一、Effects of antisense transforming growth factorβreceptor -Ⅰ (TβRⅠ )expressing plasmid on pig serum-induced rat liver fibrosis（论文文献综述）
涂丽裙[1]（2020）在《转化生长因子-β2反义寡核苷酸的微生物疫苗及肿瘤疫苗的佐剂作用》文中指出转化生长因子-β2（TGF-β2）对免疫应答有全方位的负调节作用,可调节几乎每一种适应性免疫应答和固有免疫应答的细胞,包括树突状细胞、T细胞、B细胞、粒细胞和固有免疫淋巴样细胞。使用免疫检查点抑制剂治疗肿瘤的成功案例提示我们:抑制免疫抑制性细胞因子TGF-β2可能是一种新的策略去研制新型疫苗佐剂。为了研制出以核酸为基础的TGF-β2的抑制剂,我们设计了三个靶向人鼠的TGF-β2 m RNA3’UTR保守区域的反义寡核苷酸,并将其命名为TIO1,TIO2,TIO3。在小鼠巨噬细胞,人单核细胞及人浆细胞样树突状细胞,TIO1,TIO2及TIO3均明显下调TGF-β2的表达。在小鼠中,TIO3和TIO1,均可显着增强微生物疫苗所诱导的抗体反应。其中TIO3为佐剂的流感疫苗可抵抗流感病毒的攻击并减轻流感病毒引起的急性肺损伤。在小鼠中,TIO3可明显下调淋巴结及脾脏细胞CD4+T细胞及CD19+B细胞上s TGF-β2的表达,上调CD19+B细胞及CD11c+DC表面CD40,CD80,CD86,CD69及MHC II分子的表达,促进CD4+T细胞和CD8+T细胞产生IFN-γ,促进CD4+T细胞产生IL-4,抑制调节性T细胞（Tregs）的产生,促进CD4+T细胞和CD19+B细胞的增殖与活化,促进流感病毒感染的小鼠的肺脏中CD4+T细胞和CD8+T细胞表面CD69的表达。总的来说,通过干扰TGF-β2的表达,TIO3或TIO1,可作为新型微生物疫苗佐剂增强疫苗诱导的抗体反应;此外,TIO3为佐剂的胶质瘤细胞裂解物疫苗可显着延长原位接种胶质瘤预防模型小鼠的生存期。TIO3可通过抑制人和小鼠的胶质瘤细胞、CD4+T细胞和CD8+T细胞表达TGF-β2,诱生胶质瘤特异性的CD4+T细胞和CD8+T细胞,激活NK细胞,促进CD4+T细胞和CD8+T细胞产生IFN-γ,上调胶质瘤细胞表面MHCI分子的表达进而增强胶质瘤疫苗的抗肿瘤功效。单独应用TIO3可通过抑制胶质瘤细胞表达TGF-β2、促进胶质瘤细胞表达MHC I,IL-17A及IFN-α、抑制CD4+T细胞和CD8+T细胞表达s TGF-β2、抑制Tregs的产生、促进CD4+T细胞及CD8+T细胞的增殖而明显延长原位接种胶质瘤预防模型小鼠的生存期。单独应用TIO3可通过抑制胃癌细胞表达TGF-β2,促进MHC I,IL-13,IL-15,IL-17及IFN-γ的表达而显着减少肿瘤体积、延长胃癌背部移植瘤小鼠的生存期。TGF-β2的反义寡核苷酸有潜能作为微生物疫苗和肿瘤疫苗的新型佐剂,或单独治疗胶质瘤和胃癌的候选药物。
胡丽华[2]（2020）在《TGF-β信号通路对角膜上皮干/祖细胞增殖分化功能的调控》文中研究指明使用干细胞的再生或修复治疗取决于在体外建立和优化干细胞培养体系,在移植的组织或者细胞中若没有含量充足的干细胞,治疗性角膜缘移植或体外扩增角膜缘细胞移植可能会失败或者不能维持长期有效性。因此,建立体外有效扩增角膜上皮干细胞的体系具有重要临床意义。本研究的目的就是利用小分子化合物来尝试建立一个有效的体外扩增角膜上皮干细胞的体系,并探究其可能的机制。转化生长因子β（Transforming Growth Factorβ,TGF-β）信号通路是调节眼组织细胞行为的重要信号通路之一,以往对TGF-β信号通路调控功能的研究主要集中在眼组织纤维化和炎症反应中。然而,TGF-β在眼组织和眼外组织中,均显示出具有抑制上皮细胞生长的作用。由于TGF-β是一种在不同的环境下即能抑制也能刺激细胞增殖的双向调节因子,因此我们检测了抑制TGF-β受体Ⅰ（Transforming Growth FactorβReceptor 1,TβR-I）介导的信号通路对在体外无血清和无滋养层条件下培养的原代角膜上皮细胞（Corneal Epithelial Cells,CECs）增殖和分化功能的影响。我们用中性蛋白酶和胰蛋白酶从6-8周龄雌性C57BL/6小鼠的眼球中分离得到小鼠原代角膜上皮细胞（Corneal Epithelial Cells,CECs）,在含添加剂的成分确定的角质形成细胞无血清培养液（Defined Keratinocyte serum-free medium,defined KSFM）（完全培养液）中无滋养层培养。所有细胞被随机分为3组,在完全培养液中添加10μM SB-431542（特异性TβR-I抑制剂）培养的CECs为SB-CECs组;在完全培养液中添加10 ng/ml SRI-011381（特异性TGF-β信号激动剂）培养的CECs为SRI-CECs组,完全培养液中未额外添加SB-431542或SRI-011381培养的CECs为对照CECs组。我们通过在光镜下观察比较各组CECs的生长速率和形态;通过检测角膜上皮干/祖细胞（Corneal Epithelial Stem/Progenitor Cells,CESCs/CEPCs）经典标志物p63、分化抑制因子1（Inhibitor of Differentiation,ID1）、细胞角蛋白12（Keratin 12,K12）、细胞角蛋白14（Keratin 14,K14）、转录因子PAX6、信号分子p Smad3、α平滑肌肌动蛋白（αSMA）和e-钙粘蛋白（E-cadherin,E-cad）等标志物的免疫荧光染色;通过p63的实时定量PCR（real time quantitative PCR,RT-PCR）分析、ID1的蛋白质印迹（western blot,WB）分析;以及集落形成试验（colony forming assay,CFA）、球体形成试验（sphere forming assay,SFA）、体外创伤愈合（healing wound in vitro）实验和气液界面（air-lifting interface,ALI）试验等方法,鉴定了细胞的属性和干性。结果显示,应用TβR-I抑制剂组的SB-CECs传代稳定、持续扩增,扩增速度是对照组CECs的3倍左右。扩增的SB-CECs呈鹅卵石样外观,并且体积更小、排列更紧密;细胞内p63和ID1的表达均上调;集落形成能力和球体形成能力,以及在ALI条件下分化和形成复层角膜上皮样结构的能力,均优于对照组CECs。人角膜缘上皮细胞（Human Limbal Epithelial Cells,HLECs）的初步试验结果和小鼠CECs一致。我们还发现,在原代提取的培养细胞和传代细胞中,以及在正常的角膜组织切片中,ID1的表达模式几乎和经典的CESCs/CEPCs标志物p63完全一致。鉴于ID1对抑制细胞分化起着重要的作用,并已被证实其表达在上皮细胞中受TGF-β信号通路负调控,因此由TβR-I阻滞剂所引起的ID1的去抑制,至少在一定程度上,可能是SB-CECs中的CESCs/CEPCs能持续扩增,以及ID1和p63的表达量一起同步上调的根本原因。综上所述,在原代CECs的体外无血清无滋养层培养过程中,通过阻断TβR-I介导的信号通路,CESCs/CEPCs获得了长期有效的扩增,而ID1的去抑制可能是其根本原因。同时,ID1具有作为CESCs/CEPCs的标志物的潜质。这些研究结果能够帮助推进CESCs/CEPCs的相关基础和临床研究。
李振芳[3]（2019）在《三角帆蚌Smads基因的表达及对创伤修复的探究》文中研究指明TGF-β/Smads信号通路在早期胚胎发育、组织修复、细胞增殖与分化、凋亡和迁移、内分泌和免疫等多种生理过程中扮演着重要的角色。研究表明,TGF-βs与细胞外基质沉着有着密切的关系,并且是创伤愈合及瘢痕形成的主要因素之一。三角帆蚌是优良的淡水育珠蚌,由于插核育珠环节对蚌造成严重损伤并影响育珠质量,造成极大的经济损失,因此开展三角帆蚌TGF-β/smads信号通路的研究将有利于了解贝类的免疫及创伤修复机制,为其健康养殖提供理论基础。1.根据前期构建的三角帆蚌转录组文库中筛选出Smad3及Smad4基因片段设计特异性引物,利用RACE-PCR技术成功克隆出了HcSmad3及HcSmad4基因的cDNA序列全长。HcSmad3的5’端非编码区的大小为162bp,3’端非编码区的大小为633bp,开放阅读框为1257bp,共编码418个氨基酸,包含两个终止信号序列（AATAAA）以及一个PolyA尾巴,经预测其理论的等电点为6.09,分子量大小为47.28 kDa。HcSmad4的5’UTR大小为119bp,3’UTR大小为876bp,开放阅读框长度为1548bp编码515个氨基酸,预测其理论等电点与相对分子量大小分别是6.90和56.73 kDa。他们都拥有两个保守的结构域MH1（Smad3:29-129aa;Smad4:18-138aa）和MH2（Smad3:222-394aa;Smad4:287-513aa）,并且均含有核定位信号NLS（Smad3:39-45aa;Smad4:31-49aa）和核输出信号NES（Smad3:359、362、365、367aa;Smad4:137-144aa）。2.经过实时荧光定量PCR分析,HcSmad3、HcSmad4和HcSmad5在三角帆蚌所有组织中均有表达,三者都是在闭壳肌中表达量最高,在肝胰脏、外套膜、鳃中表达量较低,在血细胞中表达量最低。3.用嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila）和肽聚糖（PGN）刺激后,在血细胞中,与对照组比,HcSmad3在3h的表达量显着上调,然后恢复到原来的水平,在肝胰腺中,经嗜水气单胞菌刺激后,在6h、12h及24h表达量显着上调,然而肽聚糖刺激后无明显变化;经嗜水气单胞菌刺激后,在血细胞中,与对照组相比,HcSmad4在6h表达量最高,在肝胰腺中,HcSmad4在48h表达量最高。4.创伤后,HcSmad4的表达量较空白对照组显着增加,且其下游靶基因HcMMP1、HcMMP19、HcTIMP1和HcTIMP2表达量在一定程度上均上调;RNA干扰HcSmad3/4以及SIS3抑制HcSmad3后,下游基因的表达量较创伤组均下调。5.组织形态学结果表明,HcSmad3基因敲降或SIS3抑制剂处理可加速创伤愈合,而HcSmad4基因敲降可延缓蚌体伤口愈合过程。6.构建HcSmad3-PET32和HcSmad4-PET28重组质粒,HcSmad3蛋白只存在于包涵体中,而HcSmad4蛋白在上清和包涵体中均可表达。通过免疫日本实验级白兔获得HcSmad4的多克隆抗体。
