一、肉用犬出血性肠炎的防治(论文文献综述)
韩瑾瑾,赵静静,张秋霞[1](2019)在《犬细小病毒性肠炎的诊治》文中研究指明犬细小病毒性肠炎是一类比较严重的传染性疾病,给犬养殖户及养犬爱好者造成了很大的困扰。本文探讨了犬细小病毒性肠炎的流行特点、临床症状、病理变化及诊断,并提出了接种预防和药物治疗等措施,从而减少该病的发生。
谈美玲[2](2018)在《犬细小病毒病的诊断及二种单克隆抗血清的治疗效果比较》文中认为犬细小病毒病(Canine parvovirous disease,CPD)是由犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)引起的具有高度接触性烈性传染性疾病,是目前国内危害犬类的最主要的烈性传染病之一,对畜主造成较大的经济损失和情感伤害。目前市面上犬细小病毒单克隆抗体品牌繁多,价格差距较大。本实验通过对两种价格差异较大的犬细小病毒单克隆抗体治疗效果的比较,分析价格因素对犬细小病毒单克隆抗体治疗效果的影响。本实验在中山市三角镇多吉动物医院犬细小病毒病病例接诊较多的基础上,收集2017年3月至2017年12月广东省中山市三角镇多吉动物医院收治确诊犬细小病毒病病例,通过胶体金快速检验试纸条对广东省中山市三角镇多吉动物医院患病犬做出快速准确的诊断,采用犬细小病毒阳性犬和犬瘟热病毒阴性犬作为本研究用犬。然后以市场上的两种犬细小单克隆抗体为研究对象,把三角镇多吉动物医院接诊的细小病毒病患病犬按照畜主意愿分为两组,威特瑞犬细小病毒单克隆抗体组(A组)和世纪元亨犬细小病毒单克隆抗体组(B组)在对患病犬其他治疗以及用药方法一致的基础上比较其对犬细小病毒病的治疗效果,分析价格因素对犬细小病毒单克隆抗体治疗效果的影响。最后,本实验结果显示威特瑞犬细小病毒单克隆抗体组(价格较低)和世纪元亨犬细小病毒单克隆抗体组(价格较高)两种单克隆抗体对不同年龄和不同品种的患病犬治疗效果基本相同,没有很大的差异。通过课题研究,对比两种单抗的治疗效果,为细小病毒病患病犬畜主选用细小病毒单克隆抗体提供依据,引导畜主选用治疗效果更好的单抗进行紧急治疗,增加患病犬的生存几率,减少犬养殖业的经济损失,减少畜主对宠物伴侣死亡造成的心理伤害,有利于社会和谐稳定。
薛闯[3](2014)在《犬细小病毒病病例治疗与分析》文中进行了进一步梳理犬细小病毒病(Canine Parvovirus Infection,CP),又称犬传染性出血性肠炎,是由犬细小病毒引起的犬的一种具有高度接触性的烈性传染病。1临床症状本病以急性出血性肠炎和非化脓性心肌炎为特征,其中肠炎型发病较为普遍,以出血性肠炎为主要特征,表现为病初体温升高,可达4041℃;先呕吐、腹泻,粪便初呈黄色或灰黄色,而后转为番茄汁样,气味腥臭,特别难闻;后期肛门松弛,便血,倒地昏迷,体温下降至37℃以下,最后可因电解
刘海春[4](2013)在《犬细小病毒病的诊断与防治》文中研究表明犬细小病毒病是由犬细小病毒感染引起的犬的一种急性传染病,其临床表现有急性出血性肠炎型和非化脓性心肌炎型2种,其中肠炎型发病较为普遍,对养犬业造成很大危害。现概述了犬细小病毒病原学、流行病学、发病机理、临床症状等,并依此提出了诊断方法及防控措施,以利于制定出合理的预防方案。
梁璐琪[5](2012)在《藏獒源犬细小病毒的分离鉴定及其VP2基因序列分析》文中认为为了弄清犬细小病毒(CPV)在藏獒的中流行毒株属于哪种基因型,将临床上经胶体金试纸检查为阳性的藏獒直肠棉签拭子7份处理后接种F81猫肾传代细胞,分离得到6株分离株,对其进行了血凝实验(HA)、半数组织培养物感染剂量(TCID50)的测定,理化性质鉴定,提取分离株DNA并通过聚合酶链式反应(PCR)扩增其病毒蛋白2(VP2)上的一特异性片段和VP2全基因,并将VP2全基因PCR产物与载体pMD19-T重组,将得到的重组子测序并与GenBank上登陆的CPV毒株进行对比,并通过DNAMAN、DNAStar和MEGA等软件分析所得序列结果。