、脑干听觉诱发电位检测观察电项针对脑干缺血大鼠模型的即时疗效。分析通过针灸及电项针对脑干缺血大鼠进行即刻治疗时脑干听觉诱发电位（BAEP）的变化情况。方法选取清洁级健康雄性SD成年大鼠60只,经常规适应性喂养及转棒实验适应性训练1周后开始正式实验。将大鼠随机分为4组,分别为假手术组、模型组、电项针组、针刺组。记录各组大鼠治疗前后于转棒上停留时间及Bederson评分情况。在造模结束24 h后（治疗前）进行第1次BAEP检测,首次治疗结束后立即进行第2次BAEP检测,比较4组大鼠Ⅰ、Ⅲ、V波振幅及Ⅰ、Ⅲ、Ⅴ波的波峰潜伏期。结果相较于假手术组,模型组、针刺组、电项针组3组大鼠造模24 h后于转棒上停留时间明显减少（P<0.01）,Bederson评分明显增高;即刻治疗后,电项针组相较模型组及针刺组于转棒上停留时间明显增加（P<0.05）,Bederson评分明显增高;模型组、针刺组、电项针组大鼠造模24 h后进行BAEP检测,Ⅲ、Ⅴ波振幅明显压低,Ⅲ、Ⅴ波峰潜伏期波峰明显延长（P<0.01）,假手术组不出现变化,Ⅰ波无明显变化（P>0.05）,即刻治疗后电项针组较针刺组及模型组大鼠Ⅲ、Ⅴ波振幅抬高（P<0.05）,Ⅲ、Ⅴ波峰潜伏期缩短（P<0.05）,Ⅰ波无明显变化（P>0.05）。结论电项针即刻治疗可明显改善脑干大鼠的脑干血液循环,其效果优于即刻针刺治疗。
王珀[9]（2019）在《PI3K抑制剂ZSTK474对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究》文中进行了进一步梳理背景:炎症、免疫反应在脑缺血/再灌注损伤过程中发挥着重要作用,调节脑缺血/再灌注损伤后的炎症、免疫反应,可改善缺血后一系列反应,从而起到脑保护作用。其中,小胶质细胞/巨噬细胞作为神经系统的固有免疫细胞,是最具有调控潜力的靶点。在受损的中枢神经系统（CNS）,如脑缺血/再灌注损伤状态下,小胶质细胞/巨噬细胞可以可逆地改变他们的表型向“有害的”或“有益的”状态转变,从而调控炎症反应,发挥脑保护作用。ZSTK474是I类PI3K抑制剂,是正进行I期临床试验的抗肿瘤药物,且无明显毒副作用。目前已证实,该药物在胶原性关节炎和多发性硬化动物模型中发挥抗炎和免疫调节的作用。我们假设ZSTK474可以通调控制炎症、免疫反应,改善脑缺血/再灌注损伤的预后。方法:实验中所用动物为6-8周C57/BL6雄性小鼠,我们将小鼠随机分为三组:假手术组、对照组以及ZSTK474治疗组。本实验中采取Longa改良线栓法诱导小鼠大脑中动脉缺血/再灌注模型,缺血时间为60分钟,后轻轻将线栓拔出5mm以实现大脑中动脉再灌注。ZSTK474治疗组于造模后6小时开始灌胃给药,给药剂量为200mg/kg,1天1次,连续给药3天后观察脑损伤程度;假手术组及对照组给予等剂量PBS缓冲液灌胃。在造模后24小时,48小时和72小时对各组进行行为学功能评分;缺血/再灌注后72小时评价各组脑梗死体积以及进行组织病理染色观察炎性细胞浸润,并采用免疫荧光法观察小胶质细胞/巨噬细胞标记物Iba1、星形胶质细胞标记物GFAP、“有益的”小胶质细胞/巨噬细胞标记物CD16/32、“有害的”小胶质细胞/巨噬细胞标记物CD206的表达情况;RT-PCR检测“有害的”表型标记物CD32、CD16、CD86 mRNA表达;“有益的”表型标记物CD206、Arg1、YM-1 mRNA表达;RT-PCR检测造模后24小时,48小时和72小时的炎性细胞因子白介素1β,白介素6,肿瘤坏死因子α,白介素10和转化生长因子β的基因的表达水平;用酶联免疫吸附试验验证造模后48小时的这些炎性细胞因子的蛋白表达水平。通过蛋白质免疫印迹法检测AKT、p-AKT、p70S6K和p-p70S6k的表达。最终运用Tukey检验和Mann–Whitney U检验对各组数据进行统计学分析,比较各组差异。结果:与对照组比较,ZSTK474治疗组明显改善了缺血/再灌注损伤小鼠的神经功能评分,减少了脑梗死面积,减轻了缺血灶炎性细胞的浸润;ZSTK474治疗组与对照组比较,抑制缺血半暗带小胶质细胞、星形胶质细胞的增殖,同时调控小胶质/巨噬细胞的分化使其保持在“有益的”表型,改变了脑内的炎症微环境,抑制炎性细胞因子的分泌,促进抗炎性细胞因子的产生,减轻中枢神经系统损伤。我们研究发现ZSTK474治疗组p-AKT及其下游产物p-p70S6K的表达较对照组减低。结论:脑缺血/再灌注损伤小鼠模型中,ZSTK474可以抑制小胶质细胞/巨噬细胞的增殖,调控小胶质/巨噬细胞的分化,进而抑制促炎细胞因子分泌、促进抗炎细胞因子产生,通过调节脑缺血/再灌注损伤诱发的炎症、免疫反应,发挥脑保护作用。这种脑保护作用,可能与ZSTK474调控PI3K/AKT/mTORC1信号转导通路相关。ZSTK474在MCAO小鼠脑缺血/再灌注损伤模型中发挥脑保护作用,具有治疗缺血性卒中的潜力,为治疗缺血性卒中提供了新的治疗策略。