费忠伟[4]（2018）在《靶向TGF-β1的治疗性基因重组抗体药物研发及表征》文中提出TGF-β（transforming growth factors-β,转化生长因子TGF-β）在肿瘤的发生以及发展过程中的作用极其复杂。体细胞基因突变所导致的对TGF-β的抑制增殖作用的破坏,是恶性肿瘤形成的关键因素。随之而来的是,这种对于TGF-β抑制增殖作用的脱敏,常常导致肿瘤细胞以及被招募到肿瘤微环境的正常细胞大量表达TGF-β细胞因子。有研究表明,在肿瘤微环境下一定浓度的TGF-β细胞因子会促进肿瘤生长以及转移的发生。因此,选择性抑制肿瘤细胞周围的表达上调的TGF-β,逐渐成为治疗TGF-β相关疾病的热门治疗策略。大量实验证据表明,在小鼠移植瘤模型中,使用靶向TGF-β的特异性抗体药物、可溶性受体以及针对TGF-β信号转导通路的小分子抑制剂可有效抑制肿瘤生长。在本研究中,我们基于已经披露部分信息的两个抗体:一个是R&D公司的杂交瘤来源的1D11工具抗体;另一个是Eli Lilly公司的LY-2382770人源化抗体,来开发出具有独立知识产权的能有效结合hTGF-β1的单抗药物先导分子,验证它的抗肿瘤效果,并最终用于下一步与PD-1单抗组建双功能抗体或联合用药。在比较两个抗体的生物活性以及理化特性之后,我们发现1D11抗体的亲和力以及生物学活性均显着低于LY-2382770抗体,而且两者结合的抗原表位近似,但后者却存在热力学稳定性方面的不足。在综合考虑各方面因素以后,我们选择Eli Lilly公司的LY-2382770抗体作为抗体工程改造的优选分子。其次,考虑到抗体的Vh（重链可变区）基因在抗原识别的特异性方面占据主导作用,为了降低改造单抗对于TGF-β抗原的特异性识别能力的削弱,并且同时进行热稳定性改造,我们只对LY-2382770单抗进行轻链替换,并借此寻找热稳定性提高的突变体。实验结果表明,使用轻链替换能有效的提高抗体的热稳定性以及表达量,改善抗体的聚集情况,并且对抗体自身的亲和力不会产生明显的影响。配合使用亲和力成熟的方法可以弥补亲和力的降低,联合使用这两种方法可以加速先导分子的研发速度和研发效率。
Xin Xu,Liwei Zheng,Quan Yuan,Gehua Zhen,Janet L.Crane,Xuedong Zhou,Xu Cao[5]（2018）在《Transforming growth factor-β in stem cells and tissue homeostasis》文中研究指明TGF-β 1–3 are unique multi-functional growth factors that are only expressed in mammals, and mainly secreted and stored as a latent complex in the extracellular matrix（ECM）. The biological functions of TGF-β in adults can only be delivered after ligand activation, mostly in response to environmental perturbations. Although involved in multiple biological and pathological processes of the human body, the exact roles of TGF-β in maintaining stem cells and tissue homeostasis have not been well-documented until recent advances, which delineate their functions in a given context. Our recent findings, along with data reported by others, have clearly shown that temporal and spatial activation of TGF-β is involved in the recruitment of stem/progenitor cell participation in tissue regeneration/remodeling process, whereas sustained abnormalities in TGF-β ligand activation, regardless of genetic or environmental origin, will inevitably disrupt the normal physiology and lead to pathobiology of major diseases. Modulation of TGF-β signaling with different approaches has proven effective pre-clinically in the treatment of multiple pathologies such as sclerosis/fibrosis, tumor metastasis, osteoarthritis, and immune disorders. Thus, further elucidation of the mechanisms by which TGF-β is activated in different tissues/organs and how targeted cells respond in a context-dependent way can likely be translated with clinical benefits in the management of a broad range of diseases with the involvement of TGF-β.
黄东华[6]（2016）在《肾络通调控Smads信号通路抑制肾间质纤维化的机制研究》文中研究说明第一部分肾络通对肾间质纤维化大鼠肾脏组织形态学的影响目的:本次实验采用单侧输尿管结扎（UUO）的方法建立梗阻性肾病肾间质纤维化的大鼠实验动物模型,以化瘀涤痰通络中药——肾络通对实验大鼠进治疗,并以醛固酮受体阻断剂——依普利酮作为对照药物干预治疗实验大鼠,观察实验大鼠的一般情况和肾组织病理形态学的改变,以探讨化瘀涤痰通络中药肾络通抑制肾间质纤维化的作用机制。方法:1动物分组和模型制备:实验动物自由进食和饮水,温度条件控制在（22±2）℃。适应性饲养1WK后,48只Wistar大鼠随机分为假手术组（Sham group）、UUO组（UUO group）、依普利酮组（EPL group）、肾络通组（SLT group）,每组各12只。大鼠单侧输尿管梗阻模型制备参照Iwai T的方法。各组大鼠用10%水合氯醛注射后,于左侧中腹部切开皮肤,游离左侧输尿管,分别在输尿管上1/3和中1/3处用丝线结扎,切断输尿管,后逐层缝合皮肤。假手术组仅将输尿管游离但不结扎切断,轻轻拨动肠管后缝合腹部皮肤。术后第3天肾组织病理显示炎细胞浸润,第5日后胶原间质成分增多,第10日梗阻侧肾脏明显大于对侧肾脏,肾间质大量胶原增生及炎细胞浸润,肾小管上皮细胞变性、浊肿、脱落、坏死,肾小管部分萎缩、管腔闭塞或扩张,与文献报道相一致,符合肾间质纤维化的病理改变,模型复制成功。UUO术后大鼠死亡5只,用备用大鼠补足。2给药:术后即开始给药,依普利酮组给予依普利酮混匀于饲料中按100mg/（kg·d）剂量食入;肾络通组以肾络通煎剂26g/（kg·d）入水瓶饮用,假手术组及UUO组给予等容量生理盐水饮用,均每天1次。连续干预10天。10天后,各组大鼠称重后断头处死,切取梗阻侧肾脏,去除被膜后称重,部分肾组织置于4%多聚甲醛中固定,以备肾脏病理学检测。3指标检测及方法:每日观察并记录各组大鼠的精神状态、活动状况、皮毛变化、饮水量及进食量,分别测量每只大鼠体重、24h尿量;称量大鼠体重并摘取左侧肾脏称重,计算大鼠肾重/体重比值;左侧肾组织,分别行HE、Masson、天狼星红染色,光学显微镜下观察病理改变。4统计学处理:数据资料以均数±标准差（x±s）表示,使用SPSS 16.0for windows统计软件进行统计学处理,数据均在比较前进行正态性及方差齐性检验,满足正太性及方差齐性者,采用单因素方差分析（one-way ANOVA）,组间比较采用LSD检验。结果:1各组大鼠的一般情况及梗阻侧肾重/体重比值的测定结果:一般情况:Sham组大鼠一般情况良好,较手术前没有明显变化。