结果表明,6株分离株都能在F81细胞上增殖,接毒后第6~13d在F81细胞上出现了明显的细胞病变(CPE),表现为细胞融合、变圆或拉长;能很好的凝集10mL/L的猪红细胞,血凝效价为27~211,对猫红细胞具有一定的凝集能力,血凝效价为21~24,但不能凝集牛、山羊、小鼠、家兔的红细胞;能抗酸(PH=3)、热(60℃)、200mL/L乙醚、480mL/L氯仿、能被50mg/L5-碘脱氧尿核苷(5-IDUR)抑制。从细胞分离物中分别扩增出了与特异性片段(825bp)和VP2全基因大小一致的条带,证实了6株分离株均为CPV。将分离株VP2和pMD19-T载体构建的重组子测序后与GenBank上公布CPV的VP2全基因进行比对,重组子序列碱基数和编码氨基酸量与已公布CPV的VP2情况一致。与CPV-5.us.79(GenBank登录号EU659116.1)(?)匕对碱基序列和编码氨基酸序列后,分离株VP2基因以CPV-2a为基础发生着变异,部分变异属于同义突变,部分变异位点在空间上于VP2上的一些重要位点十分接近,但确切的生物学意义不明。将分离株VP2基因序列与GenBank上登录的HQ883267.1、FJ222823.1、GQ865519.1、FJ005214.1等10个国内外CPV分离株的VP2序列进行比对,结果显示与北京地区一分离株(HQ883267.1)的同源性最高,为99.0%-99.6%。将分离株VP2基因序列与GenBank上公布的FPV、MEV、CPV、BFPV等84株国内外分离株的系统发育树,以分析食肉动物细小病毒间的系统发育关系,与GenBank上公布的85株在美国、日本、中国、印度、巴西、韩国、台湾、越南、新西兰、意大利、德国,11个国家和地区分离到的各型CPV的VP2全基因序列构建系统发育树,以分析CPV在全球的迁移方向。6株藏獒源分离株与国内的其他分离株关系较近,与国外分离株关系较远;与CPV关系较近,与FPV和MEV关系较远;与国内外其他的CPV一样,都起源于同一个的祖先。6株藏獒源CPV分离株均为CPV-2a型。通过本研究建立起一套以直肠棉签拭子为采样方式的CPV分离方法,方便了CPV的采样与病毒分离。同时也是是第一次在四川地区针对藏獒源CPV的流行和变异情况进行调查,初步掌握了CPV在藏獒种群中的进化、变异情况,为了更好的防治CPV,特别是藏獒的犬细小病毒病提供了有效的实验数据和理论依据。
于志平[6](2011)在《犬细小病毒性肠炎的诊断与防治》文中研究表明犬细小病毒病于1977年由美国Eugster首次报道,是由犬细小病毒(Canine Parvovirus,CPV)感染引起的犬的一种急性传染病。其中又以肠炎型发病较为普遍,占犬细小病毒病病例的81.25%,以出血性肠炎为特征。随着养犬业的蓬勃兴起和养犬规模的不断扩大,该病广为流行,约占犬病例总数的70%以上,加之发病急、死亡率高,对宠物犬和肉用犬的危害
王敏敏[7](2011)在《犬细小病毒2型VP2基因在昆虫细胞中的表达及血清抗体间接ELISA检测方法的建立》文中进行了进一步梳理犬细小病毒(Canine parvovirus, CPV)属细小病毒科细小病毒属,是引起犬出血性肠炎和幼犬心肌炎的主要病原。CPV-2只感染犬,具有高度的接触性传染性,各种年龄的犬都能感染,断奶后的幼龄犬(尤其12周龄以下的)最易感此病,发病率和病死率分别为20%~100%和10%~50%,临床表现为剧烈的呕吐、腹泻和排出恶臭的粪便。快速准确的诊断是有效预防本病的前提条件。因此,建立一种准确、特异和灵敏的诊断方法,对于犬细小病犬的早诊断、早隔离、早治疗具有重要意义。病毒的VP2蛋白既是CPV的主要免疫保护性抗原,又是良好的诊断抗原,因此,该基因的克隆及表达,对于制备新型疫苗和特异性诊断抗原具有重要意义。本研究根据Genbank已发表的CPV-2 VP2基因的序列,利用primer 5.0软件设计并合成一对引物,通过PCR扩增出长约1755bp的基因片段,命名为VP2。将其克隆至pMD-19-T载体,构建了重组质粒pMD-19-T-VP2。对其中的VP2进行序列测定,并将测序结果同CPV-2的其他几个分离株:CPV-2a、CPV-2b、CPV-2c的VP2基因进行了序列比较。核苷酸序列同源性分别为98.3%、98.3%、98.2%,推导的编码氨基酸同源性分别为96.8%、96.4%、96.8%。