尿毒症患者精子形态特征的扫描电镜观察

尿毒症患者精子形态特征的扫描电镜观察

一、Scanning Electron Microscopic Observation on Morphologic Characteristics of Sperms in Uremic Patients(论文文献综述)

燕卫星[1](2021)在《血液透析用双层混合基质膜的制备及性能研究》文中指出全球有超过200万终末期肾病(ESRD)患者依靠维持性血液透析延长生命,传统血液透析虽然提高了患者的生存率,但是间歇性的透析治疗效果不佳,治疗过程中还限制了患者的自由,因此它并不是完美的治疗方案。将传统血液透析设备微型化制作可穿戴人工肾(WAK)是新的发展方向,WAK可以更好的模拟人体肾脏的功能,通过频繁持续的透析进一步提高ESRD患者的生活质量,为患者带来更多的自主权。传统血液透析对中分子毒素清除率低,微型WAK设备也面临着相同的问题,同时WAK还需要高效的透析液净化系统及时清除透析液中的毒素。本研究分别将羟基磷灰石(HAP)与天然火山泥引入分离膜中,制备双层混合基质膜,PES/HAP双层混合基质膜应用在透析器中结合扩散与吸附作用提高中分子毒素的清除率,PES/火山泥双层混合基质膜应用在透析液循环系统中清除透析液中的毒素。通过十六烷基三甲氧基硅烷对HAP进行疏水改性,通过控制反应时间制备了g-HAP-4和g-HAP-12。将它们分别共混到PES下层铸膜液中,通过相转化法制备双层混合基质膜。PES/HAP,PES/g-HAP-4和PES/g-HAP-12双层混合基质膜对溶菌酶的静态吸附量逐渐增加分别为4.9 mg/g,6.7 mg/g和8.4 mg/g。在模拟透析实验中,PES/g-HAP-12双层混合基质膜对溶菌酶的清除率达到58.4%,相较于单层膜对溶菌酶40.6%的清除率有明显的提升。单层膜与双层膜的上层都是由PES与PVP组成,PVP赋予了膜良好的亲水性,所有膜都表现出良好的血液相容性。火山泥对尿素与溶菌酶具有较强的吸附能力,通过测试发现火山泥中不含有对人体有害的Pb,Hg,Cd等重金属元素,所以火山泥可以作为透析液净化的吸附材料。将不同质量火山泥共混到下层铸膜液中,通过相转化法制备的三种PES/火山泥双层混合基质膜中火山泥含量分别为29.6 wt%,37.3 wt%和46.6 wt%。火山泥负载量最高的膜吸附性能是最佳的,在静态吸附实验中,它对尿素和溶菌酶的吸附量分别为0.120 mg/cm2和0.055 mg/cm2;在超滤吸附实验中,它对尿素和溶菌酶的吸附量分别为0.205 mg/cm2和0.241 mg/cm2。

代云志[2](2020)在《基于飞秒激光诱导纳米粒子沉积的气体微传感器研究》文中指出近年来随着微电子、微加工技术的迅速发展,气体微传感器的研究引起极大关注。气体微传感器由于小型化,低功耗,可集成化等优点,其在实时的监控和探测方面表现出明显的优势。气体微传感器应用需求广泛,尤其是电子鼻、可穿戴设备、可吞食电子胶囊等微型设备的开发需要兼容、集成传感性能良好的气体微传感器。随着科学技术的发展,越来越多的微加工手段被提出用于制备气体微传感器,其传感性能也随之不断地提升。尽管利用化学气相沉积法、静电纺丝法、光刻图案化纳米线电沉积法等手段能够制备出传感性能良好的气体微传感器,但是各自制备手段的缺点同时也制约着气体微传感器的发展。目前气体微传感器面临的问题主要包括:(1)材料选择的局限性,微结构需要依据材料生长机制或微成型条件而采用一定的方法制备,通常只适用于某种特定材料,缺乏材料的普遍适用性;(2)微结构欠缺灵活性,微结构的无规则沉积或者大面积刻蚀过程都将导致微器件的设计性和定位性差,难以应用于多功能集成;(3)工艺兼容性差,由于依赖特定的制备条件和微结构特点,难以满足与传统CMOS工艺兼容而形成多功能集成传感芯片;(4)化学试剂污染,由于传统方法在制备和设计微结构过程中常常伴随着化学助剂、金属催化剂和掩膜版的使用导致微传感器易受到化学污染。针对上述问题,本论文提出利用材料选择范围广、灵活性高、CMOS工艺兼容、无需掩膜版和化学助剂、编程可控的激光诱导沉积技术制备气体微传感器。以人体胃肠道内存在的三种气体氨气(NH3)、氢气(H2)和乙醇(C2H5OH)为目标探测气体,分别选择三种纳米粒子:钯掺杂水合氧化钨(Pd-WO3·xH2O)、钯(Pd)、氧化锌(ZnO)为气体敏感材料,通过激光诱导沉积加工手段,制备了性能良好的气体微传感器。主要成果如下:1.制备了单根Pd-WO3·xH2O微米线NH3微传感器,实现快速、低检测限的NH3检测。实现激光诱导多种金属氧化物精确、灵活、编程可控沉积于衬底上,为微传感器的制备提供了一种可行的策略。25℃下Pd-WO3·xH2O微米线传感器对NH3有较好的选择性,调节该微米线长度可以实现对50 ppm NH3超快响应恢复(1.4 s/3.3 s)和1 ppm的低检测限。该微米线长度越大,传感器对目标气体的响应越大。2.制备了单根Pd微米线H2微传感器,实现低检测限、宽检测范围的H2传感。通过超声波辅助一步溶液合成法制备出分散性良好Pd纳米粒子,利用激光诱导沉积Pd纳米粒子制备微米线传感器,其具有H2传感性质。单根Pd微米线传感器对H2的传感呈现出两种传感机制,分别为PdHx的形成和晶格膨胀调控微米线电导率。实现室温下低检测限1.4ppm,宽检测范围0.001%-4.0%的H2传感。3.制备了ZnO纳米线阵列结构微米线气体微传感器,实现快速、高响应、低检测限的C2H5OH传感。激光诱导ZnO纳米粒子沉积,实现ZnO纳米粒子在衬底上图案化布种。进一步以沉积的ZnO纳米粒子作为晶种,经过溶液生长获得基于ZnO纳米线阵列的微结构。通过调节激光加工功率、溶液中生长时间对纳米线的形貌进行优化,在适当功率下(约14-17mW)加工ZnO纳米粒子形成表面粗糙、多孔状、堆积形貌的ZnO微结构并在溶液中生长2.5 h才能形成形貌良好的ZnO纳米线结构。所制备的ZnO纳米线阵列结构微米线具有良好的C2H5OH传感能力,实现在300℃下,80 ppm C2H5OH中快速响应恢复14.4 s/14.5 s,高响应12%和低检测限10 ppm。

朱雅东[3](2020)在《血液净化用纳米纤维复合膜和复合微球的构建及其对生物毒素的清除机制》文中提出肾脏病是全球高发病率、高死亡率的疾病之一。肾移植技术因供体严重缺乏而受到极大限制,血液净化技术成为了目前治疗肾脏疾病患者的主要手段。目前血液净化技术中应用最广的就是血液透析、血液灌流或将二个技术联用。血液透析的核心部件是透析膜,但目前透析膜对毒素尤其对中等分子毒素的去除效率低,不够令人满意。目前临床对中分子毒素清除最高的治疗方式就是血液灌流,其对中分子毒素的清除优于血液透析,多与血液透析联合治疗肾衰竭。因此开发具有更高效清除毒素的高性能血液透析膜和新型高效吸附剂是改善肾衰竭患者生存质量的当务之急。近年来,纳米纤维复合膜作为应用于血液透析的一种新型高分子血液透析膜,它是由超薄功能分离层与纳米纤维多孔支撑层复合而成。超薄的亲水分离皮层通过涂覆法制备,由于水凝胶涂覆窗口比较窄,导致其网格尺寸调控困难,限制了纳米纤维复合膜在血液透析效率上的进一步提高。此外,目前应用于血液灌流的吸附材料比较单一,寻求对尿毒症毒素具有特异性吸附的新型纳米材料,将血液透析和血液灌流二者协同运作,构筑新型透析/吸附双功能血液净化用便携式人工肾器件对延长肾衰竭患者的寿命至关重要,同时也是血液净化领域目前比较具有深远意义的重要探索。在此,静电纺丝技术制备的聚丙烯腈(PAN)膜作为多孔基膜,亲水性聚乙烯醇(PVA)作为超薄功能分离层主体材料,通过涂覆法在PAN纳米纤维多孔基膜表面制备超薄功能分离层。通过对PVA本体改性和在功能皮层上自组装来调节水凝胶皮层网格尺寸大小,以及在水凝胶功能皮层中构建更多的纳米传输通道,系统研究了水凝胶功能皮层改性前后亲水性的变化以及抗污性能,同时还研究了作为血液接触材料的复合膜的生物相容性。深入分析研究了具有不同网格尺寸的水凝胶皮层对尿毒症毒素清除效率的影响,从而获取了最优化的血液净化用纳米纤维复合膜,实现了通过对水凝胶皮层的调控来优化透析效率的方案。此外,为了将血液透析和血液灌流二者协同运作,通过冷冻铸造的技术制备明胶/金属有机框架复合微球作为血液灌流的吸附材料,研究其对生物毒素的吸附性能,为便携式“人工肾”的构建打下基础。研究内容包括:(1)选用共混磺化聚乙烯醇(s-PVA)和纯PVA作为水凝胶涂覆溶液,通过涂覆技术将其涂覆在由静电纺丝技术制备的PAN纳米纤维支撑层上。通过改变s-PVA与PVA的共混质量比来调节s-PVA/PVA水凝胶功能皮层的网格尺寸大小。优化后的s-PVA/PVA TFNC超滤膜(S-P-TFNC-1-3)的网格尺寸为7.5 nm,其在0.1 MPa压力下具有380 L m-22 h-1的纯水通量,同时能截留超过90%的牛血清蛋白(BSA)。此外,s-PVA引入到水凝胶阻隔层提高了s-PVA/PVA TFNC膜的亲水性,从而使其具有很好的抗污能力。同时由于s-PVA的结构类似于肝素,因此改性后的复合膜的生物相容性也得到明显改善,具体表现为蛋白质吸附的减少、凝血时间的延长、血小板粘附的抑制、溶血率的降低以及细胞在膜表面生长繁殖良好。优化后的S-P-TFNC-1-3膜在4 h透析后能清除84.2%的尿素和60.9%的溶菌酶,尤其对中分子尿毒症毒素的去除效果(60.9%)明显优于目前报道的常规血液透析膜,同时对人体有益的大分子蛋白的保留率能达到95%以上。(2)结合静电纺丝技术和涂覆技术制备纯PVA薄层纳米纤维复合(TFNC)膜,在PVA TFNC膜上通过层层自组装(LBL)技术交替自组装丹宁酸(TA)和聚磺酸甜菜碱(PSBMA),最外层为两性离子的PSBMA层。自组装后的膜的表面化学结构和形貌表征证实了膜表面两性离子自组装改性的成功。由于在水凝胶皮层上的自组装,导致PVA水凝胶的网格尺寸变小。通过调控自组装TA/PSBMA双层的数目来调节水凝胶的网格尺寸,使得LBL膜既能用于蛋白质的分离又能用于更小尺寸染料分子的分离。特别是当TA/PSBMA双分子层数为6时,PVA-6BL-M在0.6 MPa时过滤0.1 g/L的直接红80溶液渗透通量可达311.7 L m-22 h-1,同时对直接红的截留能达到99.9%。此外,由于两性离子的PSBMA能与水形成超亲水的水化层,使得LBL膜具有优秀的抗生物污染性能,如:BSA吸附少、水通量恢复率高、大肠杆菌和葡萄球菌黏附减少等。同时LBL膜具有良好的血液相容性,具体表现在血小板粘附的减少、凝血时间的延长和溶血率的降低。最后,LBL膜在血液透析过程中对中小分子的毒素清除效率与目前报道的血液透析膜的清除效率相当,但LBL膜在透析过程中几乎没有损失人体有益的蛋白,这是明显优于目前透析膜的。(3)受生物大分子及其组装体在仿生构建新型纳米通道的启发,首次将硫化丝素蛋白分子通过自组装技术制备了硫化丝素蛋白纳米线(SSNFs),并将其与PVA水凝胶相结合,涂覆在静电纺丝制备的PAN纳米纤维支撑层上,制备了新型血液透析用PVA/SSNFs/PAN TFNC膜。SSNFs引入到PVA水凝胶皮层后,PVA基质和SSNFs之间纳米间隙的形成为水和尿毒症毒素快速通过功能皮层提供了更多的纳米传输通道,从而使PVA/SSNFs TFNC血液透析滤膜具有较高的中分子毒素清除效率,如PVA/SSNFs-5可清除65.7%的溶菌酶,对尿素的清除率可达85.0%,同时可保留94.7%的人体有益蛋白。此外,仿生SSNFs的引入也增强了PVA/SSNFs TFNC膜的血液相容性,这是由于硫酸化丝素蛋白具有类似肝素的结构。该仿生组装路线为水凝胶中纳米通道的构建提供了一条绿色且高效的途径。(4)相比于单一的血液透析,血液灌流对中分子毒素的清除优于血液透析,且多与血液透析联合应用治疗肾衰竭。我们成功合成了八面体结构的金属有机框架UiO-66和UiO-66-NH2粒子,其直径范围在200至300 nm,然后将其与明胶溶液共混后通过注射器一滴一滴地滴入液氮中,立即将其真空冷冻干燥,干燥好的微球浸泡于多巴胺水溶液中进行交联,从而形成稳定的水凝胶复合微球。此微球内部具有类似“蜂巢”的结构,含有大量的微孔且孔的大小很均匀,同时蜂巢壁的厚度也较均匀。以明胶为主体的复合微球具有很好的抗凝血能力,同时对肾衰竭患者体内的中、小分子毒素具有很好的吸附效果,同时对肝功能衰竭患者体内过多的胆红素也具有优秀的吸附能力。以上说明此多孔吸附微球在血液灌流上展现出巨大的应用潜力,为便携式人工肾的构建提供了良好的吸附材料。以上系列研究表明,对血液净化用复合膜功能皮层的调控和改性,制备出抗污且生物相容性良好的膜,同时对水凝胶皮层网格尺寸的优化,设计出高透析效率的血液透析膜,再构筑对毒素高吸附的水凝胶微球,有望将透析和吸附联用,制备出双功能透析/吸附用的可穿戴便携式“人工肾”器件。