UUO术后各模型组大鼠一般情况不佳:毛发光泽度较差,对外界刺激反应不佳,饮食量明显减少。梗阻侧肾重/体重比较:UUO术后各模型组梗阻侧肾脏重量均较Sham组明显增加（P<0.01）,而体重却明显降低（P<0.01）,故而梗阻侧肾重/体重比值较Sham组明显升高。与UUO组大鼠比较,EPL组及SLT组大鼠梗阻侧肾脏重量均明显降低（P<0.01,或P<0.05）,而体重明显升高（P<0.01,或P<0.05）,故而梗阻侧肾重/体重比值均较UUO组明显降低（P<0.01,或P<0.05）。2各组大鼠梗阻侧肾脏病理形态学改变:HE染色时显示,Sham组肾脏组织结构无明显异常改变,肾小管上皮细胞结构无改变,排列整齐,肾间质无增宽、水肿等改变,仅可见少量炎细胞浸润;UUO组肾组织结构发生明显改变,肾小管上皮细胞结构异常,多见变性、坏死的病理改变,甚至部分脱落,肾间质可见大量炎细胞浸润,肾小管扩张明显;EPL组及SLT组肾小管上皮细胞变性、坏死及肾小管扩张程度较UUO组稍有减轻,炎细胞浸润的数量明显减少。Masson染色时显示,Sham组仅见少量胶原分布于左侧肾组织中的肾小管基底膜、小血管周围及肾间质部分;UUO组梗阻侧肾脏组织结构排列紊乱,肾间质明显增宽,部分肾小管萎缩,管腔扩张,肾间质中有大量胶原沉积,尤以髓质明显;EPL组及SLT组梗阻侧肾脏组织中胶原含量较Sham组明显增多,但较UUO组却明显减少。天狼猩红染色时显示,Sham组左侧肾脏的组织结构无明显变化,仅有少量胶原分布于肾间质部分;UUO组梗阻侧肾脏肾小管扩张明显,并有大量胶原成分在肾间质沉积;EPL组及SLT组肾间质胶原沉积增多,但较UUO组显着减少。第二部分肾络通对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF-β1、CTGF的表达的影响目的:本次实验采用单侧输尿管结扎（UUO）的方法建立梗阻性肾病肾间质纤维化的大鼠实验动物模型,以化瘀涤痰通络中药——肾络通对实验大鼠进治疗,并以醛固酮受体阻断剂——依普利酮作为对照药物干预治疗实验大鼠,采用免疫组化、Western Blot、RT-PCR检测大鼠肾组织TGF-β1、CTGF表达,观察并分析依普利酮及肾络通对TGF-β1、CTGF的调控作用,以探讨化瘀通络中药肾络通抑制肾间质纤维化的作用机制。方法:动物分组、模型制备、给药方法同第一部分,共10天。实验结束时,留取肾脏标本,Real time-PCR、免疫组化、Western blot检测TGF-β1、CTGF及蛋白的表达。统计学方法同第一部分。结果:1 Real-time PCR检测TGF-β1、CTGF的表达:与Sham组比较,UUO组中TGF-β1m RNA、CTGFm RNA表达明显增强（P<0.01,P<0.05）。与UUO组比较,EPL组及SLT组TGF-β1m RNA、CTGFm RNA表达均明显下降,并且EPL组二者下降更为显着（P<0.05）。2免疫组化检测α-SMA、PCNA、TGF-β1、CTGF表达:假手术组α-SMA主要见于血管,呈强阳性,其他部位表达不明显;PCNA阳性细胞有少量表达,TGF-β1、CTGF主要表达于肾小管上皮细胞及肾小球,呈弱表达;UUO组中PCNA阳性细胞显着增多,主要以扩张的远端小管上皮细胞为主,α-SMA表达亦明显增强,主要见于肾小管间质及上皮细胞。TGF-β1、CTGF主要表达于肾小管上皮细胞及肾小球。与UUO组比较,依普利酮及肾络通组PCNA阳性细胞显着减少,α-SMA、TGF-β1、CTGF表达范围及强度均显着减弱。3 Western Blot检测TGF-β1、CTGF蛋白表达:UUO组TGF-β1、CTGF蛋白表达较Sham组明显上调。EPL组及SLT组TGF-β1、CTGF蛋白表达均较UUO组明显下降,并且EPL组下调更为显着,差异有统计学意义（P<0.01）。第三部分肾络通对肾间质纤维化大鼠肾脏Smads信号通路的影响目的:本次实验采用单侧输尿管结扎（UUO）的方法建立梗阻性肾病肾间质纤维化的大鼠实验动物模型,以化瘀涤痰通络中药——肾络通对实验大鼠进治疗,并以醛固酮受体阻断剂——依普利酮作为对照药物干预治疗实验大鼠,采用免疫组化、Western Blot、RT-PCR检测大鼠肾组织Smad3、Smad4、Smad7表达,观察并分析依普利酮及肾络通对Smad3、Smad4、Smad7的调控作用,以探讨化瘀通络中药肾络通抑制肾间质纤维化的作用机制。方法:动物分组、模型制备、给药方法同第一部分,共10天。实验结束时留取肾脏标本,Real-time PCR检测Smad4m RNA、Smad7m RNA的表达,免疫组化、Western blot检测Smad3、Smad4、Smad7表达。统计学方法同第一部分。结果:1 Real-time PCR检测Smad4m RNA、Smad7m RNA的表达:UUO组大鼠梗阻侧肾组织中Smad4m RNA的表达较Sham组明显增高（P<0.01）;而Smad7m RNA的表达则显着下降（P<0.01）。EPL组及SLT组大鼠梗阻侧肾组织中Smad4m RNA的表达均较UUO组明显下降,尤以EPL组下降更为明显（P<0.05）;EPL组及SLT组大鼠梗阻侧肾组织中Smad7m RNA的表达均较UUO组显着增高,尤以EPL组升高显着（P<0.05）2免疫组化检测Smad3、Smad4、Smad7表达:Sham组大鼠梗阻侧肾组织中Smad3、Smad4呈弱表达,Smad7表达增强,UUO组大鼠梗阻侧肾组织中Smad3、Smad4表达较Sham组显着上调,而Smad7表达则显着下降,主要表达于肾小管上皮细胞的胞浆中。与UUO组比较,EPL组及SLT组大鼠梗阻侧肾组织中Smad3、Smad4表达范围及强度均显着减弱;Smad7表达范围及强度均显着增强。3 Western Blot检测Smad3、Smad4、Smad7蛋白表达:UUO组大鼠梗阻侧肾组织中Smad3、Smad4蛋白表达较Sham组明显增多（P<0.01）;而Smad7蛋白表达则较Sham组明显减少（P<0.01）。EPL组及SLT组大鼠梗阻侧肾组织中Smad3、Smad4蛋白的表达均较UUO组明显下降,尤以EPL组下降更为明显（P<0.01）。EPL组及SLT组大鼠梗阻侧肾组织中Smad7蛋白的表达均较UUO组明显升高,尤以EPL组升高更为显着（P<0.01）。结论:1采用单侧输尿管结扎的方法可成功复制梗阻性肾病肾间质纤维化大鼠动物模型,UUO大鼠肾脏病理显示大量炎细胞浸润及胶原成分大量沉积,符合肾间质纤维化的病理改变。化瘀涤痰通络中药肾络通可减少UUO大鼠肾组织中炎细胞的数量和胶原的沉积,减轻肾间质纤维化的损伤程度,从而延缓了肾间质纤维化的进程。2肾络通和依普利酮均可以通过抑制TGF-β1信号通路,下调CTGF表达,而抑制肾小管上皮细胞的表型转化并减少成纤维细胞的增殖,减少ECM的合成并增加其降解,从而减少ECM的积聚,减轻肾间质纤维化的程度而减缓其发展。3 TGF-β1/Smads信号通路是引起肾间质纤维化的共同作用途径,在UUO肾脏模型中,TGF-β1/Smads信号通路明显被激活,进而引起肾间质纤维化的形成。祛瘀化痰通络中药肾络通可通过抑制Smad3的表达水平,并阻碍其与Smad4的结合,同时上调Smad7的表达,而阻断了TGF-β1信号的传导,进而阻止了UUO大鼠肾间质纤维化的发生发展过程。
李琼书[7]（2015）在《MUC1通过转变TGF-β抑癌信号促进肝癌发展的作用及分子机制》文中指出Mucin1（MUC1）作为癌基因可通过调控多种促增殖和抑制凋亡信号促进多种腺癌发生发展，但是MUC1是否能调控转化生长因子β （TGF-β）信号促进癌症进展还未见报道。我们前期研究发现，MUC1不仅影响肝癌的形成，同时能调控TGF-β信号通路分子的基因水平，提示了一个新的分子机制，即MUC1可能调控TGF-β信号促进癌症发展。TGF-β信号在正常细胞和癌前病变的组织中表现为肿瘤抑制作用，而在癌细胞中转变成促癌作用。然而，TGF-β在癌细胞中如何由抑癌作用转变成促癌作用的机制是一直未解决的科学问题。近年研究表明，JNK是TGF-β信号由抑癌向促癌转变的关键分子，但调控JNK的上游分子并不清楚。另外，MUC1能激活JNK抑制结肠癌细胞凋亡。因此，结合前期结果我们推测，MUC1可能通过激活JNK转变TGF-β抑癌信号促进肝癌发展。本研究中，我们在肝癌细胞系中进行MUC1基因沉默和过表达，研究MUC1对肝癌细胞的增殖以及TGF-β信号的影响，通过阻断信号传导、基因干扰、荧光素酶报告分析及免疫沉淀等方法，研究JNK在MUC1调节的TGF-β信号中的作用，进一步通过体内实验以及临床肝癌病人肿瘤组织样本验证MUC1、TGF-β信号与JNK之间的关系。本研究结果表明，在肝癌细胞中MUC1直接结合并激活JNK活化JNK/AP1途径诱导自分泌TGF-β信号促进细胞迁移，并通过JNK将p-Smad3C/p21抑癌信号转变为p-Smad3L/c-Myc促癌信号促进细胞增殖，揭示MUC1是TGF-β信号由抑癌转变成促癌作用的新分子，TGF-β信号是MUC1发挥癌蛋白作用的新途径；阐明MUC1通过TGF-β信号不仅调控肿瘤细胞内部信号传导，而且通过诱导TGF-β分泌具有调控肿瘤微环境的潜能。本研究最终揭示MUC1是促进肝癌发展的重要癌基因，为肝癌靶向治疗提供有效靶点。
Juliana FELGUEIRAS,Joana Vieira SILVA,Margarida FARDILHA[8]（2014）在《前列腺癌:亟待肿瘤标志物和治疗新靶点（英文）》文中研究说明研究目的:这篇综述系统地阐述了前列腺癌的发生、发展、相关分子信号通路以及分子标志物用于前列腺癌的临床诊断和前列腺癌诊治所面临的挑战。重要结论:许多分子信号通路通过影响细胞生长、凋亡、血管生成等病理生理过程而参与了前列腺癌的起始、发生和发展。这些研究基础有助于寻找前列腺癌的肿瘤标志物和改进前列腺癌的治疗。虽然去势治疗是早期前列腺癌治疗的金标准,但是晚期的激素抵抗型前列腺癌（CRPC）的治疗仍面临着巨大的挑战。所幸的是,目前研究发现可以通过切断特异的蛋白-蛋白相互作用或者通过调节某些影响肿瘤生长和转移的关键分子来治疗前列腺癌,能减少传统治疗所带来的副作用;相关临床研究已开始实施。这些研究进展给前列腺癌的诊治带来了新的曙光。