通过对重组质粒pMD-19-T-VP2和真核表达载体pFastBacTMTA进行酶切,将VP2基因定向克隆至杆状病毒转移载体PFastBacTMTA的EcoRI和Xho I之间的多克隆位点上,获得重组转移载体pFastBacTMTA-VP2。再将其转化到DH10Bac感受态细胞中,经蓝白斑筛选获得重组穿梭载体rBacmid-VP2,经脂质体介导转染昆虫细胞Sf9,获得重组杆状病毒rBac-VP2。IFA、SDS-PAGE、Western-blotting分析,表明CPV-2 VP2基因在昆虫杆状病毒表达系统中得到了表达。利用表达的CPV-2 VP2重组融合蛋白作为抗原,建立了CPV-2血清抗体检测的间接ELISA方法。对ELISA的反应条件进行优化,确定理想包被液是PBS (pH7.4),封闭液为5%小牛血清/PBS,血清稀释液为0.05%小牛血清/PBS,洗涤液为0.5MNaCl/0.5%Tween-20/PBS, ELISA最佳反应时间为1.0h, TMB显色液在37℃作用15min。建立的间接ELISA血清抗体检测方法为进行CPV的诊断与血清学调查提供了一种技术手段。
王新丽[8](2010)在《浅谈中西药结合治疗犬细小病毒病》文中研究指明犬细小病毒病是由犬细小病毒(Canine Parvovirus,简称CPV)引起的急性致死性传染病,对养犬业危害极大,其特征是非化脓性心肌炎或出血性肠炎。临床治疗主要是出血性肠炎细小病毒病,以断乳至90日龄犬发病较多。本实验对24只病犬采用中药、西药、中西药结合治疗三种方法对比试验,结果发现:中药治疗能够快速地控制肠部出血情况,恢复了病犬的食欲状况,预后不良情况基本没有,但是治疗时间长;西药治疗能够快速的控制肠部出血,补充机体能量,调节电解质平衡,但是出现很多预后不良的情况,使疾病出现二次感染,在机体患病治愈后对此病的免疫比中药治疗组的效果要差;实验表明用中西药结合治疗,能够取长补短,不但快速控制了肠出血和呕吐,而且缩短了治愈时间,预后不良情况接近中药治疗组。说明中西药结合治疗对保护血小板,扩张血管有促进作用,可有效地抑制细小病毒,能明显减轻呕吐和腹泻症状及增强白细胞吞噬能力,能消除或改善患病犬的临床症状,提高机体免疫功能。
鲁敏[9](2009)在《犬细小病毒高免卵黄抗体的制备及应用研究》文中认为犬细小病毒病是指由2型犬细小病毒(Canine parvovirus, CPV)引起的一种具有高度接触性的烈性传染病,既严重威胁着家养宠物的身体健康,又是对当前我国养犬业、毛皮动物养殖业和野生动物保护业危害较大的疫病之一。犬细小病毒病一般采用对症和支持治疗,但治愈率较低,尤其是对周龄幼犬效果更差。本课题通过体外大量增殖犬细小病毒,并制成CPV蜂胶灭活苗,再对蛋鸡免疫,试图获得高免犬细小病毒卵黄抗体,再通过防治试验验证该抗体预防、治疗犬细小病毒病的效果。具体研究内容如下:1、制备了犬细小病毒蜂胶灭活疫苗我们研究了不同血清浓度对CPV在F81细胞中增殖的影响,测定了病毒的TCID50,并对病毒进行了鉴定。将灭活的病毒液与蜂胶乙醇溶液按3:1的比例等量混合,得到了犬细小病毒蜂胶灭活疫苗。2、获得了高免犬细小病毒卵黄抗体用20只蛋鸡试验,对蛋鸡进行胸部肌肉注射和颈部皮下注射蜂胶佐剂灭活苗,首免总剂量为1ml/只。共进行2次加强免疫,每间隔一星期加强免疫一次,剂量分别为1.5ml/只、2ml/只。ELISA检测结果表明,免疫10天后犬细小病毒卵黄抗体效价维持在1:320以上,CPV卵黄抗体体外中和试验的抗体效价为1:32,说明本方法能获得稳定的高免犬细小病毒卵黄抗体。3、证明犬细小病毒卵黄抗体用于犬细小病毒病的防治有明显的效果我们通过试验得知:饲喂犬细小病毒卵黄抗体粉,能防止犬细小病毒病的感染,保护率可高达2/5(40%)。在同等剂量的强毒攻击下,没有饲喂犬细小病毒卵黄抗体粉发病率高达5/5(100%)。另外,在发病的犬中,采用犬细小病毒卵黄抗体+常规治疗进行治疗,治愈数6/6(100%),病程为6.2天;而常规药物治疗组治愈数较低,为4/6(67%),病程为7.5天。因此我们研制的犬细小病毒卵黄抗体用于犬细小病毒病的防治有明显的效果。
