一、提高羊水细胞培养的染色体有效分裂相数（论文文献综述）
贾广珠[1]（2020）在《CNV-seq联合染色体核型分析在产前诊断中的应用研究》文中提出目的通过二代高通量基因测序（next generation sequencing,NGS）技术,探讨羊水细胞中胎儿染色体拷贝数变异测序（copy number variation sequencing,CNV-seq）联合染色体核型分析技术在产前诊断中的应用价值。方法回顾性分析2016年01月-2019年06月在枣庄市妇幼保健院行产前诊断的单胎孕妇1206例。对具有产前诊断指征的孕妇行羊水穿刺术抽取羊水,通过二代高通量基因测序（NGS）技术对羊水细胞中胎儿染色体拷贝数变异测序（CNV-seq）并同时进行细胞遗传学-染色体G显带核型分析,将两种技术检出胎儿染色体异常结果分成两组,对两组结果进行比较分析,并随访其妊娠结局。结果1.1206例入组样本CNV-seq检测成功率100%,细胞遗传学-染色体G显带核型分析成功率为99.75%（1203/1206）。2.染色体核型分析共检出胎儿染色体正常81.18%（979/1206）,胎儿染色体异常阳性率18.57%（224/1206）,其中染色体数目异常阳性率11.61%（140/1206）包括常染色体数目异常阳性率9.04%（109/1206）、性染色体异常阳性率1.82%（22/1206）、嵌合体阳性率0.75%（9/1206）;染色体结构异常阳性率6.96%（84/1206）其中包括染色体微缺失/微重复阳性率0.91%（11/1206）、平衡易位阳性率1.33%（16/1206）、倒位阳性率0.33%（4/1206）、染色体多态性阳性率4.39%（53/1206）。3.CNV-seq共检出胎儿染色体正常74.88%（903/1206）,胎儿染色体异常阳性率25.12%（303/1206）,其中染色体数目异常阳性率11.69%（141/1206）包括常染色体数目异常阳性率9.12%（110/1206）、性染色体数目异常阳性率1.82%（22/1206）、嵌合体阳性率0.75%（9/1206）;染色体微结构异常13.43%（162/1206）包括致病性CNVs阳性率2.65%（32/1206）、致病性未知CNVs阳性率4.98%（60/1206）;非致病性CNVs阳性率5.80%（70/1206）。4.CNV-seq与染色体核型分析结果相比,CNV-seq检出染色体异常阳性率、致病性CNVs阳性率、致病性未知CNVs阳性率高于染色体核型检出阳性率,P均<0.05,差异均具有统计学意义;染色体数目异常阳性率、非致病性CNVs阳性率两组均无差异性,P均>0.05,无统计学意义。而染色体核型分析检出染色体平衡易位阳性率高于CNV-seq检出,P<0.05,差异具有统计学意义。5.入组孕妇的年龄统计,随着年龄的增长,胎儿染色体异常发生率呈正相关,相关系数r=0.46352。6.CNV-seq联合染色体核型分析组与单用其中一种技术组检出胎儿染色体异常率相比较,差异有统计学意义,P均<0.05。结论1.CNV-seq对染色体核型分析发现的染色体非整倍体异常、非平衡性染色体结构异常检出一致。2.CNV-seq能检出更多的致病性明确CNVs,但检不出平衡易位、倒位染色体结构异常,因此CNV-seq不可取代染色体核型分析。3.随着孕妇年龄的增长,胎儿染色体异常检出率增高,因此高龄孕妇更适合行CNV-seq联合染色体核型分析进行产前诊断。4.CNV-seq联合染色体核型分析进行产前诊断,可以全面、有效的检测胎儿染色体异常,具有较高的临床应用价值。