林尊文[9]（2012）在《粉防己碱干预增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β/Smad信号转导通路的分子机制》文中指出研究背景：瘢痕是皮肤组织创伤愈合的自然结局,分为炎症反应、组织增生和重塑三个阶段,这一过程的基础是炎性细胞和修复细胞的的一系列活动。在整个创伤修复愈合过程中,创面局部微环境中的多种细胞与细胞外基质、多种蛋白分子之间受到机体精细调节,多种细胞因子可在细胞迁移和增殖、细胞外基质沉积和降解等各个方面影响创面愈合。当这种调节的动态平稳被破坏,则可引起瘢痕组织的过度增生而形成增生性瘢痕。增生性瘢痕是严重创伤及外科手术后常见的并发症,易造成相应部位的功能异常和外形改变,给患者带来一系列功能、外观和心理等方面的严重障碍。虽然随着细胞生物学和分子生物的快速发展,推动了瘢痕研究的深入,但其确切的发病机制仍未完全阐明。增生性瘢痕形成机制和防治的研究已成为当今外科领域急待解决而又非常棘手的难题之一。目前临床上对增生性瘢痕的治疗主要采取手术、机械压力法、药物、放疗、激光等多种方法进行单一或联合治疗,但效果仍不理想。目前认为,增生性瘢痕是以成纤维细胞异常增生和胶原、细胞外基质异常沉积为特点。多种致纤维化细胞因子参与增生性瘢痕的形成,但转化生长因子（TGF-β1）由于其在纤维组织积聚中发挥多种作用,可促进成纤维细胞的增殖、促进细胞外基质的产生和抑制胶原降解,被认为是瘢痕纤维化的最重要的生长因子。在烧伤后的增生性瘢痕成纤维细胞中TGF-β1 mRNA表达较正常皮肤明显增加。随后的研究证实,Smads蛋白可以将TGFP信号直接由细胞膜激酶受体转导入细胞核内,是目前已知唯一的TGF-β受体（TβR）胞内激酶底物,在TGF-β1胞内信号传导起关键作用。Smads被TβR激活后,转移到细胞核内调节基因转录。虽然TGFβ/Smads信号通路较为简单,但Smads蛋白与受体相互作用后形成复合物在细胞核内与特意转录因子相作用调控TGFP多种功能。由此可见,调控TGFβ/Smads信号通路阻断TGF-β1的生物学效应可能是抑制瘢痕增生的一个关键点。粉防己碱（Tetrandrine）是从千金藤属防己科植物汉防己的根中提取的一种生物碱,化学结构属双苄基异喹啉类化合物。通过对其药理作用的深入研究,发现该药可通过抑制肺组织与肝组织内成纤维细胞过度增殖和胶原等细胞外基质的合成、拮抗各种致纤维化因子的释放而发挥其抗矽肺、抗肝纤维化作用,并被随后的一系列临床研究所证实。研究表明,粉防己碱通过上调Smad7阻断TGF-β1表达及信号通路来抑制肝星形细胞。前期研究已证明粉防己碱能有效抑制TGF-β诱导的瘢痕成纤维细胞体外增殖和胶原合成,并在低于有效抑制细胞增殖浓度时仍对TGF-β促瘢痕样组织收缩具有阻断效应,提示粉防己碱有抑制增生性瘢痕形成的可能。但这些研究仍局限于初步的实验观察,目前未见从细胞信号转导角度系统研究粉防己碱抗瘢痕增生的分子药理作用机制的国内外文献报道；对粉防己碱抗瘢痕增生的具体作用靶点及其特点尚缺乏分子水平上的确切了解。因此,本实验拟以TGF-β/Smad信号转导通路为主线,通过应用RNAi干涉技术、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）、Western blot、流式细胞检测和免疫细胞化学及瘢痕成纤维细胞体外培养等方法,系统观察粉防己碱对增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β/Smad信号转导通路的干预作用,并采用基因芯片技术筛选粉防己碱干预前后瘢痕成纤维细胞差异表达基因,探讨粉防己碱干预后基因表达谱与TGF-β/Smad信号转导通路和胶原代谢改变的相关性及与其它信号串话的变化。旨在深入阐明粉防己碱抗瘢痕增生的分子机制,为增生性瘢痕的防治提供新思路,为进一步的临床应用提供理论依据和实验基础。目的：1.探讨并建立一种简便易行、培养周期短的增生性瘢痕成纤维细胞体外培养模型,并进行粉防己碱浓度筛选,为后续实验提供基础。2.探讨粉防己碱作用增生性成纤维细胞后对其TGF-β/Smads信号表达、增殖及胶原合成的影响。3.探讨粉防己碱作用对Smad7沉默增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β1及其下游信号Smads表达的影响。4.探讨粉防己碱干预后基因表达谱与TGF-β/Smad信号转导通路和胶原代谢改变的相关性及与其它信号串话的变化。方法：1.组织标本取自烧伤后增生性瘢痕患者,近期无使用瘢痕药物治疗史,不伴有肿瘤或其他严重疾病,采用组织块贴壁结合胰蛋白酶消化法体外分离培养人增生性瘢痕成纤维细胞,进行传代培养并进行冻存。倒置相差显微镜下观察培养的成纤维细胞形态,免疫细胞化学染色对成纤维细胞进行鉴定,作生长曲线观察细胞增殖能力；采用MTS检测粉防己碱不同浓度作用后成纤维细胞增殖影响,并计算不同浓度粉防己碱对成纤维细胞的抑制率。2.取体外分离培养的增生性瘢痕成纤维细胞,将其随机分成四组：对照组、粉防己碱处理组、TGF-β1处理组、混合处理组（粉防己碱+TGF-β1）,继续培养；作用48h后：采用RT-PCR检测TGF-β1、Smad2、Smad7、TβRI和TβR Ⅱ基因mRNA表达差异；采用Western blot检测TGF-β1、Smad2和Smad7蛋白表达差异；采用免疫细胞化学染色检测Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白（Col Ⅰ, ColⅢ）表达差异；细胞经PI染色后,采用流式细胞仪检测各组细胞周期的变化。3.取体外分离培养的增生性瘢痕成纤维细胞,采用siRNA-NC-FAM对成纤维细胞进行转染效率评价,筛选合适的载体进行转染；依据Ambion公司提供的SiRNA设计原则,结合分析已知基因序列和二级结构,确定特异性siRNA,体外转录法构建Smad7的SiRNA,转染增生性瘢痕成纤维细胞,提取RNA检测Smad7表达的强弱改变,证实转染后目的基因沉默；瞬时转染Smad7真核表达载体Lipofectamine TM2000,实验分为三组（空白对照组,Smad7-siRNA组,粉防己碱+Smad7-siRNA组）,加入粉防己碱作用48h,用RT-PCR方法比较粉防己碱作用前后HSFs中Smad2、Smad7、TβR Ⅰ、TβRⅡ、和TGF-β1 mRNA表达差异,用west-blot方法检测TGF-β1、Smad2蛋白表达差异。4.取体外分离培养的增生性瘢痕成纤维细胞,应用粉防己碱作用48h,分别对粉防己碱干预后成纤维细胞和正常对照组的mRNA提取、纯化、甲醛变性胶电泳质检后,进行荧光标记、杂交与清洗,扫描荧光信号,以LuxScan 3.0图像分析软件筛选差异表达基因,进一步对差异基因进行Pathway分类的统计分析；以Real time PCR验证芯片结果。统计学处理（二级标题）实验数据用SPSS 13.0统计软件进行统计分析,实验结果以均数±标准差（X±SD）表示,各组数据间的统计采用方差分析,p<0.05为显着性差异。多重比较采用LSD法,p<0.05为显着性差异。结果1.采用组织块贴壁结合胰蛋白酶消化法体外分离人增生性瘢痕成纤维细胞,48h可见组织块周围细胞长出；7d细胞局部融合；14d细胞基本融合。分离培养的成纤维细胞波形蛋白呈阳性表达。传代培养的成纤维细胞5d融合,细胞在1-5d处于指数分裂期。MTS结果显示粉防己碱浓度在2.5μg/ml-12.5μg/ml之间时,可明显抑制增生性瘢痕成纤维细胞的增殖,其作用并呈一定的剂量效应关系,当浓度为5μg/ml时,对成纤维细胞的抑制率为50.72%。2.增生性瘢痕成纤维细胞在粉防己碱作用后,Smad7表达增加而Smad2和TGF-β1表达减少,致使Ⅰ、Ⅲ胶原表达减少,S期成纤维细胞明显减少,而细胞数减少,细胞变圆变小,胞体周边的突触变短或消失；当TGF-β1作用成纤维细胞后,Smad7表达减少而Smad2、TGF-β1、I和Ⅲ型胶原表达表达增加,S期成纤维细胞明显增多,而胞体更大、突触更长；混合处理组结果与粉防己碱组相似；TβR Ⅰ和TβⅡ在各组中均未见显着差异。3.增生性瘢痕成纤维细胞Lipofectamin2000为转染试剂,0.5μl Lipo反转lOpmol siRNA-NC-FAM时能取得良好效果。Smad7沉默后增生性瘢痕成纤维细胞Ⅰ型胶原表达增加；粉防己碱作用Smad7沉默增生性瘢痕成纤维细胞,Smad7 mRNA表达增加而TGF-β1 mRNA表达减少,其他基因表达无显着差异。4.粉防己碱干预前后增生性瘢痕成纤维细胞差异基因比较,差异表达基因有202条,其中上调的基因有184条,下调基因有18条。对筛选的差异基因进行Pathway分类,与TGF-β1信号通路相关涉及蛋白翻译、能量合成和凋亡等25类信号通路,主要为TGF-beta信号通路、Toll样受体通路、PPAR信号通路、Wnt信号通路、MAPK信号通路、mTOR信号通路以及p53信号通路等,涉及上调基因31个如DCN,下调基因5个如JUN。Real time PCR结果显示粉防己碱组较照组中JUN的表达量降低,与芯片筛选结果相一致。结论1. 采用组织块贴壁结合胰蛋白酶消化法体外分离培养法可以较快、较好地获得稳定培养的增生性瘢痕成纤维细胞,并筛选出粉防己碱最佳作用浓度,为其形成机制及防治研究提供了实验基础。2.粉防己碱抑制增生性瘢痕成纤维细胞至少部分是通过诱导Smad7表达和下调Smad2来阻断下游信号通路传导,从而抑制Ⅰ、Ⅲ胶原表达和细胞增殖。3. Smad7沉默增生性瘢痕成纤维细胞Smad7对TGF-β/Smads信号通路的负向调控效应降低,而粉防己碱作用后,Smad7 mRNA表达虽有所增加,但不足以达到对信号TGF-β/Smads信号通路的负向调控效应,对成纤维细胞及胶原合成抑制作用不显着。4. 增生性瘢痕成纤维细胞在粉防己碱作用后,可见TGF-beta信号通路、Toll样受体通路、PPAR信号通路、Wnt信号通路、MAPK信号通路、mTOR信号通路以及p53信号通路等发生改变,参与了该药物抗纤维化的作用,体现了粉防己碱具有中药多途径与多靶点的作用特点,也进一步说明瘢痕形成中信号通路网络化和复杂性。