王红[10](2009)在《犬α-干扰素的表达及其治疗犬病毒性肠炎临床疗效观察》文中认为犬细小病毒(Canine Parvovirus, CPV)为单链DNA病毒,基因组全长5323 nt,只含有3个读码框,分别编码为VP1 (70~90ku)、VP2 (62~76ku)和VP3(39~69ku),其中VP2是构成衣壳蛋白的主要部分。它是一种自主性复制病毒,主要引起犬心肌炎、出血性肠炎和肺病变,并导致犬的大量死亡,给养犬业和宠物业带来巨大损失,因此早期预防和及时治疗十分重要。采用犬干扰素治疗犬病毒性疾病是一种有效的手段,干扰素通过阻断病毒的繁殖及复制,以及刺激动物产生足够的内源性干扰素达到消除病毒的作用,治疗犬病毒性肠炎具有良好的临床疗效。但由于犬干扰素价格昂贵,并且兽医们对它的认识仍然不够,目前,犬干扰素用于各种类型病毒感染犬治疗效果的大样本研究报道较少。因此本课题研究了犬的α干扰素,成功构建了pET32a-CaIFN-α重组质粒,并转入大肠杆菌BL-21中,经IPTG诱导后,表达出了重组犬α干扰素,表达产物为-N-端含His的37ku左右的融合蛋白。经薄层扫描分析目的蛋白表达量占菌体总蛋白的30%。Western blotting印迹证实了表达产物具有抗原抗体结合能力。并通过提取包涵体法和镍琼脂糖凝胶法对表达产物进行变性、纯化和复性,获得了纯度较高的重组犬α干扰素。另一方面,对犬α干扰素在临床上的应用进行了研究,研究犬均来自北京市昌平区动物疫病预防控制中心宠物门诊。对就诊于宠物门诊且患病毒性肠炎的犬542例,随机分成两组,对照组256例,予口服庆大霉素、思密达、纠正水电解质及酸碱平衡紊乱治疗。治疗组286例,在上述治疗基础上,予肌注干扰素-α(400万单位,1次/日,共5天)。结果,干扰素组退热时间、呕吐消失时间、腹泻持续天数和静脉补液所需天数,均比对照组明显缩短(P<0.001);脱水纠正所用时间比对照组短,但两组间比较无明显差异(P>0.05)。通过本研究可以得出犬a干扰素治疗犬病毒性肠炎具有良好的临床效果。
二、肉用犬出血性肠炎的防治(论文开题报告)
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、肉用犬出血性肠炎的防治(论文提纲范文)
(1)犬细小病毒性肠炎的诊治(论文提纲范文)
1 病原 |
2 流行特点 |
2.1 发生特点 |
2.2 传播途径 |
3 临床症状 |
4 病理变化 |
5 诊断 |
6 防治 |
6.1 接种预防 |
6.2 药物治疗 |
7 小结 |
(2)犬细小病毒病的诊断及二种单克隆抗血清的治疗效果比较(论文提纲范文)
摘要 |
abstract |
常用缩写词 |
1 引言 |
1.1 犬细小病毒病原学 |
1.1.1 病原分类 |
1.1.2 分子生物学特征 |
1.2 犬细小病毒病流行病学 |
1.3 犬细小病毒的致病机理 |
1.4 犬细小病毒的检测与诊断 |
1.4.1 临床诊断 |
1.4.2 实验室诊断 |
1.5 犬细小病毒病的预防与清洁消毒 |
1.5.1 预防 |
1.5.2 清洁消毒 |
1.5.3 中药治疗犬细小病毒病 |
1.6 本研究的目的与意义 |
1.7 犬细小病毒快速检验试纸条的原理 |
1.8 犬细小病毒快速检验试纸条发展现状 |
1.8.1 试纸条原料价格趋势 |
1.8.2 试纸条价格趋势 |
1.8.3 进口量分析 |
1.8.4 出口量分析 |
1.8.5 需求地域结构分析 |
1.9 犬细小病毒单克隆抗体作用原理 |
2 材料与方法 |
2.1 材料 |
2.2 方法 |
2.2.1 记录收集的犬细小病毒病信息 |
2.2.2 韩国安捷AniGen犬细小病毒试纸条检测 |
2.2.3 韩国安捷AniGen犬瘟热病毒测试纸检查 |
2.2.4 诊断依据 |
2.2.5 分组 |
2.2.6 治疗 |
2.2.7 护理 |
2.2.8 治愈判定 |
3 结果 |
3.1 发病数与治愈数的关系 |
3.2 发病数与发病年龄的关系 |
3.3 发病年龄与治愈率 |
3.4 发病年龄与死亡率的关系 |
3.5 发病年龄对抗体选择的影响 |