邬迎喜[10]（2018）在《GPR30下调参与缺血性脑卒中后雌激素神经保护作用减弱的作用及机制研究》文中研究指明雌激素和其膜受体GPR30（G蛋白偶联受体）已被证明在脑缺血性中风和脑退行性疾病中发挥了重要的神经保护作用。然而长期剥夺雌激素后,雌激素神经保护作用减弱的机制目前仍不明确。其可能的机制包括:海马区雌激素α受体的表达下降导致雌激素敏感性的下降,神经元的主要能量来源由葡萄糖转变为酮体导致神经元的ATP下降,以及胆碱乙酰转氨酶的活性下降导致乙酰胆碱的合成减少。本研究主要探讨了在雌激素关键期假设中,GPR30在雌激素神经保护作用减弱中所起的作用及其机制。雌激素关键期假设是指雌激素应该在妇女绝经前或绝经后立即给予治疗,如果在绝经后很长时间后再给予治疗,其神经保护作用会严重的减弱甚至消失。本研究通过构建大鼠卵巢切除模型和四脑血管阻断全脑缺血模型,验证了雌激素或GPR30特异性激动剂G1在短期雌激素剥夺后全脑缺血模型中的神经保护作用,同时也发现了雌激素或G1在长期雌激素剥夺后全脑缺血模型中却未能发挥明显的神经保护作用。本研究首先对比短期和长期雌激素剥夺后海马CA1区GPR30的表达差异,通过在体实验揭示了GPR30下调的可能机制;然后通过在体实验验证对长期雌激素剥夺的大鼠,立即给予雌激素替代治疗10周可以抑制GPR30的下调,并发挥神经保护作用;最后在老年雌性大鼠上也验证了GPR30表达下调的机制。本研究通过对雌激素膜受体GPR30的研究,进一步阐述了在雌激素关键期假设中雌激素神经保护作用减弱的机制,同时也为临床上绝经期妇女脑缺血神经损伤的预防和治疗提供了新的治疗靶点和干预策略。本研究具体分为3部分:第一部分:雌二醇和G1激动剂对短期和长期雌激素剥夺大鼠的神经保护作用研究目的:成功构建雌性SD大鼠卵巢切除模型和四脑血管阻断全脑全血模型,观察E2和G1在短期和长期雌激素剥夺大鼠上是否具有同样的神经保护作用。实验方法:（1）将成年雌性SD大鼠随机分为四组:假手术组1、卵巢切除1周组、假手术组2、卵巢切除10周组。对假手术组只进行手术分离不切除卵巢组织,对卵巢切除组行双侧卵巢切除术,假手术组1和卵巢切除1周组于1周后尾尖采血测定雌二醇浓度,假手术组2和卵巢切除10周组于10周后尾尖采血测定雌二醇浓度。（2）将成年雌性SD大鼠随机分为三组:假手术组、全脑缺血10分钟组和全脑缺血20分钟组。对假手术组只进行手术分离不阻断四血管,对缺血组行双侧椎动脉电凝剪断及24小时后双侧颈总动脉阻断10分钟和20分钟,分别观察3组大鼠海马区神经元损伤情况。（3）对短期雌激素剥夺大鼠（双侧卵巢切除1周）和长期雌激素剥夺大鼠（双侧卵巢切除10周）分别分为四组:假手术组、安慰剂组、雌二醇组和G1组,行全脑缺血模型后对脑切片行尼氏染色,对比四组间海马区神经元损伤情况。实验结果:（1）通过对比假手术组1和卵巢切除1周组术后第1、3、5、7天血清雌二醇浓度,可以发现卵巢切除1周组与假手术组相比血清雌二醇浓度迅速下降,术后第7天雌二醇浓度低于5 pg/mL。通过对比假手术组2和卵巢切除10周组术后第1、3、5、10周血清雌二醇浓度,可以发现卵巢切除10周组与假手术组相比血清雌二醇浓度迅速下降,术后第10周血清雌二醇浓度低于1 pg/mL。（2）与假手术组相比,全脑缺血10分钟组海马CA1区出现明显的神经元损伤,椎体细胞损伤严重,数量显着减少,神经元核固缩。全脑缺血20分钟组神经元损伤较全脑缺血10分钟组更加严重,大部分细胞正常结构消失,核浆溶解,大部分细胞尼氏小体缺失,仅残存少量形态完整的神经元。（3）E2或G1在短期雌激素剥夺的大鼠发挥了显着的神经保护作用,有效地减少了海马区神经元的损伤,但在长期雌激素剥夺的大鼠中的保护作用并不明显。结论:该部分研究明确了卵巢去势模型可以显着降低血雌二醇水平,同时全脑缺血大鼠模型会导致海马区神经元的明显损伤;进一步发现E2或G1可以有效减少短期雌激素剥夺大鼠海马神经元损伤,发挥了显着的神经保护作用,而对长期雌激素剥夺大鼠的神经保护作用并不明显。第二部分:GPR30在雌激素“关键期”假设中神经保护作用减弱的机制研究研究目的:探讨GPR30在雌性大鼠长期雌激素剥夺后雌激素神经保护减弱的作用,以及GPR30表达下调的机制研究。实验方法:（1）将成年雌性SD大鼠随机分为假手术组、短期雌激素剥夺组和长期雌激素剥夺组。免疫荧光染色检测三组大鼠海马区GPR30的表达情况,Western blot检测三组大鼠海马CA1区GPR30的蛋白表达水平。（2）实时定量PCR（qPCR）检测假手术组、短期雌激素剥夺组和长期雌激素剥夺组大鼠GPR30的mRNA水平,免疫共沉淀检测三组海马CA1区GPR30的泛素化水平。（3）将卵巢切除10周后给予雌二醇或安慰剂替代治疗的大鼠和卵巢切除后立即给予雌二醇或安慰剂替代治疗10周的大鼠分别随机分为3组:空白对照组、安慰剂组和雌二醇组,对其断头取脑分离海马CA1区组织,提取蛋白质和RNA,分别行Western blot和qPCR检测。