Xia Guo,Shi-You Chen,Department of Physiology and Pharmacology,University of Georgia,Athens,GA 30602,United States[10]（2012）在《Transforming growth factor-β and smooth muscle differentiation》文中研究指明Transforming growth factor（TGF）-β family members are multifunctional cytokines regulating diverse cel- lular functions such as growth,adhesion,migration, apoptosis,and differentiation.TGF-βs elicit their effects via specific typeⅠand typeⅡserine/threonine kinase receptors and intracellular Smad transcription factors. Knockout mouse models for the different components of the TGF-β signaling pathway have revealed their critical roles in smooth muscle cell（SMC）differentia- tion.Genetic studies in humans have linked mutations in these signaling components to specific cardiovascular disorders such as aorta aneurysm and congenital heart diseases due to SMC defects.In this review,the current understanding of TGF-β function in SMC differentiation is highlighted,and the role of TGF-βsignaling in SMC- related diseases is discussed.
二、Effects of antisense transforming growth factorβreceptor -Ⅰ (TβRⅠ )expressing plasmid on pig serum-induced rat liver fibrosis（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、Effects of antisense transforming growth factorβreceptor -Ⅰ (TβRⅠ )expressing plasmid on pig serum-induced rat liver fibrosis（论文提纲范文）
（1）转化生长因子-β2反义寡核苷酸的微生物疫苗及肿瘤疫苗的佐剂作用（论文提纲范文）
| 提要 |
| 中文摘要 |
| abstract |
| 文章缩略词表 |
| 引言 |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 TGF-β的概述 |
| 1.1.1 TGF-β的来源 |
| 1.1.2 TGF-β的表达 |
| 1.1.3 TGF-β的结构 |
| 1.1.4 TGF-β的信号通路 |
| 1.2 TGF-β的生物学活性 |
| 1.2.1 TGF-β对胚胎发育的调节 |
| 1.2.2 TGF-β对免疫应答的负向调节 |
| 1.2.3 TGF-β2对肿瘤的生长,侵袭及迁移的促进作用 |
| 1.2.4 TGF-β对组织损伤修复、创面愈合、瘢痕增生的促进作用及炎症反应的抑制作用 |
| 1.2.5 TGF-β2对纤维化的调节作用 |
| 1.2.6 TGF-β对肿瘤的抑制作用 |
| 1.3 靶向TGF-β2的药物 |
| 1.3.1 TGF-β2的反义寡核苷酸 |
| 1.3.2 TGF-β2的micro RNA |
| 1.3.3 TGF-β2的sh RNA |
| 1.3.4 TGF-β2的抗体 |
| 1.3.5 TGF-β2的反义基因修饰的同种异体肿瘤疫苗 |
| 1.3.6 TGF-β2的反义基因修饰的同种异体肿瘤疫苗 |
| 1.3.7 TGF-β2的抑制剂 |
| 1.4 疫苗佐剂的概述及其研究进展 |
| 1.4.1 增强第一信号的佐剂 |
| 1.4.2 增强第二信号的佐剂 |
| 1.4.3 增强第三信号的佐剂 |
| 1.4.4 抑制T细胞抑制信号的佐剂 |
| 1.4.5 改善肿瘤免疫抑制微环境的佐剂 |
| 1.4.6 病毒载体佐剂 |
| 1.4.7 其他佐剂 |
| 1.4.8 多佐剂肿瘤疫苗 |
| 1.4.9 佐剂的接种途径 |
| 1.4.10 佐剂发挥作用的机制 |
| 1.5 RNA靶向性寡核苷酸的研究进展 |
| 1.5.1 反义寡核苷酸(Antisense oligonucleotide) |
| 1.5.2 siRNA |
| 1.5.3 micro RNA |
| 1.5.4 反义寡核苷酸的化学修饰方法 |
| 第2章 材料方法 |
| 2.1 ODN及引物 |
| 2.2 实验试剂,仪器与耗材 |
| 2.3 细胞与细胞系 |
| 2.4 实验动物 |
| 2.5 IAV的扩增 |
| 2.6 IAV TCID50 的测定 |
| 2.7 IAV血凝效价的测定 |
| 2.8 聚合酶链式反应(RT-PCR) |
| 2.9 小鼠PBMC、脾脏及淋巴结单细胞悬液的制备 |
| 2.10 TIO对 TGF-β2 m RNA表达的抑制实验 |
| 2.11 流式细胞术(Flow cytometry) |
| 2.12 蛋白免疫印迹实验(Western Blotting analysis) |
| 2.13 免疫荧光技术 |
| 2.14 TIO在小鼠器官和组织中的分布检测 |
| 2.15 小鼠的免疫 |
| 2.15.1 疫苗的制备 |
| 2.15.2 小鼠的免疫和血清的收集 |
| 2.16 酶联免疫吸附试验(ELISA) |
| 2.17 流感病毒攻毒实验 |
| 2.18 小鼠肺组织的病理学观察 |
| 2.19 脑胶质瘤细胞裂解物(TCL)的制备 |
| 2.20 GL261脑胶质瘤原位模型的建立 |
| 2.21 脑胶质瘤预防模型的建立 |
| 2.22 脑胶质瘤治疗模型的建立 |
| 2.23 肿瘤周围浸润的炎性细胞的检测 |
| 2.24 肿瘤组织病理分析 |
| 2.25 胃癌背部移植瘤模型的建立 |
| 2.26 统计学分析 |
| 第3章 研究结果 |
| 3.1 靶向TGF-β2的反义寡核苷酸的设计与筛选 |
| 3.2 TIOs对 RAW264.7 细胞,U-937 细胞及CAL-1 细胞表达TGF-β2的影响 |
| 3.2.1 TIOs对 IL-4 诱导的RAW264.7 细胞TGF-β2 m RNA表达的影响 |
| 3.2.2 TIOs对 IL-4诱导的RAW264.7细胞Arg1及TNF-αmRNA表达的影响 |
| 3.2.3 TIOs对 LPS诱导的RAW264.7 细胞TGF-β2 mRNA表达的影响 |
| 3.2.4 TIOs对 LPS诱导的U-937 细胞表达TGF-β2 mRNA的影响 |
| 3.2.5 TIOs对甲型流感病毒(IAV)诱导的CAL-1 细胞TGF-β2mRNA表达的影响 |
| 3.2.6 TIOs对 IL-4/LPS诱导的RAW264.7/U-937细胞表达TGF-β2蛋白的影响 |
| 3.3 TIO3在细胞和组织中的分布 |
| 3.4 TIOs的微生物疫苗佐剂效应 |
| 3.4.1 TIOs对微生物疫苗诱导的抗体产生水平的影响 |
| 3.4.2 TIO3对流感病毒疫苗诱导的抗流感病毒效率的增强作用 |
| 3.4.3 TIO1和TIO3 的微生物疫苗佐剂效应的可能机制 |
| 3.4.4 TIOs的微生物疫苗佐剂的安全性评价 |
| 3.5 TIO的胶质瘤疫苗的佐剂作用 |
| 3.5.1 TIOs为佐剂的胶质瘤细胞裂解物疫苗对原位接种脑胶质瘤预防模型小鼠的影响 |
| 3.5.2 TIOs为佐剂的胶质瘤疫苗对原位接种胶质瘤治疗模型小鼠生存期的影响 |
| 3.6 单独应用TIO3的抗胶质瘤及抗胃癌作用 |
| 3.6.1 单独应用TIO3对脑胶质瘤原位移植瘤模型小鼠生存期的影响 |
| 3.6.2 单独应用TIO3对胃癌背部移植瘤模型小鼠体重、肿瘤大小及生存期的影响 |