3.6 抗体选择与品种的关系 |
3.7 发病数与季节的关系 |
3.8 疫苗存放与疫苗效果的关系 |
3.9 治愈效果与疫苗接种的关系 |
4 讨论 |
4.1 韩国安捷AniGen快速检测试纸原理与选用原因 |
4.2 威特瑞犬细小病毒单克隆抗体选用原因 |
4.3 世纪元亨犬细小病毒单克隆抗体(PVab)选用原因 |
4.4 治愈效果分析 |
4.5 结论与建议 |
4.5.1 结论 |
4.5.2 建议 |
致谢 |
参考文献 |
(3)犬细小病毒病病例治疗与分析(论文提纲范文)
1 临床症状 |
2 防治方法 |
3 治疗原则 |
(4)犬细小病毒病的诊断与防治(论文提纲范文)
1 病原学 |
2 流行病学 |
3 发病机理 |
4 临床症状 |
4.1 临诊症状 |
4.1.1 肠炎型。 |
4.1.2心肌炎型。 |
4.2 病理变化 |
4.2.1 肠炎型。 |
4.2.2 心肌炎型。 |
5 诊断 |
5.1 现场诊断 |
5.2 病毒分离 |
5.3 血清学诊断 |
6 防控 |
6.1 免疫预防 |
6.2 加强护理 |
6.3 治疗措施 |
6.4 养犬过程中应注意的细节 |
7 结论与讨论 |
(5)藏獒源犬细小病毒的分离鉴定及其VP2基因序列分析(论文提纲范文)
英文缩略对照表 |
摘要 |
Abstract |
文献综述 |
第一章 犬细小病毒的病原学研究进展 |
1. 犬细小病毒的发现、起源与食肉动物细小病毒的分类 |
1.1 犬细小病毒的发现与起源 |
1.2 食肉动物细小病毒的分类 |
2. 犬细小病毒的的生物学特点 |
2.1 形态特征 |
2.2 理化特性 |
2.3 抗原特性 |
2.4 血凝特性 |
2.5 CPV的培养特性 |
3. CPV的分子生物学特性 |
3.1 基因组 |
3.2 编码蛋白质及其功能 |
3.3 CPV的变异 |
3.4 CPV衣壳蛋白中VP2的变异 |
第二章 犬细小病毒病的研究进展 |
1. 流行病学 |
2. 致病机理及临床表现 |
3. 临床症状及分类 |
3.1 肠炎型 |
3.2 心肌炎型 |
4. 犬细小病毒病的诊断技术 |
4.1 CPV的分离与鉴定 |
4.2 CPV的动物回归试验 |
4.3 CPV的电镜和免疫电镜观察 |
4.4 CPV的血凝与血凝抑制(HA-HI)试验 |
4.5 CPV的免疫荧光法 |
4.6 CPV的酶联免疫吸附(ELISA)法 |
4.7 CPV的琼脂糖凝胶扩散实验 |
4.8 CPV的聚合酶链式反应法 |
4.9 CPV的其他诊断方法 |
5. 犬细小病毒病的防治措施及问题 |
实验一 藏獒源犬细小病毒的分离与鉴定 |
1. 材料 |
1.1 细胞 |
1.2 主要试剂 |
1.3 CPV来源动物 |
1.4 主要试验仪器和器材 |
2. 方法 |
2.1 主要试剂的配制方法 |
2.1.1 2500 mg/L(0.25%,v/v)胰酶溶液的配制 |
2.1.2 DMEM细胞培养液的配制 |
2.1.3 0.01mol/L磷酸缓冲液(PBS)的配制 |
2.1.4 阿氏液的配制 |
2.1.5 TE(10 mmol/L Tris-HCl(PH=8.0),1 mmol/L EDTA(PH=8.0))的配制 |
2.1.6 10mL/L(1%,v/v)红细胞悬液的配制 |
2.2 CPV病料的采集与处理 |
2.3 病料的PCR检测 |
2.3.1 酚——氯仿法提取病毒DNA |
2.3.2 引物设计和合成 |
2.3.3 VP2特异性片段的PCR扩增 |
2.4 病毒的分离 |
2.5 细胞培养物的鉴定 |
2.5.1 红细胞凝集试验 |
2.5.2 PCR鉴定 |
2.5.3 病毒理化特性试验 |
3. 结果与分析 |
3.1 采集病料的基本信息 |
3.2 病料的PCR检测结果 |
3.3 病毒分离结果 |
3.4 细胞培养物的鉴定结果 |
3.4.1 红细胞凝集试验结果 |
3.4.2 PCR鉴定结果 |
3.4.3 理化特性试验结果 |
3.4.4 细胞培养物的鉴定结论 |
4. 讨论 |
4.1 实验对象的选择 |
4.2 直肠棉拭子采样法的优点 |