（4）将卵巢切除10周后给予雌二醇或安慰剂替代治疗的大鼠和卵巢切除后立即给予雌二醇或安慰剂替代治疗10周的大鼠分别随机分为5组:假手术组、安慰剂组、雌二醇组、雌二醇+G15组和G15组,行全脑缺血模型后对脑切片行尼氏染色对比5组间海马CA1区神经元损伤情况。（5）将卵巢切除10周后给予雌二醇或安慰剂替代治疗的大鼠和卵巢切除后立即给予雌二醇或安慰剂替代治疗10周的大鼠分别随机分为3组:假手术组、安慰剂组和雌二醇组,对脑切片行TUNEL染色对比3组间神经元凋亡情况。实验结果:（1）免疫荧光染色显示GPR30在短期雌激素剥夺组海马CA1区表达轻度下降,而在长期雌激素剥夺组海马CA1区表达显着下降;Western blot显示长期雌激素剥夺组海马CA1区GPR30含量与短期雌激素剥夺组海马CA1区相比明显下降。（2）免疫共沉淀显示假手术组、短期雌激素剥夺组和长期雌激素剥夺组GPR30在海马CA1区泛素化程度无显着差别。qPCR显示长期雌激素剥夺组GPR30在海马CA1区mRNA水平较短期雌激素剥夺组显着降低。（3）对雌性大鼠卵巢切除10周后给予雌二醇治疗并不能抑制海马CA1区GPR30的下调,且在全脑缺血模型中不能有效减少海马区神经元的损伤。而对雌性大鼠卵巢切除后,立即给予雌二醇治疗10周可显着抑制海马CA1区GPR30蛋白和mRNA水平的下调,同时在全脑缺血模型中能有效减少海马区神经元的损伤,但给予G15可阻断雌激素的这种神经保护作用。（4）Tunel染色显示卵巢切除后,立即给予雌二醇替代治疗10周的大鼠海马CA1区神经元凋亡数量明显减少,而卵巢切除10周后给予雌二醇替代治疗的大鼠海马CA1区大部分神经元发生明显的凋亡。结论:长期雌激素剥夺大鼠海马CA1区GPR30蛋白表达显着下调,且GPR30蛋白水平的下降主要是由于其mRNA水平下降引起。对雌性大鼠行双侧卵巢切除后,立即给予雌二醇替代治疗10周可抑制大鼠海马CA1区GPR30蛋白和mRNA水平的下调,同时对大鼠行全脑缺血模型后能发挥显着神经保护作用,但这种保护作用可被GPR30特异性拮抗剂G15所阻断。第三部分:GPR30在老年雌性大鼠海马区的表达及E2和G1对老年雌性大鼠是否发挥神经保护作用的机制研究研究目的:明确GPR30在老年雌性大鼠海马CA1区表达是否发生下调及其机制,以及E2和G1对老年雌性大鼠是否发挥了神经保护作用。实验方法:（1）将雌性大鼠分为青年雌性大鼠组（3个月）和老年雌性大鼠组（24个月）,Western blot检测雌二醇的核受体雌激素α、雌激素β和膜受体GPR30在两组大鼠海马CA1区的表达情况。（2）qPCR和免疫共沉淀检测两组大鼠海马CA1区mRNA转录水平和泛素化降解水平。（3）将老年雌性大鼠随机分为四组:假手术组、安慰剂组、雌二醇组和G1组,行全脑缺血模型后对其断头取脑制作海马区切片,行尼氏染色和TUNEL染色对比四组间神经元存活情况。实验结果:（1）Western blot结果显示在老年雌性大鼠组海马CA1区雌激素α、雌激素β和GPR30受体与青年雌性大鼠组相比均发生明显下调。（2）qPCR显示老年雌性大鼠组mRNA转录水平下降到年轻雌性大鼠组的50%,而免疫共沉淀显示两组间的泛素化降解水平无明显差异。（3）对老年雌性大鼠组行全脑缺血模型后尼氏染色和TUNEL染色结果显示雌二醇和G1在老年雌性大鼠海马CA1区均未发挥明显的神经保护作用。结论:进一步证明了GPR30在老年雌性大鼠中表达下降,且GPR30的下降主要是由于mRNA水平的下降引起。给予老年雌性大鼠E2或G1治疗并不能发挥明显的神经保护作用。
二、大鼠非开颅术脑干缺血模型的创建（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、大鼠非开颅术脑干缺血模型的创建（论文提纲范文）
（1）颅内静脉循环障碍加重TBI后脑损伤的实验研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一部分:基于LSCI、MRV观察SD大鼠脑静脉回流及其受阻后皮层血流变化 |
| 前言 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 试剂及仪器设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 LSCI观测正常SD大鼠脑皮层静脉血液循环 |
| 2.2 MRI平扫及MRV重建SD大鼠头部及颈部静脉 |
| 2.3 基于LSCI观察CVO大鼠脑静脉回流 |
| 3 结果 |
| 3.1 LSCI显示正常SD大鼠脑皮层静脉回流 |
| 3.2 MRI血管成像及三维重建大鼠脑静脉窦及颈部静脉 |