胡惠彬[2]（2020）在《不同方法对羊水细胞培养成功率的影响》文中研究指明目的比较不同方法对羊水细胞培养成功率的影响。方法选择2019年1—10月于永州市妇幼保健院进行胎儿染色体核型检查的404例孕妇作为研究对象,采集所有孕妇的羊水细胞,分别采用原代培养法以及传代培养法进行羊水细胞培养,收获后进行低渗处理,制作吉姆萨染色玻片阅片核对。比较两种羊水细胞培养方法的成功率和失败率,对羊水标本玻片中的染色体分裂相进行计数。结果采用传代培养法的羊水细胞培养成功率明显高于原代培养法〔100.00%（404/404）比96.04%（388/404）〕,失败率明显低于原代培养法〔0（0/404）比3.96%（16/404）〕,且羊水染色体分裂相出现数（个:92.85±1.15比50.94±1.20）、可计数（个:53.78±1.22比30.30±1.25）、可分析数（个:27.34±1.06比14.55±1.05）均明显高于原代培养法,差异有统计学意义（均P<0.05）。结论采用传代培养法的羊水细胞培养成功率更高,且能够获取足够的羊水染色体核型,值得在临床检验工作中推广使用。
郑静,卓越,刘艳妮[3]（2019）在《羊水细胞原位培养及核型制备方法的改进》文中指出目的羊水染色体核型分析是产前诊断染色体疾病的金标准,但由于羊水培养的影响因素较多,故其成功率较低。探讨影响羊水细胞原位培养成功率的相关因素,探索核型制备的条件,建立一种成功率高且较为稳定的羊水细胞染色体制备方法。方法对具有产前诊断指征的435例孕妇行羊膜腔穿刺术抽取羊水进行细胞培养。根据羊水沉淀物的颜色和大小分为5～10 mm3白色团块、5～10 mm3棕色团块、10～15 mm3棕色团块、5～10 mm3鲜红色团块、10～15 mm3鲜红色团块组,根据采集羊水过程中使用器具的材质分为塑料组、塑料联合玻璃组、玻璃组,各30例,分析羊水离心后沉淀情况及不同材质操作器具的培养结局。选取培养良好的培养瓶和培养皿共100例,根据制片时环境温度和湿度分为20℃室湿20%组（室温:20℃,室湿:20%）、28℃室湿20%组、20℃湿度50%组、28℃湿度50%组,每组25例,对核型制备过程中不同温度和湿度下的核型分散程度评分。结果 435例羊水培养中成功406例,培养成功率93.3%。培养结果显示,10～15mm3棕色团块组和10～15mm3鲜红色团块组细胞培养成功率（72.72%、56.25%）较5～10 mm3白色团块组培养的成功率（95.98%）明显降低（P<0.01）;10～15 mm3鲜红色团块组细胞培养成功率较5～10 mm3鲜红色团块组培养的成功率明显降低（56.25%vs 90.48%,P<0.01）。塑料组和塑料联合玻璃组细胞培养成功率（56.67%、70.00%）较玻璃组细胞培养成功率（93.33%）均明显降低（P<0.01）。20℃室湿20%组、28℃室湿20%组、20℃湿度50%组载玻片核型分散程度的得分[（52.48±2.44、66.36±2.25、71.60±2.34）分]明显低于28℃湿度50%组[（86.36±1.59）分],差异有统计学意义（P<0.01）;20℃室湿20%组、28℃室湿20%组载玻片核型分散程度的得分明显低于20℃湿度50%组（P<0.01）。结论对于有明显鲜血性的羊水,立即加入0.5 mL无菌肝素可提高羊水培养的成功率;全部采用玻璃器具可有效地提高羊水细胞培养的成功率;控制好分散过程中环境的温度和湿度（28℃、50%）,可以制作出合格的核型分析载玻片。
刘琳,马润玫[4]（2018）在《羊水细胞培养技术在产前诊断染色体疾病中的研究进展》文中研究说明随着女性生育年龄推后及"二孩政策"开放后高龄产妇的增多,胎儿染色体病的发病率显着增加。产前诊断是防止异常染色体儿出生的有效手段,有利于降低出生缺陷率,提高出生人口素质和生命质量。其中,孕妇羊水细胞培养及染色体核型分析在产前诊断中具有极其重要的意义。现本文就羊水细胞培养技术在产前诊断染色体疾病中的研究进展作一综述。
刘淑敏,马慧英,彭措吉,张世宽[5]（2018）在《建立适宜高原地区羊水细胞培养方法的实验研究》文中认为目的:建立适宜高原地区的羊水细胞培养方法。方法:分析我院2016年1月—2017年12月孕周16周～24周+6周的孕妇羊水标本共456例,通过原位培养和传代培养两种方法同时进行培养,以提高羊水细胞培养的成功率。结果:456例羊水细胞培养全部获得成功。456例羊水标本中,原位培养成功454例,成功率99.56%;传代培养成功453例,成功率99.34%。原位培养失败2例,失败率0.44%;传代培养失败3例,失败率0.66%。456例羊水细胞培养中,原位培养收获时间9天的5例,占1.1%;收获时间（10～11）天的425例,占93.2%;收获时间（12～13）天的23例,占5.0%;>13天的3例,占0.7%。传代培养收获时间11天的3例,占0.6%;收获时间（12～13）天的416例,占91.2%;（14～15）天的35例,占7.7%;>12天的2例,占0.44%。两种培养方法的有效分裂相>90个的构成比分别是原位培养94.27%,传代培养86.98%。结论:同时采用原位培养和传代培养两种方法对羊水细胞进行培养,优势互补,缩短检验周期的同时,提高了培养成功率。