4.3 病毒分离经验 |
4.4 CPV体外培养细胞系的选择 |
4.5 血凝试验条件 |
实验二 藏獒源CPV分离株VP2基因克隆及序列分析 |
1. 材料 |
1.1 分离株与细胞 |
1.2 主要试剂 |
1.3 主要试验仪器和器材 |
2. 方法 |
2.1 主要试剂的配制方法 |
2.1.1 LB培养的配制 |
2.1.2 碱裂法质粒DNA提取液的配制 |
2.1.3 8g/L琼脂糖凝胶的制备 |
2.2 分离株VP2全基因的PCR扩增 |
2.2.1 酚——氯仿法提取分离株DNA |
2.2.2 引物设计和合成 |
2.2.3 VP2全基因的PCR扩增 |
2.3 分离株VP2基因的克隆 |
2.3.1 链接T载体、转化、克隆 |
2.3.2 质粒DNA的提取 |
2.3.3 重组质粒的鉴定 |
2.4 测序 |
2.5 基因序列分析 |
3 结果 |
3.1 分离株VP2全基因的PCR结果 |
3.2 重组质粒的鉴定结果 |
3.2.1 PCR鉴定结果 |
3.2.2 酶切鉴定结果 |
3.3 分离株VP2序列分析结果 |
3.3.1 分离株VP2基因序列测序结果 |
3.3.2 分离株VP2基因系统进化树分析结果 |
3.3.3 分离株VP2基因序列比较结果 |
3.3.4 分离株VP2的的蛋白抗原表面指数比较结果 |
4 讨论 |
4.1 部分藏獒免疫失败的原因分析 |
4.2 VP2在CPV变异中的作用 |
4.3 CPV在全球的流行情况 |
结论 |
参考文献 |
致谢 |
攻读硕士期间发表的学术论文目录 |
附录一 |
附录二 |
(6)犬细小病毒性肠炎的诊断与防治(论文提纲范文)
1 流行病学 |
2 临床症状 |
2.1 出血性肠炎型 |
2.2 心肌炎型 |
3 病理变化 |
3.1 出血性肠炎型 |
3.2 心肌炎型 |
4 诊断 |
4.1 鉴别诊断 |
4.1.1 犬瘟热 |
4.1.2 犬传染性肝炎 |
4.1.3 犬冠状病毒病 |
4.1.4 钩端螺旋体病 |
4.1.5 细菌性腹泻 |
4.1.6 营养不良性腹泻 |
4.1.7 寄生虫性腹泻 |
4.1.8 出血性胃肠炎 |
4.2 血液检查 |
4.3 电镜与免疫电镜观察 |
4.4 血凝试验 (HA) 和血凝抑制 (HI) 试验 |
4.5 病毒分离与鉴定 |
4.6 免疫学方法及其他 |
5 治疗 |
5.1 对症治疗 |
5.2 补充体液 |
5.3 中药疗法 |
5.4 血清疗法 |
5.5 加强护理, 改善饲养条件 |
6 预防 |
7 体会 |
(7)犬细小病毒2型VP2基因在昆虫细胞中的表达及血清抗体间接ELISA检测方法的建立(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
缩略语表 |
第一部分 文献综述 |
第一章 犬细小病毒2型(CPV-2)研究进展 |
1 病原学 |
1.1 CPV一般生物学特性 |
1.2 CPV分子生物学特性 |
1.3 犬细小病毒空衣壳蛋白结构图 |
2 流行病学 |
3 致病机理和临床症状 |
3.1 致病机理 |
3.2 临床症状 |
4 CPV诊断方法 |
5 CPV预防控制 |
5.1 天然免疫 |
5.2 主动免疫 |
5.3 被动免疫 |
5.4 免疫程序 |
6 课题研究目的与意义 |
参考文献 |
第二部分 实验研究 |
第二章 犬细小病毒2型(CPV-2)VP2基因的克隆与序列分析 |
1 材料 |
1.1 质粒、菌株与细胞 |
1.2 主要试剂与工具酶 |
1.3 主要仪器与设备 |
2 方法 |
2.1 CPV-2 VP2基因组的提取 |
2.2 引物设计与基因合成 |
2.3 CPV-2 VP2基因的克隆 |
2.4 PCR产物的同收纯化与连接反应 |
2.5 大肠杆菌DH5α感受态细菌的制备和转化 |
2.6 重组质粒的提取 |
2.7 重组质粒的鉴定和序列分析 |
3 结果 |
3.1 CPV-2 VP2基因片段PCR扩增 |
3.2 重组质粒的酶切鉴定和测序 |
4 讨论 |
参考文献 |
第三章 CPV2型(CPV-2)VP2基因在昆虫细胞中的表达及鉴定 |