| 3.3 CVO干预后大鼠脑皮层静脉血流动态变化 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二部分:ASDH大鼠脑皮层静脉血流变化 |
| 前言 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 试剂及耗材 |
| 1.3 仪器设备 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 改良Miller法制作大鼠ASDH模型及实验分组 |
| 2.2 激光散斑成像系统记录观察窗的皮层血流值 |
| 2.3 MRI平扫及SWI序列扫描 |
| 2.4 心脏灌注及留取脑组织标本 |
| 2.5 HE染色病理观察 |
| 2.6 统计方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 激光散斑衬比成像显示ASDH大鼠脑皮层血流动力学变化 |
| 3.2 MRI 扫描结果 |
| 3.3 HE 染色结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三部分:基于激光散斑观察ASDH大鼠开颅术中脑皮层血流动力学变化 |
| 前言 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 试剂及仪器 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 大鼠术前基础脑皮层血流监测 |
| 2.2 大鼠ASDH模型制作及模拟手术 |
| 2.3 激光散斑监测数据处理 |
| 2.4 统计方法 |
| 3 结果 |
| 3.1 硬膜下血肿清除术中生命体征及颅内压变化情况 |
| 3.2 开颅术中显微镜下观察脑皮层血管 |
| 3.3 基于LSCI观察皮层脑血流速度变化 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第四部分:颅内静脉回流障碍加重颅脑损伤大鼠炎症反应及脑水肿的机制研究 |
| 前言 |
| 1 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 试剂及耗材 |
| 1.3 仪器设备 |
| 1.4 主要试剂的配制 |
| 2 实验方法 |
| 2.1 动物实验模型制作及分组 |
| 2.2 实验标本的获取 |
| 2.3 神经功能学评分 |
| 2.4 脑水含量测定 |
| 2.5 Nissl染色评估神经元损伤情况 |
| 2.6 脑组织Evans blue染色及含量测定 |
| 2.7 透射电子显微镜检测观察内皮细胞间紧密连接蛋白结构变化 |
| 2.8 免疫荧光双标染色分析大鼠皮层中ADAM17、小胶质细胞特异性标志物Iba-1、星形细胞特异性标志物GFAP共定位监测以及p-65、MMP-9在皮层细胞中的表达 |
| 2.9 大鼠脑组织内TNF-α,IL-1β,IL-6,IL-10 以及HMGB1的ELISA检测 |
| 2.10 Western blot检测脑皮层蛋白水平表达 |
| 2.11 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 CVO加重ASDH大鼠神经功能障及脑组织水肿 |
| 3.2 CVO干预后加重血管内皮细胞间紧密连接蛋白的破坏 |
| 3.3 ADAM17在CVO干预后ASDH大鼠损伤脑皮层细胞定位 |
| 3.4 CVO干预后促进ASDH大鼠炎性因子的表达 |
| 3.5 特异性抑制solTNF-α抑制 CVO干预后TNFR/NF-κB通路 |
| 3.6 XPro1595 干预对ASDH+CVO大鼠脑皮层MMP-9 表达的影响 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 全文总结 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 综述 创伤性颅脑损伤术中急性脑膨出的发生机制及处理策略进展 |
| 参考文献 |
| 学术论文发表情况 |
| 致谢 |
（2）大鼠急性硬膜下血肿对脑表面血流影响的激光散斑技术研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分:大鼠急性硬膜下血肿改良模型的构建 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本部分研究不足 |
| 本研究创新点 |
| 第二部分:大鼠急性硬膜下血肿对脑表面血流的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本部分研究不足 |
| 本研究创新点 |