袁志鹏[4](2020)在《静电纺纤维材料的结构调控及其在生物医学领域的应用》文中提出静电纺丝是一种用于制备直径为微纳米级别的纤维材料的高度通用技术。静电纺纤维材料具有极高的比表面积,孔隙互相连通的多孔结构和可调节的纤维形貌。这些特性使静电纺纤维材料具备了一系列理想性能,可以满足各种先进的生物医学应用需求。在本文中,我们构建了多种适用于血液净化、肿瘤治疗、伤口消毒和伤口渗出液管理等不同生物医学应用的静电纺纤维材料,主要内容如下:1、我们通过将静电纺丝与气体发泡技术相结合的方法制备了一种三维纳米纤维海绵,并将牛血清白蛋白(BSA)分子和氨基基团固定在纤维表面作为吸附胆红素的亲和基团用于血液中过量胆红素的快速高效吸附。由于纳米纤维海绵具有层状的三维结构,相比与二维的纤维膜有更高的孔隙率。特殊的三维结构使海绵与吸附液体的接触更加充分,有效减小了粘性基团与胆红素间的扩散距离,从而提高了海绵的吸附速度。固定了 BSA的纳米纤维海绵在水溶液和血浆中的最大吸附量能分别达到36.824 mg/g和25.291mg/g。并且可以在60分钟内达到吸附平衡,有较快的吸附速度。另外,纳米纤维海绵还表现出了良好的生物相容性和血液相容性,是一种优异的血液灌流吸附剂。2、我们将“breath figure”机理与静电纺丝技术结合制备了单根纤维具有多孔结构的纤维膜。并通过在多孔纳米纤维中掺杂CuS纳米粒子并在孔隙中负载化疗药物得到了可控的局部药物递送系统。它可以实现黑色素瘤的药物-光热协同治疗。纤维表面的多孔结构可以显着提高其负载药物的能力。由于药物负载于纤维表面的孔隙中,因此在治疗期间可以更加彻底地释放药物。该复合膜在体外对黑素瘤细胞的杀伤效率能够达到76%。并在活体实验中有效抑制肿瘤生长。此外,纤维膜可以通过释放铜离子促进皮肤的血管化,进而促进皮肤伤口的愈合。因此,这项工作通过单一体系实现了皮肤肿瘤的治疗和正常皮肤组织的修复。3、我们首先通过静电纺丝技术制备了掺杂ZIF-8衍生碳纳米粒子的亲水性纳米纤维膜,再通过气体发泡技术使纤维膜膨胀得到了一种新型的具有层状结构的纳米纤维海绵伤口敷料。该敷料可以通过化学-光热协同疗法有效地杀死细菌。在体外对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抗菌效率分别能达到94.8%和97.4%。同时,亲水性的敷料可以迅速吸收伤口周围的渗出液,并通过自身特殊的层状结构和光热效果使液体挥发速度提高1 1倍以上,有效调节自身的湿度。该敷料在与3T3和JB6细胞共培养实验中表现出良好的生物相容性。除了提供物理支撑和结构信号外,敷料通过有效的感染控制和伤口渗出液管理也促进了复杂的伤口愈合过程。

安凯[5](2020)在《基于魔芋葡甘聚糖的智能分子印迹功能材料的研究》文中指出分子印迹聚合物(MIPs)是一种具有选择性分子识别位点的功能聚合物,而智能分子印迹聚合物是一类可对外部环境刺激如磁场、光照、pH以及温度等具有响应的新型MIPs,因其独特的性能及广泛的应用前景而成为一个国内外研究热点。目前这些材料大多是通过化学合成试剂制备而得,因此生物相容性和生物降解性较差。采用可再生的天然多糖作为主要原料,将天然高分子引入到智能MIPs的构建中,不仅符合当今社会可持续发展的“绿色”理念,而且与全合成材料相比,所制备的材料在生物相容性和降解性及成本方面都具有优势。而将天然多糖-魔芋葡甘聚糖(KGM)作为智能MIPs原料的报道还相对较少,因此本工作将KGM作为基体制备了四种新型智能MIPs。本研究不仅可丰富智能MIPs的种类,同时也可拓宽KGM的研究范围。本文具体包括以下四个部分内容:(1)以KGM为底物、甲基丙烯酸为功能单体、乙二醇二甲基丙烯酸酯为交联剂、尿素为模板分子制备了尿素磁性MIPs。所得的MIPs通过红外光谱(FTIR)、透射电镜(TEM)、X射线衍射(XRD)、热重分析(TGA)和振动样品磁力计(VSM)进行表征。结果表明,所得MIPs具有核/壳结构,且具有高顺磁性,可以容易地通过外部磁场从混合物中分离。此外,还评估了所得MIPs的吸附和识别性能,结果表明MIPs可以特异性识别尿素,在经过三个吸附和洗脱循环后,其识别能力和吸附性能几乎保持不变。MIPs的吸附等温线遵循Langmuir方程,最大吸附量为16.8 mg/g。该产物有望作为一种新型血液净化材料。(2)通过将可控核/壳策略与多糖的接枝共聚相结合,制备并考察了基于KGM的壳层厚度可控的核/壳型磁性敌百虫MIPs。通过改变聚合物前体的剂量,可以在较宽范围内调节核/壳结构的壳厚度。实验发现用聚合物包封的磁性纳米颗粒仍具有较高的磁性,并且容易被外部磁场分离。吸附实验表明,MIPs可以特异性识别和吸附敌百虫,并且具有良好的选择性、重复性和稳定性。MIPs对敌百虫的吸附等温线可通过Langmuir方程拟合。此外,该磁性MIPs已成功应用于实际蔬菜中敌百虫的检测。该环境友好型MIPs特别适合食品样品中农药残留的富集和分离。(3)将热敏单体N-异丙基丙烯酰胺通过接枝共聚引入到KGM主链制备了一种热敏MIPs。结果表明,该产物对抗癌药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)的识别与分离具有热敏性。MIPs在低于临界溶液温度以下的温度下具有出色的吸附能力,并且MIPs能够特异性识别并吸附5-Fu,具有良好的选择性、重复性和稳定性。药物释放实验表明,相同条件下,在25℃时5-Fu的累积释放高于38℃时5-Fu的累积释放量。释放曲线分别用零级、一级和Higuchi动力学方程拟合,结果表明5-Fu的释放符合Fick定律。与非分子印迹聚合物(NIPs)相比,MIPs可以在一定时间内连续释放5-Fu,具有良好的控释效果,表明它们具有良好的药物输送前景。(4)以KGM为基质、丙烯酰胺为功能单体、2-丙烯酰胺基-2-甲基-1-丙烷磺酸为共聚单体、N,N’-亚甲基双丙烯酰胺为交联剂、硝酸铈铵为引发剂、盐酸二甲双胍为模板分子,制备了拉链状热敏MIPs。用FTIR、X射线光电子能谱分析(XPS)、XRD、TGA、扫描电镜(SEM)以及解吸循环伏安法(DCV)对所得的MIPs进行了表征。结果表明,聚丙烯酰胺和聚2-丙烯酰胺基-2-甲基-1-丙烷磺酸之间的相互作用使印迹聚合物具有“开/关”的可切换性,从而使其对温度具有敏感性。改变外部温度,可以控制对靶分子的吸附/解吸。通过静态吸附实验,MIPs可以特异性识别和吸附盐酸二甲双胍,并具有良好的选择性、重复性和稳定性。MIPs的吸附等温线可通过Langmuir方程拟合。该产物有望作为一种新型吸附和分离材料。