韦小妮,唐宁,王文丹[6]（2017）在《改良式羊水细胞培养及收获在产前诊断染色体检查中的应用》文中认为目的探讨改良式羊水染色体细胞培养和收获方法的成功率和效率。方法收集2016年3—4月在本院行羊水染色体检查的标本780例,分部进行传统方法和改良后方法的细胞培养、收获,比较两种方法的质量及效率。结果传统方法和改良方法的细胞培养成功数均为779例。接种后第7、8、9天,传统方法能够收获的标本数为733例,改良方法的为725例,两者差异无统计学意义;第14天未能收获的标本数,传统方法和改良式方法的均为1例;收获耗时,传统方法为（81±6）min/10个标本,改良式方法的为（50±4）min/10个标本;收获到适用分裂相数≥20个的标本例数,传统方法的为689例,改良式方法的为779例,两者差异有统计学意义。结论改良式方法在不影响培养成功率和不延长收获周期的同时,提高了收获的成功率,缩短了耗时,简化了操作流程,值得推广应用。
加米拉·热扎克,湃孜莱提·哈斯木,夏燕,叶尔登切切克,段玲[7]（2016）在《新疆地区1378例羊水细胞培养的影响因素研究》文中研究说明目的探讨新疆地区孕中期羊水细胞培养影响因素。方法该实验室对1 378例具有产前诊断指征的孕妇行羊膜腔穿刺,无菌操作下羊水穿刺获得孕中期羊水14mL,接种T瓶培养79d。及时处理不合格羊水,规范培养环境,严格要求无菌操作。采用消化法收获细胞,常规染色体制片后进行产前诊断,分析核型。结果通过消化法培养1 378例羊水细胞,失败13例,成功1 365例,成功率99.1%。结论羊水细胞培养各个环节至关重要,直接影响培养结局;符合产前诊断适应征孕妇的异常率高于正常孕妇,应指导其行侵入性产前诊断,确定胎儿核型。
林小玲,郑昭科,毛义建,郑义,唐少华[8]（2016）在《羊水载玻片原位培养技术的建立和临床应用》文中研究表明目的建立羊水载玻片原位培养技术的规范化流程,并实现临床转化。方法取10例羊水标本,采用与进口载玻片培养瓶同步培养,评价该载玻片贴壁性能。取100例羊水,探索核型处理技术中低渗、预固定、染色体分散动力学等条件,建立规范化流程。另随机选择100例羊水,该载玻片与常规塑料瓶同步培养羊水细胞,评价临床应用可行性。结果配对t检验分析不同载玻片种类的细胞克隆数和优质分裂相数,差异无统计学意义（P>0.05）,且该载玻片价格低廉。核型处理分析技术中显示采用1%枸橼酸钠低渗液、5%冰乙酸预固定液时,每张载玻片所获得的优质分裂相较多;选择较适分散环境温度（Temperature,T）、相对湿度（Humidity,H）组合（T=21℃,H=30%;T=21℃,H=33%）,可有>60%的优质分裂相用于染色体核型分析。临床应用比对试验结果显示,两者培养成功率均为100%,配对t检验分析两种方法的细胞克隆数和优质分裂相数,差异均无统计学意义（P>0.05）,核型符合率达100%,检出正常核型95例,异常核型5例,染色体多态性改变3例,18三体1例,mos 47,XX,+7[3]/46,XX[17]1例。结论该载玻片对羊水细胞的贴壁能力不亚于进口载玻片,且价格低廉,建立载玻片原位培养羊水细胞及核型处理分析技术规范化流程,初步临床应用显示与常规塑料瓶原位培养法获得同样效果,为高通量自动扫描捕获体系提供了基础技术平台,值得临床推广。
肖婕,张万兴,王欢,余艳婷,袁金兰[9]（2015）在《羊水细胞原代培养和传代培养方法比较》文中进行了进一步梳理羊水细胞培养及染色体核型分析是产前确诊染色体疾病诊断的金标准,为妊娠中晚期胎儿临床诊断提供可靠的科学依据。羊膜腔穿刺是损伤性的取样技术,对孕妇和胎儿有造成损伤、感染、流产的潜在危险,流产发生率约0.5%[1]。羊水细胞培养因技术要求高、难度大、周期长、易污染、分裂相少,一旦培养失败,孕妇难接受第二次穿刺取样。因此,提高羊水细胞培养成功率是关键。本研究就羊水细胞的原代培养和传代培养两种方法比较。