| 第三部分:大鼠急性脑膨出时脑表面血流的改变及机制 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 本部分研究不足 |
| 本研究创新点 |
| 全文结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附录 A 缩略词表 |
| 附录 B 学术成果 |
| 附录 C 综述 脑损伤术中急性脑膨出相关研究进展 |
| 参考文献 |
（3）电针“水沟”对局灶性脑缺血大鼠CGRP、AVP、Ang-Ⅱ影响的实验研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 实验一 电针“水沟”对脑缺血大鼠神经功能缺损的影响 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3.统计学分析 |
| 4.结果 |
| 5.小结 |
| 实验二 电针“水沟”对脑缺血大鼠脑血管组织CGRP、AVP、Ang-Ⅱ影响 |
| 1.实验材料 |
| 2.实验方法 |
| 3.统计学分析 |
| 4.结果 |
| 5.小结 |
| 技术路线图 |
| 讨论 |
| 1.中医学对本病的认识 |
| 2.西医学对本病的认识 |
| 3.穴位选穴依据 |
| 4.电针参数 |
| 5.对动物模型的评价 |
| 6.MCAO大鼠神经行为评价 |
| 7.CGRP、AVP、Ang-Ⅱ与脑缺血 |
| 8.不足与展望 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 综述 针刺治疗缺血性脑卒中机制的研究进展 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（4）总胆固醇对急性缺血性脑卒中溶栓后出血转化的预测价值（论文提纲范文）
| 中英文缩略词对照表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 1.1 研究背景和意义 |
| 1.2 国内外研究现状 |
| 1.3 本研究的目的 |
| 第二章 资料与方法 |
| 2.1 资料 |
| 2.2 研究方法 |
| 2.3 统计学处理 |
| 第三章 结果 |
| 第一部分 HT危险因素 |
| 3.1.1 患者的临床基线资料 |
| 3.1.2 脑 HT 的独立危险因素 |
| 3.1.3 比较各独立危险因素对 AIS 静脉溶栓患者发生 HT 的预测性能 |
| 第二部分 总胆固醇对患者发生HT的预测性能 |
| 3.2.1 总胆固醇与中性粒/淋巴细胞比、年龄线性回归分析 |
| 3.2.2 总胆固醇预测 AIS 患者发生 HT 的最佳截断值 |
| 3.2.3 总胆固醇对出血性梗塞(HI)和实质性血肿(PH)两种类型的预测性能 |
| 3.2.4 高水平总胆固醇和低水平总胆固醇的患者特征对比 |
| 3.2.5 总胆固醇水平预测溶栓至出现HT时长的Kalpan-Meier 生存曲线 |
| 第四章 讨论 |
| 第一部分 |
| 第二部分 |
| 4.2.1 血脂指标 |
| 4.2.2 阿替普酶(rt-PA)相关介绍 |
| 4.2.3 血脂测量 |
| 4.2.4 血脂与 HT 的关系 |
| 第五章 结论 |
| 参考文献 |
| 附录一 综述 急性缺血性脑卒中阿替普酶溶栓后发生出血转化的研究进展 |
| 参考文献 |
| 附录二 攻读硕士学位期间发表的学位论文 |
| 致谢 |
（5）电项针对脑干缺血大鼠模型脑干听觉诱发电位的影响（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 1. 祖国医学对脑干缺血的认识 |
| 1.1 中医病名 |
| 1.2 病因病机 |
| 2. 现代医学对脑干缺血的认识 |
| 2.1 概述 |
| 2.2 发病机制 |
| 2.3 危险因素 |
| 3. 祖国医学对脑干缺血的治疗 |
| 3.1 中药疗法治疗脑干缺血的研究进展 |
| 3.2 灸法治疗脑干缺血的研究进展 |
| 3.3 推拿治疗脑干缺血的研究进展 |
| 3.4 针刺治疗脑干缺血的研究进展 |
| 4. 现代医学对脑干缺血的治疗 |
| 4.1 溶栓治疗 |
| 4.2 抗凝治疗 |
| 4.3 抗血小板治疗 |
| 4.4 血管内治疗 |
| 4.5 手术治疗 |
| 4.6 高压氧治疗 |
| 4.7 其他药物治疗 |
| 5. 脑干听觉诱发电位检测 |
| 实验研究 |
| 1. 实验材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验分组 |
| 1.3 实验器材 |
| 2. 实验方法 |
| 2.1 动物模型制备 |