李卓恒[6](2020)在《EPO与肾虚雄性生殖功能低下的相关性及右归饮的改善作用》文中研究表明背景中医理论认为,肾主生殖,与“肾精”密切相关。肾精不足,则生殖之精匮乏,导致不育不孕。“肾精”物质基础至今未明。课题组提出“促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)可能是肾精的重要生物物质基础”的假设,并初步验证了“肾精通于脑”、“肾精主骨”、“肾精化气强卫”等方面与EPO的相关性。本研究通过观察三种雄性动物模型(2种肾虚生殖功能低下,1种EPO基因敲除)体内的EPO变化,以及补充外源性EPO或给予补肾益精经典方药对三种雄性动物模型的改善作用及其机制,拟揭示EPO对肾虚雄性生殖功能的影响。从而从生殖的角度证明EPO可能是‘肾精’的重要物质基础,阐释“肾精藏生殖之精”的中医理论。本研究得到国家自然科学基金面上项目(81473549),2018年中央高校基本科研业务费学生项目(XDJK2018D027)的支持。目的1.观察雄性EPO基因敲除小鼠、自然衰老小鼠、肾虚生殖低下大鼠体内EPO的变化,以及外源性rhEPO的逆转作用;2.观察“补肾益精”经典方右归饮对EPO基因敲除小鼠、雄性自然衰老小鼠、肾虚生殖低下大鼠的改善作用,并探讨其作用机制是否与HIF1α-STAT5通路相关;3.拟通过上述试验揭示EPO对肾虚雄性生殖功能的影响。从而从生殖的角度证明“EPO可能是‘肾精’的重要物质基础”,阐释“肾精藏生殖之精”的中医理论。方法与结果1.EPO与肾虚雄性动物生殖功能低下的相关性研究方法:(1)建立EPO基因全身条件性敲除小鼠:本研究设计并委托基因公司定制获得“目标基因锚定鼠EPO(flox/flox)小鼠”和“敲除工具鼠UBC-CreERT2小鼠”,将两种小鼠进行交配,取子鼠进行鉴定,筛选得到“EPO(flox/flox)-CreERT2小鼠”。再选取其中8周龄雄性EPO(flox/flox)-CreERT2子鼠(待EPO基因敲除小鼠)和雄性EPO(flox/flox)小鼠(野生型,WT),均腹腔注射100 mg·kg-1他莫昔芬(执行EPO基因敲除的药物)连续5天,从第6天开始小鼠正常饲养28天,每7天测定小鼠体温、体重,至第34天处死小鼠,取材检测各项指标。其中EPO(flox/flox)-CreERT2小鼠注射他莫昔芬后即成为“EPO基因条件性全身敲除(EPO-KO)小鼠”,检测该小鼠肾脏、睾丸中EPO蛋白表达,计算EPO基因在以上组织的敲除率,判断敲除成功后,用于后续各项试验。(2)复制自然衰老致肾虚雄性生殖功能低下小鼠模型,小鼠正常饲养12个月造模,模型成功判断标准:(1)与青年小鼠相比,每只衰老模型小鼠自主活动、新物体识别、转棒时间显着降低,血清中SOD、T-AOC降低,MDA升高即为衰老模型成功;(2)与青年小鼠均值相比,造模后每只小鼠血清中UREA、CREA升高,ACTH、T、T3或T4降低,即为肾虚模型成功。(3)与青年对照组小鼠均值相比,造模后每只小鼠血清中T、E2、LDH、DHT降低,精子数量减少、精子畸形率升高,即为生殖功能损害模型成功。(4)同时满足上述(1)(2)(3)三个判断标准即为自然衰老小鼠肾虚雄性生殖功能低下模型成功。取自然衰老肾虚雄性生殖功能损害模型成功的小鼠用于后续试验。(3)复制腺嘌呤致肾虚雄性生殖功能低下大鼠模型。雄性SD大鼠随机分为正常组与造模组,造模组用腺嘌呤150 mg·kg-1连续灌胃14天。模型成功判断标准:(1)与正常组大鼠均值相比,造模后每只大鼠血清中UREA、CREA含量升高,ACTH、T、T3或T4含量降低,即为肾虚模型成功。(2)与正常组大鼠均值相比,造模后每只大鼠血清中T、E2、LDH、DHT、FSH降低,精子畸形率升高、数量降低;性行为:骑跨次数、插入次数、射精次数降低,即为生殖功能损害模型成功。(3)同时满足上述(1)(2)两个判断标准即为肾虚雄性生殖功能损害模型成功。取肾虚雄性生殖功能损害模型成功的大鼠用于后续试验。对比检查以上3个动物模型的外观形态,血常规,血清生化指标,脏器病理学,精子数量、畸形率,肾脏、睾丸HIF1α-STAT5通路关键蛋白含量。结果:(1)EPO基因条件性全身敲除小鼠成功建立,具有肾精亏虚证及雄性生殖功能低下的临床表现。EPO基因在EPO基因敲除小鼠肾脏和睾丸中的敲除率分别为77.53%、76.86%。与野生型小鼠相比,EPO基因敲除小鼠毛色变差,出现腹水,体重、体温、摄食量显着减少;肝、脾、肺、肾、脑垂体、睾丸、附睾、前列腺、精囊、脊柱组织形态显着改变;精子数量显着下降、畸形率显着上升,精子外观、内部形态显着病变;血清EPO显着降低,SEPOR显着升高,EPO/SEPOR的比值显着降低;血常规指标Gran%、Gran、MID、MID%、RBC、HCT、PCT显着降低、HGB、LY、LY%、MCH、WBC显着升高;肾功能指标UREA、CREA显着升高;甲状腺指标ACTH、CORT、T3、T4的显着降低;氧化应激指标MDA显着升高,SOD、GSH-Px、T-AOC、LPO显着降低;免疫指标C3、C4、IL-2、IL-6、IGA、IGG、IGM显着降低;生殖指标T、E2、LH、DHT、FSH显着降低;肾脏、睾丸中HIF1α-STAT5通路蛋白显着下降(均p<0.05)。(2)自然衰老致肾虚雄性生殖功能低下小鼠EPO及其信号通路蛋白显着降低。与青年小鼠相比,衰老模型小鼠,外观形态、毛色较差,体重和体温降低;肾小球空泡、炎性因子较多;睾丸小体形态不完整,曲精管萎缩、充血;精子数量显着下降、畸形率显着上升;血常规RBC、HCT、HGB、MID、MID%、MCH、PCT显着降低;血清UREA、CREA显着升高;ACTH、CORT、T3、T4显着降低;MDA、LPO显着升高,SOD、GSH-PX、T-AOC显着降低;T、E2、LH、DHT、FSH显着降低;自主活动次数、转棒时间显着降低、新物体识别指数显着升高;血清EPO显着降低,SEPOR显着升高,EPO/SEPOR比值显着降低;肾脏与睾丸HIF-1α、EPO、p-EPOR(Tyr368)、p-JAK2(Tyr570)、p-STAT5(Ser725)蛋白表达量显着降低(均p<0.05)。(3)腺嘌呤致肾虚雄性生殖功能低下大鼠EPO显着下降,HIF1α-STAT5通路蛋白显着异常。与正常组相比,模型组大鼠外观形态、毛色较差,体重、体温降低;肾外观变白,肾小球囊腔较大,肾小管内腺嘌呤结晶、坏死、炎性细胞浸润较多;睾丸小体管腔内蓝染的钙盐沉积,曲精管萎缩、管腔疏松,充血;精子外观、内部病变;精子数量显着降低,精子畸形率显着上升;血常规Gran%、Gran、MID、MID%、RBC、HCT、PCT、MCH显着下降,LY、LY%、WBC显着上升;血清UREA、CREA显着上升;ACTH、CORT、T3、T4的含量显着降低;T、E2、LH、DHT、FSH均显着降低;骑跨次数、插入次数、射精次数均显着降低;血清EPO显着降低,SEPOR显着升高,EPO/SEPOR比值显着降低;肾脏和睾丸HIF-1α、EPO蛋白表达含量显着降低,p-EPOR(Tyr368)、p-JAK2(Tyr570)、p-STAT5(Ser725)蛋白表达量显着升高(均p<0.05)。2.外源性rhEPO对肾虚雄性生殖功能低下动物体质及EPO信号通路逆转作用观察方法:(1)外源性rhEPO对EPO基因敲除雄性小鼠的逆转试验:取8周龄雄性EPO基因敲除小鼠及其野生型小鼠,分为4组:EPO-KO组、WT组、EPO-KO+rhEPO 500 IU·kg-1、WT+rhEPO 500 IU·kg-1,每组5只。rhEPO组每三日皮下注射rhEPO,EPO-KO组、WT组给予等体积生理盐水,连续28天。检测动物外观、体重、体温,测定行为学、血常规、血清生化指标,脏器病理学,精子形态、数量、畸形率,肾脏、睾丸HIF1α-STAT5通路关键蛋白含量。(2)外源性rhEPO对自然衰老肾虚雄性生殖功能低下小鼠的逆转试验:自然衰老模型小鼠分为4组:衰老模型组、rhEPO 250 IU·kg-1、500 IU·kg-1、1000 IU·kg-1、每组15只,2月龄雄性小鼠15只为青年对照组。rhEPO组每三日皮下注射相应剂量rhEPO,衰老模型组给予等体积生理盐水,持续28天。检测动物外观、体重、体温,测定行为学、血常规、血清生化指标,肾脏、睾丸病理学,精子数量、畸形率,肾脏、睾丸HIF1α-STAT5通路关键蛋白含量。(3)外源性rhEPO对腺嘌呤致肾虚雄性生殖功低下大鼠的逆转试验:将造模成功大鼠随机分为4组:模型组、rhEPO 500 IU·kg-1、1000IU·kg-1、1500 IU·kg-1每组15只,正常组15只大鼠。第15天开始,除正常组外,隔日150 mg·kg-1腺嘌呤灌胃维持模型,rhEPO每三天皮下注射一次,模型组给予等体积生理盐水,持续30天。检测大鼠外观、体重、体温,测定性行为学、血常规、血清生化指标,肾脏、睾丸病理学,精子形态、数量、畸形率,肾脏、睾丸HIF1α-STAT5通路关键蛋白含量。(4)外源性rhEPO对3种TM4细胞损伤模型的保护作用及其机制研究:TM4细胞为模型,分别进行三种干预:采用Crispr Cas9技术敲除EPO基因;JAK2及STAT5蛋白抑制剂分别处理细胞,缺氧缺糖损伤。细胞干预后观察给予外源性rhEPO 12.5 U·mL-1后细胞增殖情况、LDH泄漏率、线粒体膜电位及对HIF1α-STAT5通路的影响。结果:(1)外源性rhEPO显着改善肾虚雄性生殖功能低下动物的体质及生殖功能。(1)外源性rhEPO显着改善EPO基因敲除雄性小鼠体质及生殖功能。与EPO基因敲除组相比,外源性rhEPO 500 IU·kg-1组外观形态、毛色较好,体重、体温升高;肾小球饱满,空泡较少,炎性因子较少;睾丸小体形态较完整,曲精管萎缩、充血较轻;精子数量显着上升、畸形率显着下降;血常规Gran%、Gran、MID、MID%、RBC、HCT显着升高、HGB、LY、MCH、WBC显着降低;血清UREA、CREA显着降低;ACTH、CORT、T3、T4显着升高;MDA显着降低,SOD、GSH-PX、T-AOC、LPO显着升高;T、E2、LH、DHT、FSH均显着升高;自主活动次数、转棒时间显着上升、新物体识别指数显着降低(均p<0.05)。(2)外源性rhEPO显着改善自然衰老肾虚雄性生殖功能低下小鼠体质及生殖功能。与衰老模型组相比,rhEPO 250、500、1000 IU·kg-1组小鼠,外观形态、毛色较好,体重、体温升高;肾小球饱满,空泡较少,炎性因子较少;睾丸小体形态较完整,曲精管萎缩、充血较轻;精子数量显着上升、畸形率显着下降;血常规RBC、HCT、HGB、MID、MID%、MCH、PCT显着升高;血清UREA、CREA显着降低;ACTH、CORT、T3、T4显着升高;MDA、LPO显着降低,SOD、GSH-PX、T-AOC显着升高;T、E2、LH、DHT、FSH显着升高;小鼠自主活动次数、转棒时间显着上升、新物体识别指数显着降低(均p<0.05)。(3)外源性rhEPO显着改善腺嘌呤致肾虚雄性生殖功能低下大鼠体质及生殖功能。与模型组相比,rhEPO 500、1000、1500 IU·kg-1组大鼠,外观形态、毛色较好,体重、体温升高;肾外观形态显着改善,肾小球囊腔变小,肾小管内腺嘌呤结晶变少,凝固性坏死减少,炎性细胞浸润减少;睾丸小体形态趋于正常,管腔内钙盐沉积减少,曲精管缩、管腔疏松,血管壁增厚,充血的情况减轻;精子形态及组织结构病变显着缓解;精子数量显着上升、畸形率显着下降;血常规Gran%、Gran、MID、MID%、RBC、HCT、PCT、MCH显着上升,LY、LY%、WBC显着降低;血清UREA、CREA显着降低;ACTH、CORT、T3、T4的含量显着升高;T、E2、LH、DHT、FSH均显着升高;骑跨次数、插入次数、射精次数均显着升高(均p<0.05);(2)外源性rhEPO显着调节肾虚雄性生殖低下动物EPO信号通路。(1)外源性rhEPO显着升高EPO基因敲除雄性小鼠EPO含量及其信号通路蛋白的表达。与EPO基因敲除小鼠相比,rhEPO 500 IU·kg-1组小鼠EPO显着上升,SEPOR显着下降,EPO/SEPOR的比值显着上升,肾脏与睾丸中EPO、p-EPOR(Tyr368)、p-JAK2(Tyr570)、p-STAT5(Ser725)蛋白表达量增加(均P<0.01)。(2)外源性rhEPO显着升高自然衰老肾虚雄性生殖功能低下小鼠EPO含量及其信号通路蛋白的表达。与自然衰老组小鼠相比,rhEPO 250、500、1000 IU·kg-1组小鼠,血清EPO显着上升,SEPOR显着下降,EPO/SEPOR的比值显着上升;肾脏与睾丸中HIF-1α、EPO、p-EPOR(Tyr368)、p-JAK2(Tyr570)、p-STAT5(Ser725)蛋白表达量增加(均P<0.01)。(3)外源性rhEPO显着调节腺嘌呤致肾虚雄性生殖功能低下大鼠EPO及其信号通路蛋白的表达。与模型组相比,rhEPO 250 IU·kg-1、500 IU·kg-1组血清EPO显着上升,rhEPO1500 IU·kg-1组EPO显着下降,rhEPO各组SEPOR显着下降、EPO/SEPOR的比值显着上升;肾脏与睾丸HIF-1α、EPO蛋白表达量增加,p-EPOR(Tyr368)、p-JAK2(Tyr570)、p-STAT5(Ser725)蛋白表达量下降(均p<0.05)。(3)外源性rhEPO对EPO基因敲除或缺氧缺糖损伤的TM4细胞具有显着的保护作用,对EPO下游通路抑制的TM4细胞无改善作用。(1)外源性rhEPO对EPO基因敲除损伤的TM4细胞有显着保护作用。与模型组相比,rhEPO 12.5 IU·mL-1显着促进TM4细胞增殖;显着抑制LDH泄漏率和线粒体膜电位的改变;使EPO、p-EPOR(Tyr368)、p-JAK2(Tyr570)、p-STAT5(Ser725)蛋白表达量增加(均p<0.05)。(2)外源性rhEPO对JAK2、STAT5蛋白抑制的TM4细胞无显着保护作用。与模型组相比,rhEPO 12.5 IU·mL-1对TM4细胞增殖、LDH泄漏率、线粒体膜电位及HIF-1α、EPO、p-EPOR(Tyr368)、p-JAK2(Tyr570)、p-STAT5(Ser725)蛋白表达量均无显着改变。(3)外源性rhEPO对缺氧缺糖损伤的TM4细胞有显着保护作用。与模型组相比,rhEPO 12.5 IU·mL-1显着促进TM4细胞增殖;显着抑制LDH泄漏率和线粒体膜电位的改变;使HIF1α、EPO、p-EPOR(Tyr368)、p-JAK2(Tyr570)、p-STAT5(Ser725)蛋白表达量增加(均p<0.05)。提示EPO及其信号通路对雄性生殖功能细胞具有重要调节作用。3.右归饮对肾虚雄性生殖低下动物的改善及对EPO信号通路的调节作用观察方法:(1)右归饮对EPO基因敲除雄性小鼠的试验:取8周龄雄性EPO基因敲除小鼠及其野生型小鼠,分为4组:EPO-KO组、WT组、EPO-KO+右归饮20 g·kg-1、WT+右归饮20 g·kg-1每组5只。右归饮组每日灌胃相应剂量右归饮,EPO-KO组、WT组每日给予等体积生理盐水,持续28天。检测方法和指标同“方法2(1)”。(2)右归饮对自然衰老肾虚雄性生殖功能低下小鼠的试验:造模成功的自然衰老雄性生殖功能低下模型小鼠分为4组:模型组、右归饮10 g·kg-1、20 g·kg-1、40 g·kg-1组,每组15只,以2月龄雄性C57BL/6J小鼠15只为青年对照组。检测方法及指标同“方法2(2)”。(3)右归饮对腺嘌呤致肾虚雄性生殖功能低下大鼠的试验:腺嘌呤造模成功的肾虚雄性生殖功能低下大鼠随机分为5组:模型组、右归饮10 g·kg-1、20 g·kg-1、40 g·kg-1组、阳性药对照组(龟鹿二仙膏10 g·kg-1组),以正常大鼠15只为正常组。第15天开始,除正常组外,各组隔日给予150 mg·kg-1腺嘌呤灌胃维持模型,右归饮与龟鹿二仙膏组灌胃给药每日1次至第46天。检测方法及指标同“方法2(3)”。(4)右归饮对3种TM4细胞模型的保护作用及其机制研究:干预方式同“方法2(4)”。细胞干预后,考察给予右归饮100 ug·mL-1后细胞增殖情况、LDH泄漏率、线粒体膜电位及HIF1α-STAT5通路的影响。结果:(1)右归饮显着改善肾虚雄性生殖低下动物的体质及生殖能力。(1)右归饮对EPO基因敲除雄性小鼠体质及生殖能力无显着改善作用。与EPO基因敲除组相比,右归饮20 g·kg-1组小鼠外观形态、毛色、体温无改善;肾脏、睾丸病理形态无改善;精子数量、精子畸形率无改善;血常规MCH、LY、RBC、HCT、PCT、Gran、Gran%、Mid、Mid%无显着改变,WBC、HGB、LY%显着降低(均p<0.05),血清UREA、CREA、ACTH、CORT、T3、T4、MDA、LPO、SOD、GSH-PX、T-AOC、T、E2、DHT、FSH均无显着改变,LH显着升高(p<0.05);自主活动次数、转棒时间无显着改变,新物体识别指数显着下降(p<0.05)。(2)右归饮显着改善自然衰老肾虚雄性生殖功能低下小鼠体质及生殖能力。与衰老模型组相比,右归饮10、20、40 g·kg-1组小鼠,外观形态、毛色较好,体重、体温升高;肾小球饱满,空泡较少,炎性因子较少;睾丸小体形态较完整,曲精管萎缩、充血较轻;精子数量显着上升,精子畸形率显着下降;血常规RBC、HCT、HGB、MID、MID%、MCH、PCT显着降低;血清UREA、CREA显着降低;ACTH、CORT、T3、T4显着升高;MDA、LPO显着降低,SOD、GSH-PX、T-AOC显着升高;T、E2、LH、DHT、FSH均显着升高;小鼠自主活动次数、转棒时间显着上升、新物体识别指数显着降低(均p<0.05)。(3)右归饮显着改善腺嘌呤致肾虚雄性生殖功能低下大鼠体质及生殖能力。与模型组相比,右归饮10、20、40 g·kg-1组大鼠外观形态、毛色较好,体重、体温升高;肾外观形态显着改善,肾小球囊腔变小,肾小管内腺嘌呤结晶变少,坏死减少,炎性细胞浸润减少;睾丸小体形态趋于正常,管腔内蓝染的钙盐沉积减少,曲精管萎缩减轻、管腔疏松,血管壁增厚,充血的情况减轻;精子形态及组织结构病变显着缓解;精子数量显着上升,精子畸形率显着下降;血常规Gran%、Gran、MID、MID%、RBC、HCT、PCT、MCH显着上升,LY、WBC显着降低;血清UREA、CREA显着降低;ACTH、CORT、T3、T4的含量显着升高;T、E2、LH、DHT、FSH均显着升高;骑跨次数、插入次数、射精次数均显着升高(均p<0.05)。(2)右归饮显着调节肾虚雄性生殖低下动物EPO及其信号通路。(1)右归饮对EPO基因敲除雄性小鼠EPO含量及其信号通路蛋白表达无显着调节作用。与EPO基因敲除小鼠相比,右归饮20 g·kg-1组小鼠血清EPO、SEPOR无显着改变;肾脏与睾丸中HIF-1α、EPO、p-EPOR(Tyr368)、p-JAK2(Tyr570)、p-STAT5(Ser725)蛋白表达量无显着改变;(2)右归饮显着升高自然衰老肾虚雄性生殖功能低下小鼠EPO及其信号通路蛋白的表达。与自然衰老组小鼠相比,右归饮10、20、40 g·kg-1组小鼠血清EPO显着上升,SEPOR显着下降,EPO/SEPOR的比值显着上升,肾脏与睾丸HIF-1α、EPO、p-EPOR(Tyr368)、p-JAK2(Tyr570)、p-STAT5(Ser725)蛋白表达量增加(均p<0.01);(3)右归饮显着升高腺嘌呤致肾虚生殖雄性功能低下大鼠EPO及其信号通路蛋白的表达。与模型组相比,右归饮10、20、40 g·kg-1组小鼠血清EPO显着上升、SEPOR显着下降,EPO/SEPOR的比值显着上升;肾脏与睾丸HIF-1α、EPO、p-EPOR(Tyr368)、p-JAK2(Tyr570)、p-STAT5(Ser725)蛋白表达量下降(均P<0.05)。(3)右归饮对缺氧缺糖损伤的TM4细胞有显着保护作用,对EPO基因敲除或EPO下游信号通路阻断的TM4细胞无改善的作用。(1)右归饮对EPO基因敲除的TM4细胞无显着改善。与模型组相比,右归饮100 ug·mL-1对TM4细胞的增殖、LDH泄漏率、线粒体膜电位及HIF-1α、EPO、p-EPOR(Tyr368)、p-JAK2(Tyr570)、p-STAT5(Ser725)蛋白表达量无显着改变。(2)右归饮对JAK2、STAT5蛋白抑制的TM4无显着改善作用。与模型组相比,右归饮100 ug·mL-1对TM4细胞的增殖、线粒体膜电位及HIF-1α、EPO、p-EPOR(Tyr368)、p-JAK2(Tyr570)、p-STAT5(Ser725)蛋白表达量均无显着改变。(3)右归饮对缺氧缺糖的TM4细胞有显着保护作用。与模型组相比,右归饮100 ug·mL-1显着促进TM4细胞增殖;显着抑制模型细胞损伤导致的LDH泄漏率和线粒体膜电位的改变;使HIF-1α、EPO、p-EPOR(Tyr368)、p-JAK2(Tyr570)、p-STAT5(Ser725)蛋白表达量增加(均p<0.05)。提示右归饮对雄性生殖细胞的保护作用依赖于EPO及其信号通路。结论1.体内EPO的丢失或降低,与EPO基因敲除模型、自然衰老模型、腺嘌呤模型3种试验动物的肾虚体质及其雄性生殖功能低下密切相关;2.补充外源性rhEPO对EPO基因敲除模型、自然衰老模型、腺嘌呤模型3种试验动物的肾虚体质及其雄性生殖功能低下具有显着的逆转作用;3.补肾益精经典方右归饮对自然衰老模型、腺嘌呤模型2种肾虚雄性生殖功能低下动物的体质及其生殖功能具有显着的改善作用,其作用与升高EPO及其下游信号通路HIF-1α-STAT5的蛋白表达密切相关,对EPO基因敲除雄性小鼠模型无显着改善作用;4.外源性rhEPO和右归饮对EPO基因敲除、JAK2及STAT5蛋白抑制、缺氧缺糖损伤3种TM4细胞模型的干预试验结果显示,EPO及其下游信号通路是保护细胞损伤的关键环节,也是右归饮发挥作用的关键环节。5.本文建立了EPO基因条件性全身敲除小鼠模型,证明了EPO基因缺失雄性动物表型与“肾精亏虚证”患者临床表现的相似性,支持“EPO可能是肾精的重要生物物质基础”的假设。6.本文报道了EPO对肾虚动物雄性生殖功能的影响,从生殖的角度验证了“EPO可能是‘肾精’的重要物质基础”的假设,阐释了“肾精藏生殖之精”的中医理论。