谢金芳,蔡富强,纪霞[10]（2014）在《同步化羊水细胞传代培养在产前诊断中的应用》文中研究说明目的探讨应用旧培养基内同步化羊水细胞（M期细胞）传代培养其细胞基数达到多少为最佳的培养方法以及旧培养基在4℃冰箱内的存放期限。方法对照组141份,每例接种2瓶,仅作原代培养。实验组140份,采用原代培养联合旧培养基内M期细胞传代培养及4℃冰箱储备种细胞的方法。结果羊水细胞培养成功率由92.2%（对照组）提高到100%（实验组）,两者间的差异有统计学意义（x2=11.367,P<0.01）;对照组原代培养原位制片获得的细胞克隆数（13.35±6.38）与实验组原代培养原位制片获得的细胞克隆数（25.31±6.68）比较,两者差异无统计学意义（P>0.01）。实验组原位制片获得的细胞克隆数（25.31±6.68）与1:2传代培养原位制片获得的克隆数（90.68±8.41）比较,两者之间的差异有统计学意义（P<0.01）;对照组与实验组获得的可分析分裂相数比较,两者之间的差异有统计学意义（x2=140.063,P<0.01）;旧培养基4℃冰箱保存212天后分离其内细胞传代培养同样可获得满意效果。结论旧培养基内M期细胞的再利用可获得较多的有效分裂相,提高了培养成功率,保留了原代培养原位制片羊水细胞克隆的完整性,有利于核型分析时真假嵌合体的鉴定,保证了分析结果的可靠性,确保了一次性穿刺即可达到羊水细胞培养成功的效果。
二、提高羊水细胞培养的染色体有效分裂相数（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、提高羊水细胞培养的染色体有效分裂相数（论文提纲范文）
（1）CNV-seq联合染色体核型分析在产前诊断中的应用研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 1 材料 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 主要仪器设备 |
| 2 研究方法 |
| 2.1 样本采集 |
| 2.2 羊水细胞培养及G显带核型分析 |
| 2.3 羊水细胞DNA提取、测序及数据分析 |
| 2.4 实验分组 |
| 3 孕妇妊娠的结局随访 |
| 4 统计学方法 |
| 结果 |
| 1 研究对象一般情况 |
| 2 CNV-seq、染色体核型分析检出胎儿染色体异常情况 |
| 3 妊娠的结局随访情况 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间的研究成果 |
| 附录或缩略词表 |
| 致谢 |
（2）不同方法对羊水细胞培养成功率的影响（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 研究对象 |
| 1.1.1 纳入标准 |
| 1.1.2 排除标准 |
| 1.1.3 伦理学 |
| 1.2 检查方法 |
| 1.2.1 样本采集 |
| 1.2.2 细胞培养 |
| 1.2.3 细胞收获及染色观察 |
| 1.3 观察指标 |
| 1.4 统计学方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 两种羊水细胞培养法成功率和失败率比较 |
| 2.2 两种羊水细胞培养法所得羊水染色体分裂相比较 |
| 3 讨论 |
（3）羊水细胞原位培养及核型制备方法的改进（论文提纲范文）
| 0 引言 |
| 1 资料与方法 |
| 1.1 临床资料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 羊水标本采集 |
| 1.2.2 羊水细胞培养 |
| 1.2.3 羊水细胞收获 |
| 1.3 统计学分析 |
| 2 结果 |
| 2.1 羊水培养结果 |
| 2.2 羊水离心后沉淀的颜色、多少的培养结局分析 |