| 2.2 大鼠模型入组标准 |
| 2.3 治疗方法 |
| 2.4 大鼠一般状态评价 |
| 2.5 评价标准及方法 |
| 2.6 B AEP检测方法 |
| 2.7 统计方法 |
| 实验结果 |
| 1. 对各组大鼠行为学的影响 |
| 1.1 对脑干缺血模型大鼠Bederson评 分的影响 |
| 1.2 对脑干缺血模型大鼠治疗前、后转棒实验的影响 |
| 2. 对各组大鼠BAEP的影响 |
| 2.1 B AEP标准 |
| 2.2 各组大鼠治疗前后对BAEP各波PL的影响 |
| 2.3 各组大鼠治疗前后对BAEP各波AMP的影响 |
| 讨论 |
| 1. 脑干缺血动物模型的建立 |
| 1.1 实验动物的选择 |
| 1.2 造模方法的选择 |
| 2. 对BEDERSON评分的影响 |
| 3. 对转棒实验的影响 |
| 4. 对脑干听觉诱发电位的影响 |
| 5. 电项针治疗脑干缺血的机理探讨 |
| 6. 问题与展望 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 攻读硕士期间发表论文 |
| 个人简历 |
（6）基于“络脑调神”探讨眼针治疗急性脑梗死的临床观察及作用机制（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 英文缩略词表 |
| 前言 |
| 论文一 基于“络脑调神”探讨眼针治疗ACI的临床疗效及时效性研究 |
| 前言 |
| 资料与方法 |
| 试验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 论文二 基于内质网应激探讨眼针干预CIRI大鼠的作用机制 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本研究创新性的自我评价 |
| 参考文献 |
| 附表 |
| 综述 眼针治疗缺血性中风的临床及实验学研究进展 |
| 参考文献 |
| 个人简历 |
| 在学期间科研成绩 |
| 致谢 |
（7）食蟹猴大脑中动脉M1段选择性夹闭脑缺血模型的制作与评价（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 第一章 前言 |
| 第二章 材料与方法 |
| 2.1 实验动物 |
| 2.2 实验设备与条件 |
| 2.3 模型动物饲养与运输 |
| 2.4 模型制备方法 |
| 2.5 模型评价方法 |
| 第三章 结果 |
| 3.1 实验动物围手术期生命体征 |
| 3.2 影像学评价 |
| 3.3 行为学评价 |
| 第四章 讨论 |
| 第五章 小结与展望 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间成果 |
| 致谢 |
（8）通过脑干听觉诱发电位观察电项针治疗脑干缺血大鼠即时效应（论文提纲范文）
| 1 实验材料与方法 |
| 1.1 实验动物及分组 |
| 1.2 转棒实验适应性训练 |
| 1.3 动物模型的建立 |
| 1.4 造模成功的判断 |
| 1.5 各组干预方法 |
| 2 检测指标 |
| 2.1 脑干听觉诱发电位（BAEP）的检测方法 |
| 2.2 BAEP异常判断标准 |
| 2.3 转棒实验 |
| 2.4 Bederson评分 |
| 3 统计学方法 |
| 4 实验结果 |
| 4.1 大鼠存活情况 |
| 4.2 对脑干缺血模型大鼠治疗前、后转棒实验的影响 |
| 4.3 对脑干缺血模型大鼠Bederson评分的影响 |
| 4.4 大鼠治疗后对BAEP各波波峰潜伏期的影响 |
| 4.5 大鼠治疗前后对BAEP各波波幅的影响 |
| 5 讨论 |
（9）PI3K抑制剂ZSTK474对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 1 对象和方法 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.1.1 实验对象 |
| 1.1.2 实验材料 |
| 1.2 实验仪器 |
| 1.3 实验方法 |
| 1.3.1 实验动物分组 |
| 1.3.2 药品的制备 |
| 1.3.3 实验动物给药方法 |
| 1.3.4 MCAO建模 |
| 1.3.5 Zea Longa方法评估MCAO模型 |
| 1.3.6 MCAO模型的排除标准 |
| 1.3.7 神经功能评估 |
| 1.3.8 TTC染色 |
| 1.3.9 组织、形态学 |
| 1.3.10 脑组织免疫荧光染色 |
| 1.3.11 实时定量PCR |
| 1.3.12 酶联免疫吸附试验 |
| 1.3.13 蛋白印记检测 |