| 3.6.3 单独应用TIO3对胃癌细胞腹腔种植模型小鼠生存期的影响 |
| 第4章 讨论 |
| 4.1 TIOs的微生物疫苗佐剂效应 |
| 4.1.1 TIO3对CD4~+T细胞表面s TGF-β2 表达的抑制作用 |
| 4.1.2 TIO3 对 CD19~+ B 细胞表面 sTGF-β2 表达的抑制作用 |
| 4.1.3 TIO3的药效动力学分析 |
| 4.1.4 TIO1,TIO2及TIO3 的不同功效的机理分析 |
| 4.1.5 TIO3用于微生物疫苗佐剂的副作用分析 |
| 4.1.6 TIO3用于微生物疫苗佐剂的可行性分析 |
| 4.2 TIO3的胶质瘤疫苗佐剂效应 |
| 4.2.1 TIO3 对胶质瘤细胞MHC I分子表达的上调作用 |
| 4.2.2 TIO3的胶质瘤疫苗佐剂效应的机理分析 |
| 4.3 单独应用TIO3的抗胶质瘤和抗胃癌作用 |
| 4.4 总结和展望 |
| 结论 |
| 创新点 |
| 附录1 |
| 附录2 The College of Basic Medical Sciences of Jilin University Ethics Committee Approval Form |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（2）TGF-β信号通路对角膜上皮干/祖细胞增殖分化功能的调控（论文提纲范文）
| 华中科技大学博士学位论文创新点概述 |
| 英文缩略词表 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 1 引言 |
| 1.1 角膜上皮干细胞和角膜上皮干细胞缺乏症 |
| 1.2 无饲养层和无血清条件下体外扩增角膜上皮干细胞的重要意义 |
| 1.3 TGF-β结构和功能 |
| 1.4 ID蛋白的结构和功能 |
| 1.5 小结 |
| 2 实验研究 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验设备 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.4 实验结果 |
| 2.4.1 TβR-I抑制剂在体外原代细胞培养实验中刺激CESCs/CEPCs增殖 |
| 2.4.2 TβR-I抑制剂处理的连续传代CECs的标记物分析 |
| 2.4.3 TβR-I抑制剂上调ID1 的表达并增加细胞进入合成期的比率 |
| 2.4.4 持续给予TβR-I抑制剂的CECs能够在ALI培养条件下形成复层、3D培养条件下形成球体和2D培养条件下愈合创伤 |
| 3 分析与讨论 |
| 3.1 体外培养过程中TβR-I抑制剂能促进原代细胞中CESCs/CEPCs扩增 |
| 3.2 本研究中使用的无血清无滋养层原代角膜上皮细胞培养体系的特征 |
| 3.3 TGF-β信号通路对角膜上皮细胞增殖分化的调控 |
| 3.4 角膜上皮细胞内源性释放的TGF-β可能激活机制的探讨 |
| 3.5 将ID1作为角膜上皮干细胞标志物的探讨 |
| 3.6 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 综述 TGF-β信号通路与眼部疾病 |
| 引言 |
| 1 TGF-β的结构、功能和调控 |
| 2 TGF-β信号通路与眼部疾病的诊疗 |
| 结束语 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（3）三角帆蚌Smads基因的表达及对创伤修复的探究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 第一章 综述 |
| 1.1 引言 |
| 1.2 TGF-β/Smad研究背景 |
| 1.2.1 TGF-β/Smad信号通路 |
| 1.2.2 TGF-β超家族 |
| 1.2.3 TGF-β受体超家族 |
| 1.2.4 Smads基因结构 |
| 1.3 TGF-β/Smad研究进展 |
| 1.3.1 Smads基因的亚细胞定位调控 |
| 1.3.2 TGF-β/Smad对创伤修复的调控 |
| 1.3.3 TGF-β/Smad与疾病的相关性 |
| 1.4 Smads在水生动物中的研究进展 |
| 1.5 研究目的及意义 |
| 第二章 三角帆蚌Smads基因的表达及对创伤修复的探究 |
| 2.1 前言 |
| 2.2 材料与方法 |
| 2.2.1 实验材料 |
| 2.2.2 菌种和载体 |
| 2.2.3 实验试剂 |
| 2.2.4 主要仪器 |
| 2.2.5 引物 |
| 2.2.6 特异小RNA干扰序列 |
| 2.2.7 总RNA的提取 |
| 2.2.8 三角帆蚌SMART c DNA的合成 |
| 2.2.9 三角帆蚌Smad3和Smad4基因的克隆 |
| 2.2.10 HcSmad3和HcSmad4基因的生物信息学分析 |
| 2.2.11 RT-PCR检测HcSmad3和HcSmad4基因的组织特异性表达 |
| 2.2.12 RNA干扰实验 |
| 2.2.13 抑制剂阻断实验 |
| 2.2.14 组织学染色 |
| 2.2.15 HcSmad3和HcSmad4基因的原核表达和纯化 |
| 2.2.16 Hcsmad4多克隆抗体的制备 |
| 2.2.17 Western Blot检测HcSmad4在三角帆蚌组织中的表达 |
| 2.3. 结果 |
| 2.3.1 总RNA的提取 |
| 2.3.2 三角帆蚌HcSmad3和HcSmad4基因全长的克隆 |
| 2.3.3 三角帆蚌HcSmad3和HcSmad4基因的c DNA序列及推导的氨基酸序列 |
| 2.3.4 HcSmad3和HcSmad4推导的氨基酸序列比对 |
| 2.3.5 HcSmad3和HcSmad4基因的系统进化分析 |
| 2.3.6 HcSmads基因的组织表达 |
| 2.3.7 嗜水气单胞菌和肽聚糖刺激后HcSmad3和HcSmad4基因的表达量 |
| 2.3.8 HcSmad3和HcSmad4 RNA干扰效率的测定 |
| 2.3.9 敲低HcSmad3和HcSmad4以及抑制HcSmad3表达后靶基因的表达量 |
| 2.3.10 组织形态学观察创伤修复过程 |
| 2.3.11 HcSmad3和HcSmad4基因的原核表达和纯化 |
| 2.3.12 HcSmad4基因的原核表达和纯化 |
| 2.3.13 Western blot检测HcSmad4的多克隆抗体 |
| 2.4 讨论 |
| 2.5 结论与展望 |
| 2.5.1 结论 |
| 2.5.2 研究展望 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
（4）靶向TGF-β1的治疗性基因重组抗体药物研发及表征（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第1章 引言 |
| 1.1 TGF-β概述 |
| 1.2 功能 |
| 1.3 TGF-β在肿瘤中的作用方式以及相关疾病 |
| 1.3.1 TGF-β在肿瘤环境中的具体作用形式 |
| 1.3.2 TGF-β第一重身份:肿瘤抑制剂 |
| 1.3.3 TGF-β第二重身份:肿瘤促进剂 |
| 1.3.3.1 间充质转化在肿瘤侵袭和转移过程中的作用 |
| 1.3.3.2 间充质转化会使癌细胞表现出干细胞的一些特性 |
| 1.3.3.3 逃避免疫监视和极化骨髓细胞 |
| 1.3.4 TGF-β相关疾病 |
| 1.4 治疗药物概述 |
| 1.4.1 配体陷阱-抗体类药物、Fc融合蛋白类药物 |
| 1.4.2 反义寡核苷酸 |
| 1.4.3 小分子受体激酶抑制剂 |
| 1.4.4 寡肽核苷酸适配子 |
| 1.4.5 接种疫苗 |
| 1.4.6 临床数据:配体陷阱 |
| 1.5 目前靶向TGF-β抗体药物的研究进展 |
| 1.6 存在的问题以及课题研究意义 |
| 1.7 技术路线 |
| 第2章 两个TGF-β1 抗体分子的活性评价与筛选 |
| 2.1 引言 |
| 2.2 实验材料 |
| 2.2.1 抗体序列发现以及基因合成 |
| 2.2.2 载体质粒 |
| 2.2.3 材料 |
| 2.2.4 各种试剂的配制 |
| 2.2.5 仪器 |
| 2.3 实验方法 |
| 2.3.1 构建质粒 |
| 2.3.2 标准DH5α感受态的制备流程 |
| 2.3.3 质粒的重组反应 |
| 2.3.4 质粒的转化流程 |
| 2.3.5 质粒的小量提取及测序鉴定 |
| 2.3.6 质粒的大量提取 |
| 2.3.7 悬浮HEK293F细胞瞬转表达抗体蛋白 |
| 2.3.7.1 质粒无菌处理 |
| 2.3.7.2 悬浮HEK293F细胞培养以及传代 |
| 2.3.7.3 HEK293F细胞转染 |
| 2.3.7.4 抗体的收集与纯化 |
| 2.3.8 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) |
| 2.3.9 HPLC高效液相色谱检测抗体聚集情况 |
| 2.3.10 DSC差示扫描量热法测量抗体热稳定性 |
| 2.3.11 Octet生物分子相互作用仪检测抗体亲和力以及结合表位 |
| 2.3.12 抗原抗体的结合曲线以及竞争结合曲线 |
| 2.3.13 HT-2 细胞中和实验 |
| 2.4 实验结果讨论与分析 |
| 2.4.1 大提质粒的酶切验证 |
| 2.4.2 悬浮HEK293F细胞瞬转表达抗体蛋白的纯化与鉴定 |
| 2.4.3 HPLC-SEC检测抗体的聚集以及降解情况 |