侯袁婧[7](2019)在《腔内基质填充导管的制备及其修复周围神经缺损的研究》文中认为外伤性周围神经损伤是临床上一种常见的疾病,对离断性长段缺损(>1cm)来说,实现自我神经修复过程非常困难。虽然已有几种神经支架已获得FDA批准用于生产和临床使用,但神经功能恢复程度有限,而且将这些支架用于修复3cm以上缺损时效果不尽人意,其主要原因是修复长段缺损需要的修复时间较长,再生的神经缺乏有力的引导而错乱的分散在支架中,造成神经不能实现正确对接,最终难以实现神经功能上的恢复。目前研究主要通过在神经导管内引入纤维、基质、水凝胶等填充基质的方式来解决这个问题,对填充基质通过一定的仿生设计以发挥对轴突的趋触性引导作用,从而达到促进神经修复的目的。细菌纤维素(bacterial cellulose,BC)作为新型天然高分子,由于具有高比表面积、高持水性、良好的生物相容性等特性被广泛用于生物医用领域,但是在神经支架方面鲜有报道,将其作为神经导管腔内填充基质用于修复神经缺损的研究更少。本文旨在制备一种新型腔内基质填充型神经导管,评价该导管的理化性能和生物相容性,进一步将其植入大鼠体内进行坐骨神经10 mm缺损修复的研究,为实现其在神经修复中的应用提供理论指导和实验依据。本文制备的腔内基质填充型导管包括静电纺丝技术制备的聚乳酸-羟基乙酸(polyglycolic acid,PLGA)外导管和冷冻干燥法制备的氧化细菌纤维素-胶原基质复合填充支架。首先通过静电纺丝工艺探索,优化了电纺PLGA纳米纤维膜的实验条件,选用浓度为15%的PLGA-DCM/DMF溶液进行纺丝,设置电压15 k V,推注速度0.4 m L/h,接收距离15 cm时可获得均匀连续的纳米纤维膜。所制备的纤维直径为283±73 nm,纤维直径分布在100-500 nm之间。厚度为0.2mm的膜拉伸强度达到3.1 MPa,断裂伸长率为24.9%,PLGA纳米纤维膜良好的孔隙结构和力学性能,不仅为营养物质和气体的交换提供多孔通道结构,同时能为神经再生提供足够的力学支撑,所以选择其作为神经支架进行进一步研究。由于人体内没有纤维素酶,将BC植入体内后难以降解,本文利用高碘酸钠对BC进行选择性氧化以制备了可降解氧化细菌纤维素(oxidized bacterial cellulose,OBC),并对其进行了理化性能表征、细胞相容性和血液相容性的评价。研究了氧化度(oxidation degree,O.D.)对OBC支架的分子结构、形貌、孔隙度、力学性能和生物降解性的影响,评价了将OBC作为神经支架研究了其生物相容性。氧化度的提高降低了力学性能,但OBC0.05/3和OBC0.05/6的拉伸强度仍有3Mpa以上,满足手术和神经修复过程中所需要的力学强度和力学支撑。不同氧化度的OBC在7天内发生不同程度的降解,其中O.D.值为9.3%的OBC0.05/3的体外降解率为BC的15倍。将OBC与生物相容性较好的胶原(collagen,COL)通过席夫碱反应复合,制备了OBC-COL复合支架。OBC与COL质量比为7:3的OBC-COL2样品中的交联度最高。OBC-COL复合支架仍维持着三维互通的网状多孔结构,各孔隙之间由高长径比纤维互相连接和交织,孔隙率达70%以上,孔径在10-100μm的孔占70%。OBC与COL复合后热稳定性提升,细胞实验结果表明OBC-COL2表现出更好的生物相容性。将静电纺丝法和冷冻干燥法结合制备了腔内基质填充导管(intraluminal sponge filled nerve guidance conduit,ISF-NGC),其中PLGA纳米纤维作为导管的外壁,OBC-COL复合支架作为腔内填充基质。将ISF-NGC植入大鼠体内研究用于修复坐骨神经缺损,结果表明ISF-NGC对神经再生有积极作用,其中再生髓鞘的成熟度优于中空导管(hollow nerve guidance conduit,H-NGC),并与自体神经移植组无明显差异。第8周后ISF-NGC组大鼠SFI值接近自体移植组。腓肠肌恢复情况结果表明,ISF-NGC更有利于缓解肌肉萎缩的症状。H-NGC为神经再生提供了一个通道,而ISF-NGC中填充的多孔支架为神经再支配提供了模拟了自体神经中细胞外基质的结构,可以引导再生神经生长和延伸,从而促进神经再支配过程。综合实验结果表明,该导管能很好的促进神经再生和神经功能恢复,具有很好的应用价值。