| 2.3 不同材质的培养结局分析 |
| 2.4 不同环境温度和湿度的的核型分散程度得分 |
| 3 讨论 |
（4）羊水细胞培养技术在产前诊断染色体疾病中的研究进展（论文提纲范文）
| 1 羊水细胞的来源、分类 |
| 2 研究对象 |
| 3 羊水细胞培养的方法 |
| 4 影响羊水细胞培养成功率的相关因素 |
| 4.1 构建两个独立、平行的培养收获体系 |
| 4.2 制片 |
| 4.3 控制污染 |
| 5 讨论及展望 |
（5）建立适宜高原地区羊水细胞培养方法的实验研究（论文提纲范文）
| 对象与方法 |
| 1 研究对象 |
| 2 方法 |
| 2.1 取样 |
| 2.2 细胞培养 |
| 2.3 细胞原位培养 |
| 2.4 细胞传代培养 |
| 2.5 细胞收获、制片 |
| 2.6 低渗 |
| 2.7 预固定 |
| 2.8 二次固定 |
| 2.9滴片、烤片和显带 |
| 2.10 核型分析 |
| 2.11 图片采集 |
| 3 统计学方法 |
| 结果 |
| 1羊水细胞培养成功率 |
| 2羊水细胞收获时间比较 |
| 3 两种培养方法有效分裂相数构成 |
| 讨论 |
（6）改良式羊水细胞培养及收获在产前诊断染色体检查中的应用（论文提纲范文）
| 对象与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
（7）新疆地区1378例羊水细胞培养的影响因素研究（论文提纲范文）
| 1 资料与方法 |
| 1.1 一般资料 |
| 1.2 方法 |
| 1.2.1 羊水细胞的接种 |
| 1.2.2 羊水细胞培养及发现污染羊水的处理 |
| 1.2.3 羊水细胞收获与制片 |
| 2 结果 |
| 3 讨论 |
（8）羊水载玻片原位培养技术的建立和临床应用（论文提纲范文）
| 1 对象与方法 |
| 1.1 对象 |
| 1.2 试剂与仪器 |
| 1.3 方法 |
| 2 结果 |
| 2.1 载玻片细胞贴壁性能检测 |
| 2.2 建立载玻片核型处理分析技术规范化流程 |
| 2.2.1 核型处理分析过程中不同低渗液对分裂相的影响 |
| 2.2.2 核型处理分析过程中不同预固定液对分裂相的影响 |
| 2.2.3 核型处理分析过程中染色体分散时分散环境的温度和相对湿度对分裂相的影响 |
| 2.3 载玻片与塑料瓶原位同步培养100例羊水结果分析 |
| 3 讨论 |
（9）羊水细胞原代培养和传代培养方法比较（论文提纲范文）
| 1材料与方法 |
| 2结果 |
| 3讨论 |
四、提高羊水细胞培养的染色体有效分裂相数（论文参考文献）
- [1]CNV-seq联合染色体核型分析在产前诊断中的应用研究[D]. 贾广珠. 青岛大学, 2020(01)
- [2]不同方法对羊水细胞培养成功率的影响[J]. 胡惠彬. 实用检验医师杂志, 2020(01)
- [3]羊水细胞原位培养及核型制备方法的改进[J]. 郑静,卓越,刘艳妮. 医学研究生学报, 2019(03)
- [4]羊水细胞培养技术在产前诊断染色体疾病中的研究进展[J]. 刘琳,马润玫. 中国优生与遗传杂志, 2018(12)
- [5]建立适宜高原地区羊水细胞培养方法的实验研究[J]. 刘淑敏,马慧英,彭措吉,张世宽. 高原医学杂志, 2018(03)
- [6]改良式羊水细胞培养及收获在产前诊断染色体检查中的应用[J]. 韦小妮,唐宁,王文丹. 中国生育健康杂志, 2017(03)
- [7]新疆地区1378例羊水细胞培养的影响因素研究[J]. 加米拉·热扎克,湃孜莱提·哈斯木,夏燕,叶尔登切切克,段玲. 国际检验医学杂志, 2016(22)
- [8]羊水载玻片原位培养技术的建立和临床应用[J]. 林小玲,郑昭科,毛义建,郑义,唐少华. 中国优生与遗传杂志, 2016(05)
- [9]羊水细胞原代培养和传代培养方法比较[J]. 肖婕,张万兴,王欢,余艳婷,袁金兰. 中国实验诊断学, 2015(10)
- [10]同步化羊水细胞传代培养在产前诊断中的应用[J]. 谢金芳,蔡富强,纪霞. 中华医学遗传学杂志, 2014(05)