| 2.4.4 DSC差示扫描量热法检测抗体热稳定性 |
| 2.4.5 Octet检测抗体的亲和力以及结合表位 |
| 2.4.6 抗体在ELISA水平的结合实验以及阻断实验 |
| 2.4.7 HT-2 细胞中和实验 |
| 2.5 本章小结 |
| 第3章 TGF-β1 抗体分子的改造 |
| 3.1 引言 |
| 3.2 实验材料 |
| 3.2.1 材料 |
| 3.2.2 各种试剂的配制 |
| 3.2.3 仪器 |
| 3.3 实验方法 |
| 3.3.1 Kappa chain shuffling噬菌体文库的构建 |
| 3.3.1.1 PCR扩增LY-2382770 重链基因 |
| 3.3.1.2 噬菌体载体质粒小提 |
| 3.3.1.3 质粒连接以及电转 |
| 3.3.2 噬菌体文库的淘选 |
| 3.3.2.1 第一轮噬菌体扩增 |
| 3.3.2.2 免疫磁珠淘选 |
| 3.3.2.3 阳性克隆检测 |
| 3.3.3 单点Phage ELISA以及70°C高温筛选目标分子 |
| 3.4 实验结果讨论与分析 |
| 3.4.1 PCR扩增LY-2382770 抗体重链Vh基因 |
| 3.4.2 PCR鉴定文库的插入率 |
| 3.4.3 阳性克隆的检测 |
| 3.4.4 单点噬菌体酶联免疫反应以及70°C高温筛选目标分子 |
| 3.5 本章小结 |
| 第4章 TGF-β1 抗体目标分子的体外表征 |
| 4.1 引言 |
| 4.2 实验材料 |
| 4.2.1 抗体序列发现以及基因合成 |
| 4.2.2 载体质粒 |
| 4.2.3 材料 |
| 4.2.4 各种试剂的配制 |
| 4.2.5 仪器 |
| 4.3 实验方法 |
| 4.3.1 构建质粒 |
| 4.3.2 标准DH5α感受态的制备流程 |
| 4.3.3 质粒的重组反应 |
| 4.3.4 质粒的转化 |
| 4.3.5 质粒的小量提取及测序鉴定 |
| 4.3.6 质粒的大量提取 |
| 4.3.7 悬浮HEK293F细胞瞬转表达抗体蛋白 |
| 4.3.7.1 质粒无菌处理 |
| 4.3.7.2 悬浮HEK293F细胞培养以及传代 |
| 4.3.7.3 HEK293F细胞转染 |
| 4.3.7.4 抗体的收集与纯化 |
| 4.3.8 十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) |
| 4.3.9 DSF差示扫描荧光法测量抗体热稳定性 |
| 4.3.10 抗原抗体的结合曲线、中和曲线以及抗体表位鉴定 |
| 4.3.11 HT-2 细胞中和实验 |
| 4.3.12 A549 细胞中和实验 |
| 4.4 实验结果讨论与分析 |
| 4.4.1 大提质粒的酶切验证 |
| 4.4.2 悬浮HEK293F细胞瞬转表达抗体蛋白的纯化与鉴定 |
| 4.4.3 基于DSF原理的抗体热稳定检测 |
| 4.4.4 抗体在ELISA水平的结合和阻断实验以及表位鉴定 |
| 4.4.5 HT-2 细胞中和实验 |
| 4.4.6 A549 细胞中和实验 |
| 4.5 本章小结 |
| 第5章 结论与展望 |
| 5.1 结论 |
| 5.2 进一步工作的方向 |
| 致谢 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 综述 |
| 参考文献 |
（5）Transforming growth factor-β in stem cells and tissue homeostasis（论文提纲范文）
| INTRODUCTION |
| TEMPORAL AND SPATIAL ACTIVATION OF TGF-βIS ESSENTIAL FOR TISSUE HOMEOSTASIS |
| Latent TGF-βs are deposited in ECM upon secretion |
| Latent TGF-βs are activated by various pathways in vivo |
| Active TGF-βs bind specific receptors to elicit downstream signaling |
| Active TGF-βs induce migration of mesenchymal stem cells |
| Context-dependent TGF-βsignaling balances stem cells selfrenewal and differentiation |
| Inhibition of TGF-βenhances reprogramming of somatic cells |
| TGF-βIS THE MAJOR COUPLER OF BONE RESORPTION TO FORMATION |
| Bone remodeling is the driving force for the evolution of the terrestrial skeleton |
| Mesenchymal stem cells are recruited by bone matrix TGF-βto couple bone resorption and formation |
| Bone remodeling dynamically changes the bone marrow microenvironment |
| PTH serves as endocrine regulator of skeletal TFG-βto control bone homeostasis in terrestrial vertebrates |
| ABERRANT TGF-βSIGNALING LEADS TO MULTIPLE PATHOLOGIES |
| TGF-β-induced osteoid islets in the subchondral bone initiate osteoarthritis |
| Genetic mutations in TGF-βsignaling components cause boneassociated disorders |
| Sustained TGF-βactivation results in organ fibrosis |
| Bone matrix-derived TGF-βpromotes skeletal metastases |
| MODULATION OF TGF-βSIGNALING IS PROMISING FOR THE TREATMENT OF DISORDERS ASSOCIATED WITH TGF-β ABNORMALITIES |
| TGF-β-modulation has shown significant clinical potential |
| CONCLUSION |
（6）肾络通调控Smads信号通路抑制肾间质纤维化的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 引言 |
| 第一部分 肾络通对肾间质纤维化大鼠肾脏组织形态学的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第二部分 肾络通对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF-β1、CTGF的表达的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 肾络通对肾间质纤维化大鼠肾脏Smads信号通路的影响 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 附图 |
| 附表 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 综述 TGF-β1/Smads信号通路在肾间质纤维化发生发展过程中的作用研究 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）MUC1通过转变TGF-β抑癌信号促进肝癌发展的作用及分子机制（论文提纲范文）
| 提要 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 第1章 文献综述 |
| 1.1 MUC1 是癌基因 |
| 1.1.1 Mucin 家族 |
| 1.1.2 MUC1 的分布和结构 |
| 1.1.3 MUC1 的信号传导通路及其癌基因作用 |
| 1.2 TGF-β与癌症 |
| 1.2.1 Smad 依赖途径 |
| 1.2.2 Smad 非依赖途径 |
| 1.2.3 常规与非常规 Smad 途径 |
| 1.2.4 TGF-β与肝癌 |
| 1.3 JNK 在癌症发展中的作用 |
| 1.3.1 JNK 与癌症 |
| 1.3.2 JNK 在肝脏疾病和肝癌发生发展中的作用 |
| 1.3.3 靶向 JNK 的治疗策略 |
| 1.4 肝癌的研究现状 |
| 1.5 本课题主要研究目的、内容及特色 |
| 1.5.1 研究目的 |
| 1.5.2 研究内容 |
| 1.5.3 本课题的特色 |
| 第2章 MUC1 基因沉默与过表达肝癌细胞系的建立 |
| 2.1 材料与方法 |
| 2.1.1 实验材料 |
| 2.1.2 实验方法 |
| 2.1.3 统计学分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 MUC1 基因沉默肝癌细胞系的鉴定 |