李晓凡[8](2019)在《Ti丝表面TiO2纳米管阵列的制备及其对血液中β2-MG吸附性能的研究》文中研究说明肾脏是人体重要器官,它的主要功能是排泄人体内代谢产物以及血液中有害、有毒物质。如果肾脏发生病变,废物在体内积聚,就会导致疾病的产生。如β2-微球蛋白(β2-MG)等大中毒素物质由细胞产生并聚集在机体血液中,会引发诸如透析相关性淀粉样变(DRA)等各类并发症。针对这类疾病,常见的治疗手段包括手术和药物治疗,然而副作用比较大并且复发率也较高。常见的血液净化方法可以清除或者降低血液中包括β2-MG在内的各类毒素分子,但使用过程中也会无选择性的清除人体内有益的分子。为了提高血液灌流材料的选择性,本论文尝试在Ti丝表面通过阳极氧化方法生长单致密层加固的TiO2纳米管阵列,并对其表面进行氨基改性,以期将其应用作血液灌流吸附剂。实验结果表明,我们的材料既能保证对β2-MG的特异性吸附,对血液中其他蛋白含量的影响也不大。(1)通过电化学阳极氧化法在Ti丝表面制备出了无定形TiO2纳米管阵列,并且引入额外的致密氧化层提高了TiO2纳米管阵列与Ti丝基底的结合牢固性。利用煅烧或者去离子水中循环释放F-的方法降低TiO2纳米管阵列中F元素对人体的伤害。通过表征和分析,得到形貌排列有序、结合牢固以及孔道结构可设计的单致密层加固的TiO2纳米管阵列。(2)通过煅烧得到单致密层加固的锐钛矿相TiO2纳米管阵列。通过紫外光照的方法,增强了表面亲水性,进而提高了单致密层加固的锐钛矿TiO2纳米管阵列的吸附能力。以此为反应物进行表面氨基改性。通过表征和分析,得到形貌排列有序,孔径缩小且孔结构清晰可见,氨基功能化的单致密层加固的锐钛矿TiO2纳米管阵列。(3)研究了氨基功能化的单致密层加固的锐钛矿TiO2纳米管阵列的体外吸附性能。主要用于吸附血浆中β2-MG蛋白,同时检测了对白蛋白和总蛋白的吸附量。吸附实验结果表明,β2-MG蛋白的吸附率可达92.86%,比Ti丝以及氨基功能化的Ti丝吸附率分别提高了43%和49%,同时对白蛋白和总蛋白的吸附影响不大。

赵振华[9](2018)在《瓦松繁殖技术与药材质量研究》文中研究说明目的:调查瓦松的生态学习性与分布范围,研究瓦松种子繁殖与扦插繁殖技术,检测市售瓦松药材活性成分与金属元素含量,了解市场瓦松药材质量状况,为实现人工栽培、合理控制药材质量提供理论依据。方法:实地调查或检索文献厘清瓦松的生长环境与分布范围;利用解剖镜、显微镜及其常规制片技术,研究植株形态特征和根、茎、叶显微结构特征;利用显微镜、扫描电子显微镜观察种子及花粉粒的微观形态特征;在培养箱内,通过控制温度、光照、基质、激素处理等手段,研究种子繁殖与叶片、茎段扦插的成活率;利用正己烷在索氏提取器中提取脂溶性物质,在甲酯化的基础上,利用GC-MS分析其所含脂肪酸类成分;采用HPLC测定槲皮素和山奈素含量,利用电感耦合等离子体发射光谱法ICP-OES测定金属元素含量;使用Microsoft Excel2010和SPSS统计软件进行数理统计分析。结果:(1)虽然瓦松的分布范围较广,但其生长环境相对严格,根系纤弱,分布较浅,没有明显主根,在实现人工栽培的过程中,其生长条件相对难以模拟,这也是目前尚未大面积种植的根本原因。(2)瓦松为二年生草本,一年生植株为莲座状,莲座叶肉质呈线形。第二抽茎并形成花序,叶互生,呈线形至披针形。总状花序,花瓣5枚,雄蕊10枚,花药紫色。一年生植株根部表皮细胞微栓质化,木栓层为数列颓废状细胞,形状不规则;皮层较狭窄;韧皮部射线明显,筛管成群分布,韧皮纤维发达;次生木质部二原型,无髓。两年生植株根部表皮细胞微栓质化;木栓层为数列颓废状细胞;次生木质部较宽广。两年生植株茎横切面有表皮、皮层、维管组织和髓部。最外层为1层表皮细胞;皮层约占茎部半径的2/3;形成层成环;髓部较大。叶上、下表皮均为不规则多角型单层细胞,有气孔,为典型的不等型。(3)瓦松既可以采用种子繁殖,也可以利用叶片、茎段扦插进行繁殖。瓦松种子萌发基本没有休眠限制,在15℃25℃的温度范围内,只要水分供应充分,发芽率、发芽势和发芽指数随着温度升高而增加,但温度达到30℃时,种子的发芽率、发芽势和发芽指数均明显开始降低,因此瓦松种子的最适宜萌发温度应为25℃上下。由于瓦松种子细小,有性繁殖时幼苗生长缓慢,又加上属于两年生植物,药材产量很低。利用叶片或茎段进行扦插繁殖,生根率和成活率均能达到80%以上,且在6天左右基本都能生根,说明瓦松叶片或茎段扦插均能成活且生根较快。茎段扦插成活率高于叶片扦插。温度、激素处理、基质等对扦插成活率均有影响。扦插最适温度为25℃30℃,生根粉与200mg/L NAA处理均能获得较高的成活率,蛭石+河沙+混合土(1:1:1)是扦插适宜基质。(4)从瓦松药材正己烷提取物中共检出24种脂溶性成分,鉴定出20种,包括脂肪酸类、酯类、烷烃类和酮类。其中脂肪酸类成分14种,占已鉴定总组分的58.19%,含量较高的脂肪酸有棕榈酸(7.017%)、亚油酸(19.72%)、亚麻酸(8.913%)、硬脂酸(11.60%)、二十四烷酸(3.045%)和蜡酸(2.470%)。邻苯二甲酸二正辛酯(22.40%)是瓦松正己烷提取物的主要脂溶性成分。(5)18个批次瓦松药材样品中,槲皮素与山奈素的含量具有明显差异,其中有8批样品未达到药典要求的含量指标。槲皮素含量与粉末L*、a*、b*、c*、h*均呈显着正相关,山奈素含量与粉末L*、b*、c*、h*负呈相关,与a*呈正相关,且山奈素素含量与h*呈极显着负相关(P<0.01),与a*呈显着正相关(P<0.05);总含量与L*、a*、b*、c*呈正相关,与h*呈负相关,且与a*呈极显着正相关(P<0.01),与h*呈显着负相关(P<0.05)。(6)18个批次瓦松药材样品中,Ba含量为111269mg/kg,Cd含量为1.352.83mg/kg,Co含量为326mg/kg,Cr含量为64898 mg/kg,Cu含量为074.34 mg/kg,Se含量为03 mg/kg,Sr含量为227725 mg/kg,Zn含量为72.1131.96 mg/kg,不同批次瓦松药材含量差异也较大。结论:摸清了瓦松的生态学习性、分布范围;建立了种子繁殖与叶片、茎段扦插繁殖技术体系;对市售瓦松药材中的槲皮素、山奈素及Ba、Cd、Co、Cr、Cu、Se、Sr、Zn等8种金属元素含量进行了检测,发现不同批次药材之间含量差异很大;槲皮素、山奈素含量与药材粉末颜色之间具有明显的相关性;邻苯二甲酸二正辛酯(22.40%)是瓦松正丁烷提取物中最主要的成分,且系首次从瓦松属植物中检出。从而为实现瓦松人工引种驯化及药材质量控制奠定了坚实的基础。

山珊[10](2018)在《基于青霉素水解检测大肠杆菌O157:H7方法的建立及氯化抗菌膜对大肠杆菌防控的研究》文中研究表明微生物污染被认为是影响食品安全的主要原因之一。大肠杆菌广泛存在于环境中,食品在生产、包装及运输过程中,容易感染此菌,该菌属是国际上公认的食品卫生监测指示菌。有些致病菌株(如大肠杆菌O157:H7)能够对人体健康造成危害,甚至导致死亡。研究如何有效控制大肠杆菌对食品的污染以及建立快速灵敏的致病性大肠杆菌检测方法,对保障食品安全有着重要的意义。本文基于β-内酰胺酶水解青霉素的反应,应用酶联免疫吸附技术和免疫层析技术,通过高灵敏地检测青霉素的浓度,从而间接地测定大肠杆菌O157:H7的浓度,实现了提高检测灵敏度和缩短检测时间的目的。为了有效地控制食品中大肠杆菌的污染,本文将壳聚糖和聚乙烯醇混合后制备成膜,以混合膜作为基材,通过将传统的有机抗菌材料固定化于膜上,大大地提高了混合膜的抗菌效率,制备的氯化抗菌膜可以快速地杀灭大肠杆菌,实现了对大肠杆菌的有效控制。第1章,综述了大肠杆菌的概况、检测方法以及对大肠杆菌的防控手段。在第2章中,本研究通过青霉素的水解反应,将双抗夹心酶联免疫吸附技术(ds-ELISA)和间接竞争酶联免疫吸附技术(ic-ELISA)结合,建立了级联信号放大的检测大肠杆菌O157:H7的酶联免疫吸附方法。在ds-ELISA系统中,酶标板上包被了抗大肠杆菌O157:H7的多克隆抗体,大肠杆菌O157:H7通过免疫学反应被固定在酶标板上,结合抗大肠杆菌O157:H7的单克隆抗体-生物素复合物,加入链霉亲和素,最后加入生物素化的β-内酰胺酶,如果样品中存在一定量的大肠杆菌O157:H7,酶标板上会存在对应量的β-内酰胺酶。向ds-ELISA体系中加入青霉素溶液,β-内酰胺酶则大量水解青霉素,将水解后的溶液转移到ic-ELISA体系中,通过高灵敏地监测青霉素含量的变化,从而间接地测定大肠杆菌O157:H7的浓度。本研究优化了链霉亲和素的添加浓度、生物素化β-内酰胺酶的添加量和β-内酰胺酶水解青霉素时的p H值,并且对青霉素水解动力学过程进行了分析。结果显示大肠杆菌O157:H7的检测灵敏度为20 CFU/m L,经过级联信号放大的ELISA检测方法的灵敏度比传统ELISA方法高出1000倍。此外,使用本方法检测牛奶中的大肠杆菌O157:H7(2 CFU/g),增菌6 h即可检测到阳性信号。综上所述,基于青霉素水解级联信号放大的ELISA实现了提高大肠杆菌O157:H7检测灵敏度和缩短该菌检测时间的目的。在第3章中,研究利用青霉素的水解反应,将免疫磁富集技术与免疫层析方法相结合,达到灵敏快速地检测大肠杆菌O157:H7的目的。首先,使用免疫磁珠富集样本中大肠杆菌O157:H7,磁珠-抗大肠杆菌O157:H7多克隆抗体-大肠杆菌O157:H7复合物(复合物A)进一步结合抗大肠杆菌O157:H7的单克隆抗体-胶体金纳米粒子-β-内酰胺酶复合物(复合物B),然后加入青霉素溶液,经过β-内酰胺酶的高效水解作用后进行磁分离得到上清溶液,在整个检测系统中,增加大肠杆菌O157:H7的数量可以导致β-内酰胺酶浓度增加,同时导致青霉素含量降低。最后采用商品化的青霉素免疫层析试纸条检测上清液中的青霉素含量变化,从而快速检测样本中大肠杆菌O157:H7的浓度。本研究优化了复合物B上抗大肠杆菌O157:H7单克隆抗体抗体的标记量和复合物B的添加量,得到的大肠杆菌O157:H7的检测灵敏度为2×102 CFU/m L,比传统的免疫层析法的灵敏度提高了570倍。在第4章中,本研究将壳聚糖(CH)与聚乙烯醇(PVA)以不同的质量比混合成膜,经漂白剂处理后,混合膜中壳聚糖的氨基基团转化为卤胺基团,极大地增强了混合膜的抗菌效率,得到了具有高效抗菌率和机械性能良好的抗菌膜。用扫描电镜(SEM)对与抗菌膜接触后的大肠杆菌进行了表征,结果显示抗菌膜与大肠杆菌接触后,对大肠杆菌产生了不可逆转的杀灭作用。研究了壳聚糖/聚乙烯醇的质量比对氯化抗菌膜抗菌效率、机械性能、热稳定性和水蒸气透过系数的影响。当壳聚糖与聚乙烯醇的质量比为4:6时,氯化抗菌膜的断裂伸长率为24.646%,与纯壳聚糖膜的断裂伸长率相比得到了较大的提高,并且在30 min内可以杀灭108 CFU的大肠杆菌。热重分析结果显示氯化抗菌膜(Cl OCH4PVA6)有较好的热稳定性;Cl OCH4PVA6膜的水蒸气透过系数为4.173×10-11 g·m-2·s-1·Pa-1,表示氯化抗菌膜阻湿性能良好。氯化的抗菌膜可以有效地消除大肠杆菌,本研究为保障食品安全提供了技术支撑。在第5章中,选取甘油、木糖醇、山梨醇、吐温80、司盘80和PEG-6000作为增塑剂,分别加入混合膜中,研究不同增塑剂对氯化抗菌膜抗菌性能和物理性能的影响。研究结果表明增塑剂的添加不会对氯化抗菌膜的抗菌性能产生影响;加入甘油后,氯化抗菌膜(Cl OCH4PVA6G0.5)的断裂伸长率为36.442%,与Cl OCH4PVA6膜的断裂伸长率相比得到了提高。研究评价了不同甘油添加量对氯化抗菌膜抗菌性能和物理性能的影响。不同甘油添加量不会对氯化抗菌膜的抗菌性能造成影响,当甘油添加量为0.5 m L(Cl OCH4PVA6G0.5)时,混合膜的断裂伸长率为最大,Cl OCH4PVA6G0.5膜的水蒸气透过系数为1.3×10-11 g·m-2·s-1·Pa-1,添加0.5 m L的甘油降低了氯化抗菌膜的水蒸气透过系数,研究结果显示Cl OCH4PVA6G0.5阻湿性能较好,适用于作为食品包装的材料。大肠杆菌的污染是危害食品安全的重要原因之一,在本研究中,建立的检测方法可以快速灵敏地检测致病性大肠杆菌,制备的氯化抗菌膜可以有效地消除大肠杆菌。本课题对保障食品安全有着重要的意义。