1 主要材料与试剂 |
1.1 细胞、质粒、菌种、病毒 |
1.2 工具酶、主要试剂及溶液 |
2 方法 |
2.1 分别双酶切质粒pMD19-T-VP2和pFastBac~(TM)HTA并回收目的片段VP2和pFastBac~(TM)MHTA载体 |
2.2 日的基因与pFastBac~(TM)HTA转移载体的连接 |
2.3 重组质粒pFastBac~(TM)HTA-VP2的酶切鉴定 |
2.4 重组穿梭载体Bacmid的构建 |
2.5 重组杆状病毒的制备和鉴定 |
2.6 表达产物的鉴定 |
3 结果 |
3.1 重组质粒pFastBac~(TM)HTA-VP2酶切鉴定 |
3.2 重组穿梭载体的PCR鉴定 |
3.3 RT-PCR鉴定重组病毒 |
3.4 表达产物的鉴定 |
4 讨论 |
参考文献 |
第四章 犬细小病毒2型(CPV-2)血清抗体间接ELISA检测方法的建立 |
1 材料与方法 |
1.1 材料 |
1.2 方法 |
2 结果 |
2.1 抗原包被浓度、最佳封闭液和血清稀释液的确定 |
2.2 最佳血清稀释度的确定 |
2.3 酶标二抗稀释度的确定 |
2.4 一抗反应时间优化 |
2.5 羊抗犬IgG-HRP最佳反应时间的确定 |
2.6 最佳显色时间的确定 |
2.7 最佳封闭时间的确定 |
2.8 最佳包被条件的选择 |
2.9 间接ELISA阴、阳性临界值的确定 |
2.10 间接ELISA重复性试验 |
2.11 间接ELISA保存期试验 |
2.12 犬血清临床样本的检测 |
2.13 以CPV-2 VP2为包被抗原检测犬细小2型IgG抗体间接ELISA方法总结 |
3 讨论 |
参考文献 |
全文总结 |
附录 |
致谢 |
(8)浅谈中西药结合治疗犬细小病毒病(论文提纲范文)
1 概述 |
1.1 流行病学 |
1.2 临床症状 |
1.3 诊断方法 |
1.4 国内研究现状 |
2 材料与方法 |
2.1 病例来源 |
2.2 病例诊断 |
2.3 药物 |
2.3.1 中药 |
2.3.2 西药 |
2.4 仪器 |
2.5中药治疗组方法 |
2.5.1中药组方 |
2.5.2中药组方分析 |
2.6 西药治疗组方法 |
2.6.1 西药组方 |
2.7 中西药结合治疗组 |
2.7.1 中西药结合组方 |
3 结果与分析 |
3.1 对比结果 |
3.2 中药治疗组分析 |
3.3 西药治疗组分析 |
3.4 中西结合治疗组分析 |
4 讨论 |
(9)犬细小病毒高免卵黄抗体的制备及应用研究(论文提纲范文)
摘要 |
ABSTRACT |
第一部分 文献综述 |
第一章 犬细小病毒的研究进展 |
摘要 |
1 犬细小病毒概述 |
2 病原体 |
3 发病机理 |
4 临床症状 |
4.1 CPV-2感染典型症状 |
4.2 CPV-2肠炎型 |
4.3 CPV-2心肌炎 |
5 剖检变化及病理形态学观察 |
6 诊断方法 |
6.1 动物试验 |
6.2 病毒分离 |
6.3 电镜检查 |
6.4 免疫学诊断技术 |
6.5 分子生物学诊断技术 |
7 额外护理 |
8 免疫接种 |
8.1 有母源抗体犬的免疫接种 |
8.2 犬细小病毒免疫接种的新途径 |
参考文献 |
第二章 鸡卵黄抗体研究进展 |
摘要 |
1. 卵黄抗体的概况 |
2 卵黄抗体的特点 |
3 卵黄抗体的制备 |
3.1 免疫 |
3.2 卵黄抗体的形成 |
3.3 卵黄抗体的分离纯化 |
4 应用及发展前景 |
参考文献 |
第二部分 实验部分 |
第一章 犬细小病毒蜂胶灭活苗及其卵黄抗体的制备 |
摘要 |
1 材料与方法 |
1.1 试验材料 |
1.2 试验方法 |
2 试验结果 |
2.1 血清浓度对CPV在F81细胞上增殖的影响 |
2.2 测定疫苗毒的TCID_(50) |
2.3 病毒鉴定 |
2.4 间接ELISA检测CPV卵黄抗体效价 |
2.5 CPV卵黄抗体体外中和试验 |
3 讨论 |
3.1 CPV蜂胶灭活苗的制备 |
3.2 CPV卵黄抗体的提取 |
3.3 CPV卵黄抗体的检测 |
参考文献 |