| 1.4 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 ZSTK474给药剂量的评估 |
| 2.2 ZSTK474在小鼠脑缺血/再灌注损伤模型中发挥脑保护作用 |
| 2.2.1 ZSTK474改善神经功能评分 |
| 2.2.2 ZSTK474降低缺血/再灌注损伤小鼠的脑梗死面积 |
| 2.2.3 ZSTK474对缺血/再灌注损伤脑组织的病理改变 |
| 2.3 ZSTK474对胶质细胞的影响 |
| 2.3.1 ZSTK474对缺血半暗带小胶质细胞的影响 |
| 2.3.2 ZSTK474对缺血半暗带星形胶质细胞的影响 |
| 2.3.3 ZSTK474降低缺血半暗带Iba-1 阳性细胞的蛋白表达 |
| 2.3.4 ZSTK474对小胶质细胞表型的影响 |
| 2.4 ZSTK474对炎症因子的影响 |
| 2.5 ZSTK474对PI3K/ATK/mTOR通路及下游产物的影响 |
| 3 讨论 |
| 3.1 实验动物及模型的选择 |
| 3.2 实验药物的选择 |
| 3.3 ZSTK474在脑缺血/再灌注损伤小鼠模型中发挥脑保护作用 |
| 3.3.1 ZSTK474改善脑缺血/再灌注损伤小鼠的预后 |
| 3.3.2 ZSTK474抑制小胶质细胞增殖、分化 |
| 3.3.3 ZSTK474介导小胶质细胞极化 |
| 3.3.4 ZSTK474调控炎症因子 |
| 3.4 ZSTK474在缺血/再灌注损伤小鼠模型发挥脑保护作用的机制 |
| 3.5 ZSTK474在缺血/再灌注损伤小鼠模型中发挥脑保护作用的意义 |
| 4 小结 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 脑卒中的免疫机制研究 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（10）GPR30下调参与缺血性脑卒中后雌激素神经保护作用减弱的作用及机制研究（论文提纲范文）
| 缩略语表 |
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 文献回顾 |
| 第一部分 雌激素的神经保护作用及其关键期假说 |
| 1.脑血管疾病的性别差异 |
| 2.雌激素神经保护作用的机制研究 |
| 2.1 动物实验和雌激素神经保护作用 |
| 2.2 雌激素神经保护作用的机制 |
| 3.自然绝经和手术绝经 |
| 3.1 自然绝经 |
| 3.2 手术绝经 |
| 4.雌激素的临床实验 |
| 4.1 雌激素的观察研究和痴呆的预防 |
| 4.2 WHI研究 |
| 5.雌激素替代治疗的关键期证据 |
| 5.1 关键期假说和健康细胞依赖 |
| 5.2 动物实验的支持 |
| 5.3 阐述对WHI批判的临床研究 |
| 第二部分 GPR30的神经保护作用及其在其他系统中的作用 |
| 1.GPR30/GPER1和雌激素 |
| 2.GPR30在脑内的定位 |
| 3.神经信号和GPR30在神经系统的功能 |
| 4.GPR30在动脉粥样硬化和血管重塑中的作用 |
| 5.GPR30在心力衰竭中的作用 |
| 6.GPR30在癌症中的作用 |
| 7.GPR30在新陈代谢中的作用 |
| 第一部分 E2和G1对短期雌激素剥夺和长期雌激素剥夺大鼠神经保护作用的研究 |
| 1 材料和仪器 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验主要试剂及其配置 |
| 1.3 实验主要仪器及设备 |
| 2 方法 |
| 2.1 卵巢切除动物模型的建立及分组 |
| 2.2 卵巢切除组及假手术组大鼠血清雌二醇浓度测定 |
| 2.3 四脑血管阻断全脑缺血模型的建立及分组 |
| 2.4 E2和G1对短期雌激素剥夺和长期雌激素剥夺大鼠神经保护作用的研究及分组 |
| 2.5 冰冻切片制作 |
| 2.6 尼氏染色 |
| 2.7 统计学分析 |
| 3.结果 |
| 3.1 卵巢切除组和假手术组大鼠血清雌二醇(E2)浓度变化 |
| 3.2 全脑缺血再灌注前后大鼠脑电图变化 |
| 3.3 四脑血管阻断全脑缺血再灌注模型后海马区神经元变化 |
| 3.4 E2或G1在短期雌激素剥夺的大鼠上发挥了显着的神经保护作用 |
| 3.5 E2或G1在长期雌激素剥夺的大鼠上并未发挥明显的神经保护作用 |
| 4.讨论 |
| 第二部分 GPR30在雌激素“关键期”假设中神经保护作用消失的机制研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验主要试剂及其配置 |
| 1.3 实验主要仪器及设备 |
| 2 方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 全脑缺血模型建立和尼氏染色 |