二、Scanning Electron Microscopic Observation on Morphologic Characteristics of Sperms in Uremic Patients(论文开题报告)

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

三、Scanning Electron Microscopic Observation on Morphologic Characteristics of Sperms in Uremic Patients(论文提纲范文)

(1)血液透析用双层混合基质膜的制备及性能研究(论文提纲范文)

摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 血液透析技术
        1.1.1 血液透析的基本原理
    1.2 血液透析研究综述
        1.2.1 血液透析发展历史
        1.2.2 血液透析现状
    1.3 可穿戴人工肾(WAK)进展
        1.3.1 应用于WAK的微流控技术进展
        1.3.2 应用于WAK的膜科学进展
        1.3.3 应用于WAK的吸附材料进展
    1.4 课题的研究目的和主要内容
        1.4.1 课题研究的目的和意义
        1.4.2 课题研究的主要内容
第二章 具有吸附中分子毒素功能的双层血液透析膜
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验药品与原料
        2.2.2 实验主要仪器
        2.2.3 疏水HAP的制备
        2.2.4 疏水HAP的化学组成表征
        2.2.5 疏水HAP的热重测试
        2.2.6 疏水HAP的粒径分布测试
        2.2.7 疏水HAP的接触角测试
        2.2.8 HAP吸附性能研究
        2.2.9 双层混合基质膜的制备
        2.2.10 双层混合基质膜的扫描电镜测试
        2.2.11 双层混合基质膜的热重测试
        2.2.12 双层混合基质膜的Zeta电位测试
        2.2.13 双层混合基质膜的渗透分离性能测试
        2.2.14 切割分子量测试
        2.2.15 双层混合基质膜吸附溶菌酶实验
        2.2.16 体外模拟血液透析实验
        2.2.17 血小板与红细胞粘附实验
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 HAP吸附能力
        2.3.2 疏水HAP的 FT-IR分析
        2.3.3 疏水HAP的热重分析
        2.3.4 疏水HAP的粒径与接触角分析
        2.3.5 疏水HAP的接触角分析
        2.3.6 双层混合基质膜的扫描电镜分析
        2.3.7 双层混合基质膜的热重分析
        2.3.8 双层混合基质膜的Zeta电位分析
        2.3.9 双层混合基质膜的渗透性能分析
        2.3.10 双层混合基质膜静态吸附溶菌酶实验
        2.3.11 血液透析性能
        2.3.12 血小板和红细胞粘附实验
    2.4 本章小结
第三章 应用于透析液净化的双层混合基质膜
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验药品与原料
        3.2.2 实验主要仪器
        3.2.3 火山泥的结构表征及性能测试
        3.2.4 PES/火山泥双层混合基质膜的制备
        3.2.5 PES/火山泥双层混合基质膜的扫描电镜测试
        3.2.6 PES/火山泥双层混合基质膜的热重测试
        3.2.7 PES/火山泥双层混合基质膜的Zeta电位测试
        3.2.8 PES/火山泥双层混合基质膜的膜渗透分离性能测试
        3.2.9 PES/火山泥双层混合基质膜的切割分子量测试
        3.2.10 PES/火山泥双层混合基质膜静态清除尿毒症毒素实验
        3.2.11 超滤吸附实验
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 火山泥的X射线衍射谱分析
        3.3.2 火山泥的X射线能谱仪分析
        3.3.3 火山泥的BET分析
        3.3.4 火山泥的吸附能力分析
        3.3.5 PES/火山泥双层混合基质膜的扫描电镜图
        3.3.6 PES/火山泥双层混合基质膜的热重分析
        3.3.7 PES/火山泥双层混合基质膜的Zeta电位分析
        3.3.8 PES/火山泥双层混合基质膜的渗透性能分析
        3.3.9 静态吸附实验
        3.3.10 超滤吸附实验
    3.4 本章小结
第四章 全文总结
参考文献
硕士期间发表论文和参加科研情况
致谢

(2)基于飞秒激光诱导纳米粒子沉积的气体微传感器研究(论文提纲范文)

摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 气体传感器
        1.1.1 气体传感器的分类
        1.1.2 电阻式气体传感器
        1.1.3 气体传感器性能指标
    1.2 气体微传感器
        1.2.1 气体微传感器的研究意义
        1.2.2 气体微传感器的发展趋势
        1.2.3 气体微传感可探测的胃肠道气体种类
        1.2.4 气体微传感器的制备方法
    1.3 激光加工制备微传感器
        1.3.1 激光加工机理
        1.3.2 光物理反应制备微传感器
        1.3.3 光化学反应制备微传感器
    1.4 面临的问题
    1.5 本论文的主要工作
第二章 单根钯掺杂水合氧化钨微米线传感器的制备及氨气传感性质
    2.1 引言
    2.2 单根Pd-WO_3·xH_2O微米线的制备
        2.2.1 实验准备
        2.2.2 激光诱导水中金属氧化物纳米粒子沉积
    2.3 单根Pd-WO_3·xH_2O微米线形貌、结构表征
    2.4 单根Pd-WO_3·xH_2O微米线氨气传感器测试
    2.5 单根Pd-WO_3·xH_2O微米线对氨气传感机理
    2.6 本章小结
第三章 单根钯微米线传感器的制备及氢气传感性质
    3.1 引言
    3.2 单根Pd微米线传感器的制备
        3.2.1 实验准备
        3.2.2 激光诱导水中Pd纳米粒子沉积
    3.3 单根Pd微米线形貌、结构表征
    3.4 单根Pd微米线H_2传感器测试
    3.5 Pd对H_2传感机理
    3.6 本章小结
第四章 氧化锌纳米线阵列微传感器的制备和乙醇传感性质
    4.1 引言
    4.2 激光布种ZnO纳米粒子
        4.2.1 实验准备
        4.2.2 激光在乙二醇中诱导ZnO纳米粒子沉积
    4.3 ZnO种子生长
    4.4 ZnO纳米线阵列对乙醇传感测试
    4.5 ZnO纳米线传感机理
    4.6 本章小结
第五章 总结与展望
参考文献
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致谢

(3)血液净化用纳米纤维复合膜和复合微球的构建及其对生物毒素的清除机制(论文提纲范文)

摘要
abstract
第一章 绪论
    1.1 血液净化技术及其原理
        1.1.1 血液透析的简介及其原理
        1.1.2 血液灌流的简介及其原理
    1.2 血液透析膜发展简介
    1.3 血液透析膜材料要求
    1.4 目前血液透析膜存在的主要问题
    1.5 透析膜改善透析效率的方法
        1.5.1 调节透析膜孔径以及膜孔结构
        1.5.2 构建尿毒症毒素传输通道
    1.6 透析膜的生物相容性和抗污性能
        1.6.1 本体改性
        1.6.2 共混改性
        1.6.3 表面修饰改性
    1.7 便携式“人工肾”
    1.8 本论文的研究内容
    1.9 本论文的创新性
    参考文献
第二章 纳米纤维复合透析膜水凝胶功能皮层的调控及其性能研究
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验材料
        2.2.2 实验仪器与设备
        2.2.3 磺化PVA (s-PVA)的合成
        2.2.4 s-PVA/PVA/ PAN薄层纳米纤维复合膜的制备
        2.2.5 表征
        2.2.6 生物相容性
        2.2.7 过滤性能和抗污性能
        2.2.8 血液透析滤过模拟实验
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 磺化改性的聚乙烯醇纳米纤维复合膜的制备
        2.3.2 亲水性和血液相容性
        2.3.3 细胞相容性
        2.3.4 膜的传输和抗污染能力
        2.3.5 透析性能
    2.4 本章小结
    参考文献
第三章 纳米纤维复合膜水凝胶皮层表面构筑两性离子涂层及其多功能性
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验材料
        3.2.2 实验主要仪器及设备
        3.2.3 纯聚乙烯醇纳米纤维复合膜的制备
        3.2.4 通过层层自组装技术构建两性离子涂层
        3.2.5 膜表面表征
        3.2.6 复合膜的过滤性能
        3.2.7 抗生物污染实验
        3.2.8 血液相容性
        3.2.9 血液透析滤过模拟实验
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 膜表面改性机理和化学组分
        3.3.2 复合膜的过滤性能
        3.3.3 水接触角分析
        3.3.4 膜抗生物污染性能
        3.3.5 LBL膜的血液相容性
        3.3.6 LBL膜的血液透析性能
    3.4 本章小结
    参考文献
第四章 硫化丝素蛋白纳米线为水凝胶皮层构筑中分子毒素快速去除通道
    4.1 引言
    4.2 实验部分
        4.2.1 实验材料
        4.2.2 实验主要仪器及设备
        4.2.3 硫化丝素蛋白和硫化丝素蛋白纳米线的制备过程
        4.2.4 PVA/SSNFs/PAN TFNC膜的制备
        4.2.5 表征
        4.2.6 复合膜的传输性能
        4.2.7 血液相容性
        4.2.8 血液透析实验
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 硫化丝素蛋白的表征
        4.3.2 硫化丝素蛋白纳米线的组装过程和结构
        4.3.3 PVA/SSNFs TFNC膜的表征
        4.3.4 膜的传输特性
        4.3.5 血液相容性
        4.3.6 血液透析滤过性能
    4.4 本章小结
    参考文献
第五章 新型人工肾用水凝胶复合微球的制备及其吸附性能研究
    5.1 引言
    5.2 实验部分
        5.2.1 实验材料
        5.2.2 实验仪器与设备
        5.2.3 金属有机框架UiO-66和UiO-66-NH_2的制备
        5.2.4 明胶/金属有机框架复合微球的制备
        5.2.5 表征
        5.2.6 明胶/金属有机框架复合微球的抗凝血实验
        5.2.7 金属有机框架以及复合微球对尿毒症毒素的吸附实验
    5.3 结果与讨论
        5.3.1 金属有机框架UiO-66和UiO-66-NH_2的化学结构以及形貌
        5.3.2 水凝胶微球微球的化学结构和断面形貌图
        5.3.3 水凝胶微球的抗凝血性能
        5.3.4 水凝胶微球对毒素的吸附
        5.3.5 吸附/透析双功能便携式“人工肾”器件的设计
    5.4 本章小结
    参考文献
第六章 结论与展望
    6.1 结论
    6.2 展望
博士期间已发表论文与专利和获奖荣誉
致谢

(4)静电纺纤维材料的结构调控及其在生物医学领域的应用(论文提纲范文)

致谢
摘要
Abstract
缩写清单
1 引言
2 文献综述
    2.1 静电纺丝概述
        2.1.1 静电纺丝影响因素
        2.1.2 静电纺丝材料
    2.2 静电纺纤维结构的设计与调控
        2.2.1 单根静电纺纤维结构
        2.2.2 定向排列和图案化静电纺纤维膜
        2.2.3 静电纺纤维材料三维结构的构建
    2.3 静电纺材料在生物医药领域的应用
        2.3.1 静电纺纤维在血液净化领域的应用
        2.3.2 静电纺纤维在药物递送领域的应用
        2.3.3 静电纺纤维在肿瘤研究领域的应用
        2.3.4 静电纺纤维在组织工程领域的应用
    2.4 本论文研究主要内容
3 三维纳米纤维海绵用于血液灌流中高效去除胆红素
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验试剂
        3.2.2 实验仪器
        3.2.3 实验内容
    3.3 实验结果与讨论
        3.3.1 纳米纤维海绵膨胀高度、孔隙率及密度
        3.3.2 纳米纤维海绵形貌
        3.3.3 纤维改性过程表征
        3.3.4 吸附等温线
        3.3.5 吸附动力学
        3.3.6 动态吸附
        3.3.7 细胞毒性与血液相容性
    3.4 小结
4 基于多孔纤维的可控药物释放体系用于黑色素瘤的治疗和皮肤修复
    4.1 引言
    4.2 实验部分
        4.2.1 实验试剂
        4.2.2 实验仪器
        4.2.3 实验内容
    4.3 实验结果与讨论
        4.3.1 多孔纤维膜的制备
        4.3.2 掺杂CuS的PFM的制备与表征
        4.3.3 复合纤维膜药物负载与释放行为的表征
        4.3.4 复合纤维膜光热转化性能的表征
        4.3.5 抗肿瘤细胞实验
        4.3.6 纤维膜抗肿瘤和皮肤愈合小鼠实验
        4.3.7 细胞在纤维膜铺展与增殖实验
        4.3.8 小鼠皮肤愈合实验
    4.4 小结
5 湿度可调节多功能纳米纤维敷料用于伤口的快速杀菌和伤口渗出液的有效管理
    5.1 引言
    5.2 实验部分
        5.2.1 实验试剂
        5.2.2 实验仪器
        5.2.3 实验步骤
    5.3 实验结果与讨论
        5.3.1 ZnO-CNP的合成与表征
        5.3.2 ZnO-NCP-NFS的制备与表征
        5.3.3 ZnO-NCP-NFS的光热性能
        5.3.4 ZnO-NCP-NFS吸收液体和调节自身湿度性能
        5.3.5 ZnO-NCP-NFS的抗菌性能
        5.3.6 ZnO-NCP-NFS细胞毒性测试
    5.4 小结
6 结论
参考文献
作者简历及在学研究成果
学位论文数据集