第二章 :犬细小病毒卵黄抗体防治试验 |
摘要 |
1 材料与方法 |
1.1 试验动物与病例 |
1.2 试验材料 |
1.3 试验方法 |
2.结果 |
2.1 预防试验 |
2.2 临床治疗试验 |
3.讨论与结论 |
参考文献 |
全文总结 |
致谢 |
(10)犬α-干扰素的表达及其治疗犬病毒性肠炎临床疗效观察(论文提纲范文)
摘要 |
Abstract |
第一章 绪论 |
1.1 干扰素的研究进展 |
1.1.1 干扰素诱导产生途径 |
1.1.2 干扰素的三种效应途径 |
1.1.3 干扰素的主要生物学特性及其生物学功能 |
1.1.4 干扰素的基因工程 |
1.2 犬细小病毒的研究进展 |
1.2.1 犬细小病毒的生物学特性 |
1.2.2 犬细小病毒的致病性和致病机理 |
1.2.3 犬细小病毒病免疫预防程序 |
1.2.4 犬细小病毒性肠炎实验室诊断技术 |
1.3 干扰素在临床上的应用 |
1.4 本研究的目的与意义 |
第二章 犬干扰素α基因的克隆及表达 |
2.1 试验材料 |
2.1.1 实验动物,载体,宿主菌 |
2.1.2 培养基及主要溶液的配制 |
2.1.3 酶与试剂 |
2.1.4 主要仪器设备 |
2.1.5 试验引物 |
2.2 试验方法 |
2.2.1 犬α干扰素基因的克隆、测序 |
2.2.2 犬α干扰素在大肠杆菌中的表达 |
2.2.3 大肠杆菌表达的犬α干扰素包涵体的制备、纯化及复性 |
2.3 结果 |
2.3.1 犬α干扰素基因的克隆、测序与表达载体的构建 |
2.3.2 犬α干扰素基因的诱导表达 |
2.3.3 免疫印迹分析 |
2.3.4 重组pET32a-CaIFN-α蛋白的纯化 |
2.4 讨论 |
2.4.1 犬α干扰素基因的克隆和基因结构分析 |
2.4.2 犬α干扰素原核表达载体pETIFN-α的构建及在大肠杆菌中的表达 |
2.4.3 犬α干扰素基因表达蛋白的变性、纯化及复性分析 |
第三章 犬α干扰素在治疗犬病毒性肠炎上的应用研究 |
3.1 试验材料 |
3.1.1 供试动物 |
3.1.2 药物与试剂 |
3.1.3 研究资料的来源 |
3.2 试验方法 |
3.2.1 样本犬的选择 |
3.2.2 样本选择标准 |
3.2.3 犬细小病毒的临床诊断 |
3.2.4 实验室诊断(胶体金试纸条) |
3.2.5 治疗 |
3.2.6 观察指标 |
3.2.7 疗效判断 |
3.2.8 统计学处理 |
3.3 结果 |
3.3.1 胶体金试纸条检测结果 |
3.3.2 治疗组退热时间、腹泻天数、呕吐症状消失时间、需静脉补液天数比较 |
3.3.3 脱水纠正时间比较 |
3.4 讨论 |
3.4.1 干扰素可以干扰犬细小病毒的复制 |
3.4.2 干扰素具有治疗犬病毒性肠炎良好的临床效应 |
全文总结 |
参考文献 |
致谢 |
作者简历 |
四、肉用犬出血性肠炎的防治(论文参考文献)
- [1]犬细小病毒性肠炎的诊治[J]. 韩瑾瑾,赵静静,张秋霞. 养殖与饲料, 2019(07)
- [2]犬细小病毒病的诊断及二种单克隆抗血清的治疗效果比较[D]. 谈美玲. 华南农业大学, 2018(02)
- [3]犬细小病毒病病例治疗与分析[J]. 薛闯. 畜牧兽医科技信息, 2014(09)
- [4]犬细小病毒病的诊断与防治[J]. 刘海春. 上海农业科技, 2013(05)
- [5]藏獒源犬细小病毒的分离鉴定及其VP2基因序列分析[D]. 梁璐琪. 四川农业大学, 2012(07)
- [6]犬细小病毒性肠炎的诊断与防治[J]. 于志平. 中国畜牧兽医文摘, 2011(03)
- [7]犬细小病毒2型VP2基因在昆虫细胞中的表达及血清抗体间接ELISA检测方法的建立[D]. 王敏敏. 南京农业大学, 2011(06)
- [8]浅谈中西药结合治疗犬细小病毒病[J]. 王新丽. 中兽医学杂志, 2010(01)
- [9]犬细小病毒高免卵黄抗体的制备及应用研究[D]. 鲁敏. 南京农业大学, 2009(06)
- [10]犬α-干扰素的表达及其治疗犬病毒性肠炎临床疗效观察[D]. 王红. 中国农业科学院, 2009(S1)