| 2.3 免疫荧光染色 |
| 2.4 蛋白样品制备和提取 |
| 2.5 Westernblot实验步骤 |
| 2.6 免疫共沉淀实验步骤 |
| 2.7 实时定量PCR(qPCR)的实验步骤 |
| 2.8 Tunel染色步骤 |
| 2.9 神经系统功能评分 |
| 2.10 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 GPR30在短期雌激素剥夺组和长期雌激素剥夺组海马区的表达 |
| 3.2 长期雌激素剥夺组GPR30在海马CA1区含量明显下降 |
| 3.3 长期雌激素剥夺组GPR30在海马CA1区mRNA水平明显下降 |
| 3.4 长期雌激素剥夺组和短期雌激素剥夺组GPR30在海马CA1区泛素化降解无显着差别 |
| 3.5 卵巢切除10周后给予E2治疗不能抑制海马CA1区GPR30的下调 |
| 3.6 卵巢切除10周后给予E2治疗行全脑缺血再灌注后并不能发挥明显的神经保护作用 |
| 3.7 卵巢切除后给予E2治疗整个10周可抑制海马CA1区GPR30的下调 |
| 3.8 卵巢切除后给予E2治疗整个10周可抑制海马CA1区GPR30mRNA水平下降 |
| 3.9 卵巢切除后立即给予E2治疗整个10周行全脑缺血再灌注后能发挥显着的神经保护作用 |
| 3.10 卵巢切除10周后给予E2治疗行全脑缺血再灌注后并不能抑制神经元的凋亡 |
| 3.11 卵巢切除后立即给予E2治疗整个10周行全脑缺血再灌注后可抑制神经元的凋亡 |
| 3.12 卵巢切除后给予E2治疗整个10周和卵巢切除10周后给予E2治疗大鼠的神经系统功能评分 |
| 4 讨论 |
| 第三部分 GPR30在老年雌性大鼠中的表达及E2和G1对老年雌性大鼠神经保护作用的研究 |
| 1 材料 |
| 1.1 实验动物 |
| 1.2 实验主要试剂及其配置 |
| 1.3 实验主要仪器及设备 |
| 2 方法 |
| 2.1 动物分组 |
| 2.2 全脑缺血模型建立和尼氏染色同第一部分 |
| 2.3 蛋白样品制备和提取同第二部分 |
| 2.4 Western blot实验步骤同第二部分 |
| 2.5 免疫共沉淀实验步骤 |
| 2.6 实时定量PCR(qPCR)的实验步骤 |
| 2.7 Tunel染色步骤 |
| 2.8 神经系统功能评分 |
| 2.9 统计学分析 |
| 3 结果 |
| 3.1 GPR30、ERα、ERβ受体在3个月和24个月雌性大鼠海马CA1区表达情况 |
| 3.2 GPR30mRNA水平在24个月和3个月雌性大鼠海马CA1区表达情况 |
| 3.3 24个月老年雌性大鼠组和3个月青年雌性大鼠组GPR30在海马CA1区泛素化降解无显着差别 |
| 3.4 24个月老年雌性大鼠给予不同处理行全脑缺血再灌注后尼氏染色结果 |
| 3.5 24个月老年雌性大鼠给予不同处理行全脑缺血再灌注后Tunel染色结果 |
| 3.6 24个月老年雌性大鼠给予不同处理行全脑缺血再灌注后神经系统功能评分 |
| 4 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 个人简历和研究成果 |
| 致谢 |
四、大鼠非开颅术脑干缺血模型的创建（论文参考文献）
- [1]颅内静脉循环障碍加重TBI后脑损伤的实验研究[D]. 王成. 福建医科大学, 2021(02)
- [2]大鼠急性硬膜下血肿对脑表面血流影响的激光散斑技术研究[D]. 鲜亮. 蚌埠医学院, 2021(01)
- [3]电针“水沟”对局灶性脑缺血大鼠CGRP、AVP、Ang-Ⅱ影响的实验研究[D]. 张婷婷. 天津中医药大学, 2021(01)
- [4]总胆固醇对急性缺血性脑卒中溶栓后出血转化的预测价值[D]. 吴展兴. 汕头大学, 2020(02)
- [5]电项针对脑干缺血大鼠模型脑干听觉诱发电位的影响[D]. 魏鑫甜. 黑龙江中医药大学, 2020(01)
- [6]基于“络脑调神”探讨眼针治疗急性脑梗死的临床观察及作用机制[D]. 王宇. 辽宁中医药大学, 2020(01)
- [7]食蟹猴大脑中动脉M1段选择性夹闭脑缺血模型的制作与评价[D]. 高凯. 南方医科大学, 2020(01)
- [8]通过脑干听觉诱发电位观察电项针治疗脑干缺血大鼠即时效应[J]. 刘勇,魏鑫甜. 辽宁中医药大学学报, 2020(03)
- [9]PI3K抑制剂ZSTK474对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制研究[D]. 王珀. 天津医科大学, 2019(02)
- [10]GPR30下调参与缺血性脑卒中后雌激素神经保护作用减弱的作用及机制研究[D]. 邬迎喜. 中国人民解放军空军军医大学, 2018(05)