| 2.2.2 MUC1 过表达肝癌细胞系的建立 |
| 2.2.3 MUC1 表达对肝癌细胞增殖的影响 |
| 2.3 讨论 |
| 小结 |
| 第3章 MUC1 通过激活 JNK/AP1 途径诱导自分泌 TGF-β信号 |
| 3.1 材料与方法 |
| 3.1.1 实验材料 |
| 3.1.2 实验方法 |
| 3.1.3 统计学分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 MUC1 通过诱导 TGF-β分泌调控 TGF-β信号 |
| 3.2.2 MUC1 通过激活 JNK/AP1 途径诱导自分泌 TGF-β信号 |
| 3.2.3 MUC1 直接结合并激活 JNK |
| 3.2.4 外源性 TGF-β信号对 JNK 活化的影响 |
| 3.2.5 MUC1 诱导的自分泌 TGF-β信号促进肝癌细胞迁移 |
| 3.2.6 TGF-β基因沉默对 MUC1 诱导的自分泌 TGF-β信号的影响 |
| 3.3 讨论 |
| 小结 |
| 第4章 MUC1 通过激活 JNK 转变 TGF-β抑癌信号促进肝癌细胞增殖 |
| 4.1 材料和方法 |
| 4.1.1 实验材料 |
| 4.1.2 实验方法 |
| 4.1.3 统计学分析 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 MUC1 在肝癌细胞中的表达抑制 p-Smad3C/p21 信号，激活p-Smad3L (Ser-213)/c-Myc 信号 |
| 4.2.2 JNK 抑制剂抑制 p-Smad3L/c-Myc 信号，激活 p-Smad3C/p21 信号 |
| 4.2.3 外源性 TGF-β信号对 MUC1 诱导的 Smad3 信号的转变没有影响 |
| 4.2.4 裸鼠皮下移植瘤组织 MUC1、TGF-β信号与 p-JNK 表达的相关性分析 |
| 4.2.5 临床肝癌病人肿瘤组织 MUC1、TGF-β信号与 p-JNK 表达的相关性分析 |
| 4.3 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 作者简介及在学期间所取得的科研成果 |
| 致谢 |
（8）前列腺癌:亟待肿瘤标志物和治疗新靶点（英文）（论文提纲范文）
| 1 Introduction |
| 2 Biology of prostate cancer |
| 2.1 Prostate cancer precursors |
| 2.2 Underlying prostate cancer development and metastasis formation |
| 2.3 Cell signaling pathways in prostate cancer |
| 2.3.1 Androgens |
| 2.3.2 Estrogens |
| 2.3.3 TGF-β |
| 2.3.4 IGF-1 and PI3K/Akt |
| 2.3.5 Other cell signalings |
| 2.3.6 Phosphatases: essential regulators of cell signaling |
| 3 Conventional diagnosis and monitoring of prostate cancer |
| 4 Emerging biomarkers: new tools to improve prostate cancer diagnosis and management |
| 5 Current options and challenges in prostate cancer treatment |
| 6 Future directions |
| Compliance with ethics guidelines |
（9）粉防己碱干预增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β/Smad信号转导通路的分子机制（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 前言 |
| 参考文献 |
| 第一章 人增生性瘢痕成纤维细胞的改良培养、鉴定和粉防己碱浓度筛选 |
| 引言 |
| 1.1 实验材料 |
| 1.2 实验方法 |
| 1.3 结果 |
| 1.4 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 第二章 粉防己碱抑制人增生性瘢痕成纤维细胞TGFB/SMAD信号通路体外实验 |
| 引言 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.3 结果 |
| 2.4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第三章 粉防己碱对SMAD7沉默增生性瘢痕成纤维细胞SMADS信号通路的干预作用 |
| 引言 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.3 结果 |
| 3.4 讨论 |
| 参考文献 |
| 第四章 基因芯片检测粉防己碱干预前后增生性瘢痕成纤维细胞相关基因表达谱的变化 |
| 引言 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.3 结果 |
| 4.4 讨论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 缩写词简表 |
| 致谢 |
| 博士研究生期间发表论文情况 |
| 统计学审稿证明 |
（10）Transforming growth factor-β and smooth muscle differentiation（论文提纲范文）
| TGF-βSIGNALING TRANSDUCTION |
| TGF-βSIGNALING IN SMOOTH MUSCLE DIFFERENTIATION DURING EMBRYONIC DEVELOPMENT |
| MOLECULAR MECHANISMS OF TGF-β-INDUCED SMC DIFFERENTIATION |
| TCE/KLF4/KLF5 |
| SBE/Smad signaling |
| CAr G/SRF and myocardin |
| TGF-βand notch signaling |
| Micro RNA |
| TGF-βIN SMC-RELATED DISEASES |
| Atherosclerosis |
| Congenital heart diseases |
| Thoracic aortic aneurysms and dissections |
| Hypertension |
| Hereditary hemorrhagic telangiectasia |
| CONCLUSION |
四、Effects of antisense transforming growth factorβreceptor -Ⅰ (TβRⅠ )expressing plasmid on pig serum-induced rat liver fibrosis（论文参考文献）
- [1]转化生长因子-β2反义寡核苷酸的微生物疫苗及肿瘤疫苗的佐剂作用[D]. 涂丽裙. 吉林大学, 2020(03)
- [2]TGF-β信号通路对角膜上皮干/祖细胞增殖分化功能的调控[D]. 胡丽华. 华中科技大学, 2020
- [3]三角帆蚌Smads基因的表达及对创伤修复的探究[D]. 李振芳. 南昌大学, 2019(02)
- [4]靶向TGF-β1的治疗性基因重组抗体药物研发及表征[D]. 费忠伟. 南昌大学, 2018(03)
- [5]Transforming growth factor-β in stem cells and tissue homeostasis[J]. Xin Xu,Liwei Zheng,Quan Yuan,Gehua Zhen,Janet L.Crane,Xuedong Zhou,Xu Cao. Bone Research, 2018(01)
- [6]肾络通调控Smads信号通路抑制肾间质纤维化的机制研究[D]. 黄东华. 河北医科大学, 2016(08)
- [7]MUC1通过转变TGF-β抑癌信号促进肝癌发展的作用及分子机制[D]. 李琼书. 吉林大学, 2015(08)
- [8]前列腺癌:亟待肿瘤标志物和治疗新靶点（英文）[J]. Juliana FELGUEIRAS,Joana Vieira SILVA,Margarida FARDILHA. Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）, 2014(01)
- [9]粉防己碱干预增生性瘢痕成纤维细胞TGF-β/Smad信号转导通路的分子机制[D]. 林尊文. 南方医科大学, 2012(09)
- [10]Transforming growth factor-β and smooth muscle differentiation[J]. Xia Guo,Shi-You Chen,Department of Physiology and Pharmacology,University of Georgia,Athens,GA 30602,United States. World Journal of Biological Chemistry, 2012(03)