(5)基于魔芋葡甘聚糖的智能分子印迹功能材料的研究(论文提纲范文)

摘要
Abstract
英文缩略词表
第一章 绪论
    1.1 分子印迹聚合物
        1.1.1 分子印迹聚合物简介
        1.1.2 构成分子印迹聚合物的基本要素
        1.1.3 分子印迹聚合物的制备方法
        1.1.4 分子印迹聚合物的表征
        1.1.5 分子印迹聚合物的应用
        1.1.6 智能分子印迹聚合物
        1.1.7 智能型分子印迹聚合物面临的挑战
        1.1.8 多糖基分子印迹聚合物
    1.2 魔芋葡甘聚糖
        1.2.1 魔芋葡甘聚糖的简介
        1.2.2 魔芋葡甘聚糖的改性
        1.2.3 魔芋葡甘聚糖的应用
    1.3 本课题的提出与研究思路
        1.3.1 本课题的提出
        1.3.2 研究思路
第二章 用于尿素识别与分离的KGM基磁性分子印迹聚合物
    2.1 前言
    2.2 实验部分
        2.2.1 原料与试剂
        2.2.2 Fe_3O_4纳米粒子的合成
        2.2.3 磁性分子印迹聚合物的制备
        2.2.4 测试与表征
        2.2.5 吸附动力学实验
        2.2.6 吸附平衡实验
        2.2.7 选择性
        2.2.8 稳定性和重复使用性
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 红外分析
        2.3.2 X射线光电子能谱分析
        2.3.3 X射线衍射分析
        2.3.4 热重分析
        2.3.5 透射电镜分析
        2.3.6 磁性能分析
        2.3.7 吸附速率
        2.3.8 吸附等温线
        2.3.9 选择性
        2.3.10 稳定性和重复性
    2.4 本章小结
第三章 用于敌百虫识别与分离的壳层可控的核/壳型KGM基磁性分子印迹聚合物
    3.1 前言
    3.2 实验部分
        3.2.1 原料与试剂
        3.2.2 Fe_3O_4纳米粒子的合成
        3.2.3 Fe_3O_4纳米粒子的表面改性
        3.2.4 磁性分子印迹聚合物的制备
        3.2.5 测试与表征
        3.2.6 吸附动力学实验
        3.2.7 吸附平衡实验
        3.2.8 选择性
        3.2.9 稳定性和重复使用性
        3.2.10 实际样品的回收性实验
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 红外分析
        3.3.2 X射线衍射分析
        3.3.3 热重分析
        3.3.4 透射电镜分析
        3.3.5 磁性能分析
        3.3.6 吸附速率
        3.3.7 吸附等温线
        3.3.8 选择性
        3.3.9 稳定性和重复性
        3.3.10 实际样品检测
    3.4 本章小结
第四章 用于5-氟尿嘧啶可控释放的KGM基热敏分子印迹聚合物
    4.1 前言
    4.2 实验部分
        4.2.1 原料与试剂
        4.2.2 热敏分子印迹聚合物的制备
        4.2.3 测试与表征
        4.2.4 吸附动力学实验
        4.2.5 吸附平衡实验
        4.2.6 选择性
        4.2.7 稳定性和重复使用性
        4.2.8 释放动力学测试
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 红外分析
        4.3.2 X射线衍射分析
        4.3.3 热重分析
        4.3.4 差示扫描量热分析
        4.3.5 扫描电镜分析
        4.3.6 解吸循环伏安法
        4.3.7 吸附速率
        4.3.8 吸附等温线
        4.3.9 选择性
        4.3.10 稳定性和重复性
        4.3.11 释放性能测试
    4.4 本章小结
第五章 用于盐酸二甲双胍识别与分离的KGM基拉链状热敏分子印迹聚合物
    5.1 前言
    5.2 实验部分
        5.2.1 原料与试剂
        5.2.2 热敏分子印迹聚合物的制备
        5.2.3 测试与表征
        5.2.4 吸附动力学实验
        5.2.5 吸附平衡实验
        5.2.6 选择性
        5.2.7 稳定性和重复使用性
    5.3 结果与讨论
        5.3.1 AM和 AMPS的相互作用
        5.3.2 红外分析
        5.3.3 X射线光电子能谱分析
        5.3.4 X射线衍射分析
        5.3.5 热重分析
        5.3.6 扫描电镜分析
        5.3.7 解吸循环伏安法
        5.3.8 吸附速率
        5.3.9 吸附等温线
        5.3.10 选择性
        5.3.11 稳定性和重复性
    5.4 本章小结
结论
参考文献
攻读硕士学位期间的研究成果、参加学术会议及获奖
致谢

(6)EPO与肾虚雄性生殖功能低下的相关性及右归饮的改善作用(论文提纲范文)

摘要
Abstract
前言
第一章 EPO与肾虚雄性生殖功能低下的相关性研究
    第一节 EPO基因敲除雄性小鼠表型与“肾精亏虚证”的相似性观察
        1 试验材料和方法
        2 试验结果
        2.1 EPO基因敲除小鼠的鉴定
        2.2 EPO基因敲除雄性小鼠外观形态、体重、饮食量显着差于野生型小鼠
        2.3 EPO基因敲除雄性小鼠主要脏器组织形态显着差于野生型小鼠
        2.4 EPO基因敲除雄性小鼠精子数量、畸形率、形态显着差于野生型小鼠
        2.5 EPO基因敲除雄性小鼠血液指标显着差于野生型小鼠
        2.6 EPO基因敲除雄性小鼠HIF1α-STAT5 通路蛋白显着低于野生型小鼠
        3 试验讨论
        4 试验小结
    第二节 自然衰老致肾虚雄性生殖功能低下小鼠体质及体内EPO的变化
        1 试验材料和方法
        2 试验结果
        2.1 自然衰老肾虚雄性生殖功能低下小鼠建立成功
        2.2 自然衰老肾虚雄性生殖功能低下小鼠EPO及其信号通路显着变化
        3 试验讨论
        4 试验小结
    第三节 腺嘌呤致肾虚雄性生殖功能低下大鼠体质及体内EPO的变化
        1 试验材料和方法
        2 试验结果
        2.1 腺嘌呤致肾虚雄性生殖功能低下大鼠模型建立成功
        2.2 腺嘌呤致肾虚雄性生殖功能低下大鼠EPO及其信号通路显着变化
        3 试验讨论
        4 试验小结
第二章 外源性rhEPO对肾虚雄性生殖功能低下动物体质改善及EPO的调节作用观察
    第一节 外源性rhEPO对肾虚雄性生殖功能低下模型动物体质改善作用
        1 试验材料和方法
        2 试验结果
        2.1 外源性rhEPO能显着改善EPO基因敲除雄性小鼠体质
        2.2 外源性rhEPO能显着改善自然衰老肾虚雄性生殖功能低下小鼠体质
        2.3 外源性rhEPO能显着改善腺嘌呤致肾虚雄性生殖功能低下大鼠体质
        3 试验讨论
        4 试验小结
    第二节 外源性rhEPO对肾虚雄性生殖功能低下动物EPO及其信号通路的调节作用
        1 试验材料和方法
        2 试验结果
        2.1 外源性rhEPO显着升高EPO基因敲除雄性小鼠EPO及信号通路
        2.2 外源性rhEPO显着升高自然衰老肾虚雄性生殖低下小鼠EPO及其信号通路
        2.3 外源性rhEPO显着调节腺嘌呤致肾虚雄性生殖低下大鼠EPO及信号通路
        3 试验讨论
        4 试验小结
    第三节 外源性rhEPO对 TM4 细胞缺氧缺糖损伤的保护作用及机制研究
        1 试验材料和方法
        2 试验结果
        2.1 TM4细胞模型条件及给药剂量选择
        2.2 外源性rhEPO能显着保护EPO基因敲除损伤的TM4 细胞
        2.3 外源性rhEPO不能显着保护JAK2、STAT5 蛋白抑制的TM4 细胞
        2.4 外源性rhEPO能显着保护缺氧缺糖损伤的TM4 细胞
        3 试验讨论
        4 试验小结
第三章 右归饮对肾虚雄性生殖功能低下动物体质改善及EPO的调节作用观察
    第一节 右归饮对肾虚雄性生殖功能低下动物体质改善作用
        1 试验材料和方法
        2 试验结果
        2.1 右归饮不能显着改善EPO基因敲除雄性小鼠体质
        2.2 右归饮能显着改善自然衰老肾虚雄性生殖功能低下小鼠体质
        2.3 右归饮能显着改善腺嘌呤致肾虚雄性生殖功能低下大鼠体质
        3 试验讨论
        4 试验小结
    第二节 右归饮对肾虚雄性生殖功能低下动物体内EPO及其信号通路的调节作用
        1 试验材料和方法
        2 试验结果
        2.1 右归饮不能显着影响EPO基因敲除雄性小鼠EPO及信号通路
        2.2 右归饮能升高自然衰老肾虚雄性生殖低下小鼠EPO及信号通路
        2.3 右归饮能升高腺嘌呤致肾虚雄性生殖低下大鼠体内EPO及调节信号通路
        3 试验讨论
        4 试验小结
    第三节 右归饮对TM4细胞缺氧缺糖损伤的保护作用及机制研究
        1 试验材料和方法
        2 试验结果
        2.1 TM4细胞模型条件及给药剂量选择
        2.2 右归饮不能显着保护EPO基因敲除损伤的TM4细胞
        2.3 右归饮不能显着保护JAK2或STAT5 蛋白抑制损伤的TM4 细胞
        2.4 右归饮能显着保护缺氧缺糖损伤的TM4细胞
        3 试验讨论
        4 试验小结
全文总结
    创新及意义
    思考与展望
参考文献
文献综述
    参考文献
致谢
博士期间科研工作汇报
附录 :中英文缩略词对照表

(7)腔内基质填充导管的制备及其修复周围神经缺损的研究(论文提纲范文)

中文摘要
Abstract
第1章 绪论
    1.1 引言
    1.2 周围神经结构与功能、损伤与再生
        1.2.1 周围神经结构与功能
        1.2.2 周围神经损伤与再生
    1.3 周围神经损伤修复研究进展
        1.3.1 周围神经损伤修复材料
        1.3.2 周围神经支架设计原则
        1.3.3 周围神经组织工程支架研究
    1.4 周围神经支架制备方法
        1.4.1 冷冻干燥技术
        1.4.2 静电纺丝技术
    1.5 国内外研究现状小结
    1.6 本课题研究的目的和意义
    1.7 本课题主要研究内容
第2章 静电纺PLGA纳米纤维膜的制备与性能研究
    2.1 引言
    2.2 实验部分
        2.2.1 实验原料与试剂
        2.2.2 实验仪器
        2.2.3 PLGA电纺膜的制备
        2.2.4 测试与表征
    2.3 结果与讨论
        2.3.1 影响纳米纤维形态的因素
        2.3.2 PLGA纤维膜孔隙率分析
        2.3.3 PLGA纤维膜的力学性能分析
        2.3.4 PLGA纤维膜的体外降解性能分析
        2.3.5 PLGA纤维膜的溶胀性能及亲疏水性分析
    2.4 本章小结
第3章 可降解细菌纤维素的制备与性能研究
    3.1 引言
    3.2 实验部分
        3.2.1 实验原料与试剂
        3.2.2 实验仪器
        3.2.3 氧化细菌纤维素的制备
        3.2.4 氧化程度的测定
        3.2.5 红外光谱分析(FT-IR)
        3.2.6 广角X射线衍射分析(WAXD)
        3.2.7 形貌及表面性能分析
        3.2.8 力学性能测试
        3.2.9 体外降解性测试
        3.2.10 细胞培养与毒性检测
        3.2.11 血液相容性评价
        3.2.12 统计学分析
    3.3 结果与讨论
        3.3.1 BC的氧化程度分析
        3.3.2 红外光谱分析
        3.3.3 WAXD结果分析
        3.3.4 形貌结构分析
        3.3.5 孔隙率及孔径分布分析
        3.3.6 力学性能分析
        3.3.7 体外降解性能分析
        3.3.8 细胞毒性分析
        3.3.9 溶血率(HR)分析
    3.4 本章小结
第4章 氧化细菌纤维素-胶原复合支架的制备与性能研究
    4.1 引言
    4.2 实验部分
        4.2.1 实验原料与试剂
        4.2.2 实验仪器
        4.2.3 氧化细菌纤维素-胶原复合支架的制备
        4.2.4 交联度测定
        4.2.5 红外光谱分析(FT-IR)
        4.2.6 广角X射线衍射分析(WAXD)
        4.2.7 形貌及表面性能分析
        4.2.8 热稳定性能分析(TGA)
        4.2.9 溶解性能测试
        4.2.10 细胞培养与毒性检测
        4.2.11 统计学分析
    4.3 结果与讨论
        4.3.1 复合支架交联度分析
        4.3.2 红外光谱(FT-TR分析)
        4.3.3 WXAD结果分析
        4.3.4 表面形貌分析
        4.3.5 热稳定性分析
        4.3.6 溶解度分析
        4.3.7 复合支架对RSC96 细胞增殖的影响
    4.4 本章小结
第5章 腔内基质填充导管用于神经缺损修复
    5.1 引言
    5.2 实验部分
        5.2.1 实验原料与试剂
        5.2.2 实验仪器
        5.2.3 腔内基质填充型导管(ISF-NGC)的制备
        5.2.4 ISF-NGC理化性能表征
        5.2.5 动物实验
        5.2.6 术后大致观察
        5.2.7 组织学观察与分析
        5.2.8 透射电镜观察与分析
        5.2.9 免疫组织化学分析
        5.2.10 神经再生相关因子的RT-PCR检测
        5.2.11 大鼠运动功能测试
        5.2.12 腓肠肌恢复情况
        5.2.13 统计学分析
    5.3 结果与讨论
        5.3.1 ISF-NGC的设计与表征
        5.3.2 动物实验手术前后大体观察
        5.3.3 再生神经组织学评价和形态分析
        5.3.4 再生神经免疫组织化学分析
        5.3.5 RT-PCR分析
        5.3.6 再生神经功能恢复评价
        5.3.7 腓肠肌恢复评价
        5.3.8 ISF-NGC促神经再生分析
    5.4 本章小结
第6章 结论与展望
    6.1 全文结论
    6.2 本论文主要创新点
    6.3 不足与展望
致谢
参考文献
攻读博士学位期间发表论文及申请专利

(8)Ti丝表面TiO2纳米管阵列的制备及其对血液中β2-MG吸附性能的研究(论文提纲范文)

摘要
Abstract
第一章 绪论
    1.1 TiO_2 简介
    1.2 β2-MG介绍
    1.3 血液灌流吸附剂
    1.4 本研究的目的和意义
第二章 TiO_2纳米管阵列的制备
    2.1 前言
    2.2 试剂与仪器
    2.3 实验方法
    2.4 结果与分析
    2.5 本章小结
第三章 TiO_2纳米管阵列表面氨基改性
    3.1 前言
    3.2 试剂与仪器
    3.3 实验方法
    3.4 结果与分析
    3.5 本章小结
第四章 TiO_2纳米管阵列体外血浆吸附
    4.1 前言
    4.2 试剂与仪器
    4.3 实验方法
    4.4 结果与分析
    4.5 本章小结
第五章 全文总结
    5.1 主要研究成果
    5.2 论文创新点
    5.3 研究展望
致谢
参考文献
附录 中英文对照表

(9)瓦松繁殖技术与药材质量研究(论文提纲范文)

提要
Abstract
引言
第一章 文献综述
    1 本草考证
        1.1 名称考
        1.2 原植物形态特征考
        1.3 采收加工考
        1.4 性味及功效考
        1.5 临床应用考
    2 现代研究
        2.1 化学成分研究
        2.2 药理活性研究
        2.3 临床应用研究
    3 讨论与小结
第二章 瓦松生境与分布调查
    1 瓦松生态环境调查
    2 瓦松分布范围
    3 讨论与小结
第三章 瓦松植株形态与根茎叶显微观察
    1 材料
        1.1 样品
        1.2 仪器
        1.3 试剂
    2 方法
        2.1 植株形态观察
        2.2 显微观察
    3 结果与分析
        3.1 瓦松植株形态特征
        3.2 瓦松植株根部横切面显微特征
        3.3 瓦松植株茎部横切面显微特征
        3.4 瓦松植株叶横切面及表皮显微特征
    4 讨论与小结
第四章 瓦松植株种子和花粉粒形态观察
    1 材料
        1.1 样品
        1.2 仪器
    2 方法
        2.1 瓦松种子形态特征观察
        2.2 瓦松种子微形态特征观察
        2.3 瓦松花粉粒微形态特征观察
    3 结果与分析
        3.1 瓦松种子形态特征
        3.2 瓦松花粉形态
    4 讨论与小结
第五章 药材性状与粉末显微特征观察
    1 材料
        1.1 药材
        1.2 仪器
    2 方法
    3 结果与分析
        3.1 瓦松药材性状特征
        3.2 瓦松粉末特征
    4 讨论与小结
第六章 瓦松繁殖技术研究
    1 种子繁殖研究
        1.1 材料
        1.2 仪器与试剂
        1.3 方法
        1.4 结果与分析
        1.5 讨论与小结
    2 扦插繁殖研究
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 结果与分析
        2.4 讨论与小结
第七章 瓦松药材脂肪酸类成分分析
    1 材料
        1.1 药材
        1.2 仪器与试剂
    2 方法
        2.1 脂肪酸提取及浓缩
        2.2 脂肪酸的甲酯化
        2.3 GC-MS条件
    3 结果与分析
    4 讨论与小结
第八章 瓦松药材质量分析
    1 山奈素与槲皮素含量测定
        1.1 材料
        1.2 方法
        1.3 结果与分析
        1.4 讨论与小结
    2 瓦松药材粉末颜色与山奈素与槲皮素含量相关性分析
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 结果与分析
        2.4 讨论与小结
    3 金属元素含量测定
        3.1 材料
        3.2 方法
        3.3 结果与分析
        3.4 讨论与小结
结语
参考文献
附录
    附录1:GC-MS鉴别组分质谱图
    附录2:ICP-OES8元素检出色谱图
致谢
论文着作
附件

(10)基于青霉素水解检测大肠杆菌O157:H7方法的建立及氯化抗菌膜对大肠杆菌防控的研究(论文提纲范文)

摘要
ABSTRACT
缩略语索引
第1章 绪论
    1.1 大肠杆菌的概述
        1.1.1 大肠杆菌的生物学特性
        1.1.2 大肠杆菌的抗原构造及其致病性
        1.1.3 大肠杆菌引起的疾病及其卫生学
    1.2 大肠杆菌的检测现状
        1.2.1 依赖于微生物生长的检测方法
        1.2.2 不依赖于微生物生长的检测方法
    1.3 食品中大肠杆菌的防控手段概述
        1.3.1 控制食品中大肠杆菌的方法
        1.3.2 抗菌剂的分类
        1.3.3 抗菌材料在抗菌包装中的应用
    1.4 研究目的及意义
    1.5 参考文献
第2章 基于青霉素水解的级联ELISA检测大肠杆菌O157:H7 方法的建立
    2.1 前言
    2.2 实验材料
        2.2.1 实验菌株
        2.2.2 主要试剂及材料
        2.2.3 主要仪器设备
        2.2.4 相关试剂的配制
    2.3 实验方法
        2.3.1 细菌来源及培养条件
        2.3.2 合成生物素化的抗体、β-内酰胺酶和辣根过氧化物酶
        2.3.3 传统双抗夹心ELISA检测大肠杆菌O157:H7
        2.3.4 级联信号放大ELISA检测大肠杆菌O157:H7 的操作
        2.3.5 级联信号放大ELISA检测大肠杆菌O157:H7 方法优化
        2.3.6 级联信号放大ELISA法检测大肠杆菌O157:H7 方法灵敏度的评价
        2.3.7 级联信号放大ELISA法检测大肠杆菌O157:H7 方法特异性的评价
        2.3.8 级联信号放大ELISA法检测牛奶中的大肠杆菌O157:H7
    2.4 实验结果
        2.4.1 级联信号放大ELISA检测大肠杆菌O157:H7 实验条件的研究
        2.4.2 级联信号放大ELISA检测大肠杆菌O157:H7 方法灵敏度的评价
        2.4.3 级联信号放大ELISA检测大肠杆菌O157:H7 方法特异性的评价
        2.4.4 级联信号放大ELISA方法检测牛奶中大肠杆菌O157:H7
    2.5 小结与展望
    2.6 参考文献
第3章基于青霉素水解的免疫层析法检测大肠杆菌O157:H7
    3.1 前言
    3.2 实验材料
        3.2.1 实验菌株
        3.2.2 主要试剂及材料
        3.2.3 主要仪器设备
        3.2.4 相关试剂的配制
    3.3 实验方法
        3.3.1 细菌来源及培养条件
        3.3.2 免疫磁性纳米粒子的制备[20]
        3.3.3 胶体金探针的制备
        3.3.4基于青霉素水解结合免疫层析方法快速检测大肠杆菌O157:H7
        3.3.5 基于青霉素水解结合免疫层析技术检测法灵敏度的评价
        3.3.6 基于青霉素水解结合免疫层析技术检测法特异性的评价
    3.4 实验结果
        3.4.1 免疫磁珠捕获效率的评价
        3.4.2 胶体金探针单抗标记量对检测灵敏度的影响
        3.4.3 胶体金探针最佳添加量的优化
        3.4.4 基于青霉素水解结合免疫层析法检测大肠杆菌O157:H7的灵敏度
        3.4.5 基于青霉素水解结合免疫层析技术检测法的特异性
    3.5 小结与展望
    3.6 参考文献
第4章 氯化抗菌膜的制备、结构表征及其对大肠杆菌抑菌性能的研究
    4.1 前言
    4.2 实验材料
        4.2.1 实验菌株
        4.2.2 实验材料试剂
        4.2.3 实验仪器设备
        4.2.4 相关试剂及培养基的配制
    4.3 实验方法
        4.3.1 氯化抗菌膜的制备
        4.3.2 抗菌实验
        4.3.3 抗菌膜中Cl含量的测定
        4.3.4 膜厚度、面积、含水率和吸水率的测试
        4.3.5 抗菌膜机械性能的测试
        4.3.6 紫外分析
        4.3.7 红外光谱分析
        4.3.8 水蒸气透过系数的测定
        4.3.9 热重分析
        4.3.10 扫描电镜
        4.3.11 数据处理
    4.4 实验结果
        4.4.1 抗菌效率的分析
        4.4.2 膜的厚度、面积、含水率和吸水率
        4.4.3 氯化抗菌膜的机械性能
        4.4.4 氯化抗菌膜的紫外表征
        4.4.5 红外分析
        4.4.6 热重分析
        4.4.7 氯化抗菌膜的水蒸气透过系数
        4.4.8 扫描电镜表征
    4.5 小结与展望
    4.6 参考文献
第5章 增塑剂对氯化抗菌膜抗大肠杆菌效率和物理性能的影响
    5.1 前言
    5.2 实验材料
        5.2.1 实验菌株
        5.2.2 实验材料试剂
        5.2.3 实验仪器设备
        5.2.4 相关试剂及培养基的配制
    5.3 实验方法
        5.3.1 不同增塑剂氯化抗菌膜的制备
        5.3.2 抗菌实验
        5.3.3 抗菌膜中Cl含量的测定
        5.3.4 膜厚度、面积、含水率和吸水率的测试
        5.3.5 抗菌膜抗拉强度与断裂伸长率的测试
        5.3.6 紫外分析
        5.3.7 水蒸气透过系数的测定
        5.3.8 数据处理
    5.4 实验结果
        5.4.1 不同增塑剂的评价
        5.4.2 不同甘油添加量的评价
    5.5 小结与展望
    5.6 参考文献
第6章 结论与展望
    6.1 结论
        6.1.1 基于青霉素水解的级联信号放大ELISA检测大肠杆菌O157:H7 方法的建立
        6.1.2基于信号转导的免疫层析法检测大肠杆菌O157:H7
        6.1.3 氯化抗菌膜的制备、结构表征及其对大肠杆菌抑菌性能的研究
        6.1.4 增塑剂对氯化抗菌膜抗大肠杆菌效率和物理性能的影响
    6.2 展望
致谢
作者简介
攻读学位期间的研究成果

四、Scanning Electron Microscopic Observation on Morphologic Characteristics of Sperms in Uremic Patients(论文参考文献)

  • [1]血液透析用双层混合基质膜的制备及性能研究[D]. 燕卫星. 天津工业大学, 2021(01)
  • [2]基于飞秒激光诱导纳米粒子沉积的气体微传感器研究[D]. 代云志. 吉林大学, 2020(04)
  • [3]血液净化用纳米纤维复合膜和复合微球的构建及其对生物毒素的清除机制[D]. 朱雅东. 东华大学, 2020
  • [4]静电纺纤维材料的结构调控及其在生物医学领域的应用[D]. 袁志鹏. 北京科技大学, 2020(01)
  • [5]基于魔芋葡甘聚糖的智能分子印迹功能材料的研究[D]. 安凯. 湖北民族大学, 2020(12)
  • [6]EPO与肾虚雄性生殖功能低下的相关性及右归饮的改善作用[D]. 李卓恒. 西南大学, 2020
  • [7]腔内基质填充导管的制备及其修复周围神经缺损的研究[D]. 侯袁婧. 武汉理工大学, 2019
  • [8]Ti丝表面TiO2纳米管阵列的制备及其对血液中β2-MG吸附性能的研究[D]. 李晓凡. 华中科技大学, 2019(03)
  • [9]瓦松繁殖技术与药材质量研究[D]. 赵振华. 山东中医药大学, 2018(01)
  • [10]基于青霉素水解检测大肠杆菌O157:H7方法的建立及氯化抗菌膜对大肠杆菌防控的研究[D]. 山珊. 南昌大学, 2018(02)

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尿毒症患者精子形态特征的扫描电镜观察
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